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卜丽莎: 作品数：73 被引量：385H指数：12; 供职机构：吉林大学中日联谊医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省卫生厅科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>

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成人骨髓间充质干细胞体外多向分化潜能特性的研究被引量：26: 2005年; 目的　研究体外不同诱导条件下成人骨髓间充质干细胞向成骨细胞、脂肪细胞、神经细胞分化的能力。方法　用细胞化学方法对诱导后的骨髓细胞进行脂肪细胞特异油红 O染色 ;Von Kossa及改良的钙钴法进行成骨细胞鉴定 ;免疫组化方法检测诱导后的骨髓细胞神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 M(NF M)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)表达。结果　在不同的诱导条件下 ,诱导后的细胞油红 O染色胞浆内可见橙红色脂滴 ;Von Kossa染色可见细胞间布满黑色颗粒 ,提示有矿化基质沉积 ;改良钙钴法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色。免疫组化染色显示向神经细胞方向诱导后细胞 NSE(+)、NF M(+)、GFAP(- )。结论　成人骨髓间充质干细胞在体外具有多向分化的潜能。; 常颖齐欣卜丽莎徐忠信; 关键词：骨髓间充质干细胞神经细胞脂肪细胞成骨细胞 MSCS

重组pcDNA3.1-hBMP-2转染人骨髓基质干细胞和对其增殖及血管内皮生长因子表达的影响被引量：7: 2004年; 目的　构建人骨形成蛋白 - 2 (h BMP- 2 )真核表达载体 pc DNA3.1- h BMP- 2 ,转染人骨髓基质干细胞(MSCs) ,探讨基因转染对其增殖和血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。　方法　利用重组 DNA和基因克隆技术构建重组载体 pc DNA3.1- h BMP- 2 ;细胞培养和基因转染技术体外转染人 MSCs;免疫细胞化学、原位杂交和蛋白印迹法检测细胞 BMP- 2的表达 ;通过流式细胞仪和 VEGF探针原位杂交分析其对细胞增殖和 VEGF表达的影响。　结果　转染后细胞在 m RNA水平和蛋白质水平均表达 BMP- 2 ;转染后 S期细胞比例增多 ,提示细胞 DNA的合成增加 ;BMP- 2基因转染上调细胞 VEGF的表达。　结论　在脂质体介导下 ,pc DNA3.1- h BMP- 2转染 MSCs获得成功。基因转染后能促进细胞增殖并将通过使 VEGF的表达增加促进血管再生 ,为进一步骨缺损的基因治疗及构建组织工程骨奠定了实验基础。; 李建军王文军景元海卜丽莎杨绍娟张文岚徐莘香; 关键词：基因转染骨髓基质干细胞血管内皮生长因子骨形成蛋白-2

一种检测血清心肌肌钙蛋白I的生物传感器被引量：7: 2004年; 目的 :建立一种新的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)定量检测法。方法 :用亲和层析法提纯cTnI,免疫BALB C鼠及新西兰兔 ,并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法 ,制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜 ,特异性多克隆抗体作捕捉抗体 ,单抗 9F5作第二抗体 ,制成了表面等离子体共振生物传感器。比较了直接法和夹心免疫法检测血清cTnI的性能。结果 :夹心免疫法的最低检测限 (0 8μg L)是直接法的 5倍 (4 μg L) ,检测范围为 (0 8～ 2 0 ) μg L ,批内及批间精密度分别达 3 8%～ 5 1% ,6 3%～ 8 1%。用该夹心法及国外试剂盒分别检测 4 0名健康献血队员和 2 8例急性心肌梗死患者血清cTnI水平 ,两者符合率分别为 97 5 %和 94 6 %。结论 :所建立的夹心免疫法操作简单 ,特异性强 ,灵敏度高 ,符合临床诊断要求。; 魏景艳宋大千卜丽莎朱冬元牟颖刘霞张寒琦金钦汉张桂珍丁家华王维忠罗贵民; 关键词：急性心肌梗死

CD200基因重组质粒延长异基因小鼠皮肤移植物存活的实验研究被引量：1: 2006年; 目的:利用小鼠同种异体皮肤移植模型,观察重组基因CD200的抗排斥作用。方法:用肌肉注射并电转染的方法,将pcDNA3-CD200基因重组质粒100μg转染到受者BALB/c小鼠体内,同日进行皮肤移植,记录移植皮片的存活时间,采用RT-PCR和免疫荧光的方法检测CD200基因在受者体内的转录和表达,用HE染色观察移植皮片组织病理改变情况。用MTT法检测受鼠对供鼠及第三方供鼠的单向混合淋巴细胞反应(MLR)。结果:RT-PCR和免疫荧光检测表明,肌肉注射并电转染pcDNA3-CD200基因重组质粒后,可在肌肉组织中检测到CD200基因的转录和表达。空白对照组移植皮片平均存活时间为(8·67±1·75)天,pcDNA3空质粒组移植皮片平均存活时间为(8·00±1·55)天,pcDNA3-CD200组小鼠移植皮片平均存活时间为(11·78±1·86)天,移植皮片的存活时间显著延长(P<0·05);pcDNA3-CD200组移植皮片内浸润的炎细胞数量明显减少;MLR检测表明pcDNA3-CD200组的BALB/c小鼠对C57BL/6供鼠的MLR明显低于空白对照组(15天时0·11±0·02低于0·19±0·03,P<0·05),对第三供鼠的MLR也相似。结论:肌肉注射并电转染pcDNA3-CD200基因重组质粒可在小鼠体内大量转录和表达并延长了皮肤移植物的存活时间,减少移植物内炎细胞浸润,降低混合淋巴细胞反应,具有显著的抗排斥作用。; 侯治富郝兵郑永晨高嵩卜丽莎王维忠; 关键词：皮肤移植移植排斥

抗体中加入锗合成物防治难治性肺炎: 卜丽梅盛辉卜丽莎卢连根杜文波; 该项目应用生物学技术，从难治性肺炎患者中分离出绿脓杆菌、大肠杆菌及肺炎克雷白杆菌，经处理后获得灭活菌作为抗原，后经免疫balb/c小鼠，再经过细胞融合、克隆化、扩培养、小鼠腹腔接种、抗体纯化最后获得高效价的抗绿脓杆菌、大...; 关键词：; 关键词：交联物单克隆抗体

5-Fu对人结肠癌细胞凋亡及相关基因表达的影响被引量：3: 2007年; 目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人结肠癌细胞凋亡及其相关基因表达的影响。方法:Hct/8细胞分为5-Fu组和对照组,通过凋亡细胞数量、形态、基因组DNA片段化及流式细胞仪检测观察5-Fu对人结肠癌细胞凋亡情况的影响,并通过基因芯片测定相关基因改变。结果:吖啶橙染色及基因组DNA电泳显示5-Fu组凋亡细胞数量明显多于对照组(P<0.01);基因芯片检测显示,5-Fu致多种基因表达发生改变,尤其是与DNA损伤修复相关基因出现表达下调。结论:5-Fu具有致人结肠癌细胞凋亡的作用,其原因是由于多种基因表达改变相互作用影响所致,尤其是DNA损伤修复相关基因的改变致不能及时修复受损的基因,最终致癌细胞发生凋亡。; 崔亚南薄丽华薛立娟杨绍娟卜丽莎高申; 关键词：结肠肿瘤细胞凋亡基因芯片基因表达

人CD200基因克隆及pcDNA3-CD200表达质粒的构建被引量：3: 2005年; 目的 :克隆人 CD2 0 0基因并构建 pc DNA3- CD2 0 0表达质粒。方法 :采用逆转录聚合酶链式反应(RT- PCR)法 ,从用 2 0 0 μg Con A刺激 6 2 h后的正常人外周血白细胞中扩增出 CD2 0 0基因 ,与 p MD18T载体连接后 ,做全自动 DNA测序 ,并用亚克隆的方法构建 pc DNA3- CD2 0 0表达质粒。结果 :从正常人外周血白细胞扩增的人 CD2 0 0基因与 Gen Bank中人 CD2 0 0序列 (NM　 0 0 5 94 4 )完全相同。结论 :成功地克隆人 CD2 0 0基因并构建了 pc DNA3- CD2 0 0表达质粒。; 侯治富高嵩郑永晨郝兵卜丽莎郭楠王维忠; 关键词：CD200 克隆分子

Smad蛋白家族与骨形态发生蛋白信号传导被引量：11: 2002年; Sm ad蛋白直接参与转化生长因子 (TGF-β)、骨形态发生蛋白 (BMP)和活化素的信号传导 ,TGF-β和 BMP是调节骨代谢的信息转导是由 Sm ad蛋白家族成员承担的。在已经鉴定的 8种 Sm ads成员中 ,与骨代谢密切相关的是 Sm ad 1、Sm ad 5及 Smad 4。实验证明在成骨细胞系 Sm ad是 BMP信号转导的关键因子 ,对 Smad蛋白家族的了解将有助于对 TGF-β和; 张文岚孙文伟卜丽莎李广生; 关键词：骨形态发生蛋白成骨细胞分化 BMP

稳定高效表达p21^(WAF1/CIP1)的HCT/8-WAF1细胞株的建立: 2003年; 目的 :建立高效、稳定表达 p2 1 WAF1/ CIP1大肠癌细胞株 HCT/8- WAF1。方法 :应用阳离子脂质体分别将带有目的基因 WAF1的 pc DNA3及空白 pc DNA3质粒转染大肠癌细胞株 HCT/8,经G41 8进行阳性筛选 ,将筛选的阳性细胞连续传代培养 ,应用免疫荧光技术监测 p2 1 WAF1/ CIP1的表达。结果 :经 G41 8筛选后 ,空白对照细胞全部死亡 ,转染目的基因及空质粒组的细胞存活 ,可连续传代培养 30代以上 ,并选择 HCT/8作对照 ;免疫荧光技术监测 p2 1 WAF1/ CIP1表达结果显示转染目的基因的 HCT/8细胞 p2 1 WAF1/ CIP1表达阳性细胞率 ( 89.96% )显著高于转染空质粒组 ( 8.0 2 % )和空白对照组 ( 3.39% ) ( F=1 6 60 8.99,P<0 .0 0 1 ) ;各代间差异无显著性 ( F=2 .1 71 ,P>0 .0 5 )。结论 :HCT/8- WAF1是一株高效、稳定表达 p2 1 WAF1/; 卜丽莎侯睿智杜珍武王维忠; 关键词：P21^WAF1/CIP1

过量氟对大鼠脑肝肾细胞周期与细胞凋亡的影响: 本研究为了进一步探讨氟中毒与氧化应激及细胞凋亡的关系,在营养平衡饲料和偏食饲料条件下分别投予不同浓度氟化物,选择脑、肝及肾组织为靶器官,应用流式细胞仪系统观察了氟对三种组织活性氧产生、细胞凋亡及细胞周期的影响。研究结果表...; 张桂珍高申郑德明徐辉刘霆卜丽莎; 文献传递

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