吴友兵
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：同济大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 乳腺特异高表达人促红细胞生成素转基因奶山羊的制备被引量：1
- 2007年
- 目的制备乳腺特异性高表达人促红细胞生成素(hEPO)转基因奶山羊。方法采用牛β-乳球蛋白基因(BLG)调控元件和hEPO全长编码序列基因组DNA构建真核表达载体,应用受精卵原核注射的方法制备hEPO转基因山羊。结果在原核注射获得的188头羔羊中,经Southern blot法检测有4头羊含有hEPO基因,其中3头为母羊,1头公羊于出生后20d死亡;3头转基因母羊hEPO基因的拷贝数分别为1、10、2;Western blot检测结果显示转基因羊乳中的hEPO分子质量为32kDa;MTT法检测结果表明,在泌乳10d的3只转基因羊乳汁中,每毫升乳汁中hEPO活性分别达到1.17×102IU、1.90×104IU、1.91×104IU。结论牛BLG能够调控hEPO基因在山羊乳腺中高表达,为实现其他药用蛋白在山羊乳腺中表达奠定了基础。
- 张爱民陈建泉刘思国沙红英徐旭俊吴友兵陈娟成国祥
- 关键词：奶山羊乳腺表达
- 激素短处理技术在青年转基因山羊人工诱导泌乳上的应用
- 2009年
- 利用外源激素短处理技术,对青年期转基因山羊(10～12月龄)进行人工诱导泌乳,并分析外源激素的处理对转基因山羊乳房发育、泌乳规律、乳汁成分、身体健康的影响,评估此技术对青年转基因山羊进行人工诱导泌乳的可行性。试验组A:8只转基因母羊联合注射雌激素和孕酮(E2∶P4按1∶8)配以利血平进行人工诱导泌乳;试验组B:另7只转基因母羊采用E2∶P4按1∶3进行人工诱导泌乳;并且选择同龄的10只普通母山羊作为对照组C,人工诱导泌乳方案同试验组A;选择同龄的10只普通母山羊作为对照组D,人工诱导泌乳方案同试验组B。结果表明:①转基因山羊经高比例的雌激素水平(E2∶P4=1∶3)的诱导作用,乳腺发育充分,乳房饱满且内部充盈乳汁,乳房容积率是低雌激素水平组羊(E2∶P4=1∶8)的2倍;②最初1周,经高比例的雌激素水平诱导的转基因山羊产奶量是低比例的雌激素水平组的2倍,差异极显著(182 mL/d±25 mL/dvs93 mL/d±12 mL/d,P<0.01);③转基因山羊经激素诱导泌乳,在最初1周内乳汁分泌量呈先下降后逐步上升的变化规律;④通过人工激素诱导转基因山羊产生的乳汁,乳糖含量为4.35%～4.66%,乳脂含量3.71%～4.16%,蛋白质含量4.06%～4.11%,均与对照组乳汁无显著差异;⑤诱导泌乳,对山羊自身的健康无显著影响,试验后,能够恢复情期并产羔。可见外源激素人工诱导泌乳短处理技术在青年转基因山羊上应用是可行的。
- 吴友兵徐旭俊王璞何俊民陈建泉
- 关键词：转基因山羊诱导泌乳外源激素
- 奶牛卵泡超数同步发育及其卵母细胞的发育潜能
- 2008年
- 目的建立促奶牛卵泡超数同步发育的方法,并利用体细胞核移植和分子技术评价来自这些卵泡的卵母细胞发育潜能。方法用E2-P4对淘汰的高产奶牛进行联合处理后,分别对其实施不同组合的外源促性腺激素处理[FSH12h组,FSH48h组,FSH48h-LH6h组(简称LH6h组),FSH48h-LH26h组(简称LH26h组)]以促进其卵泡超数同步发育;然后从卵泡中回收COCs进行体外成熟,排放第一极体的卵供作优质种牛的体细胞核转移(nucleartransfer,NT)受体,以评价卵的发育潜能。结果E2-P4能成功地诱导奶牛卵巢中产生一个新的卵泡起始波,并能保证卵泡在外源促性腺激素作用下实现超数同步发育;上述四组不同组合外源促性腺激素处理的卵母细胞衍生的NT重构胚经体内培养7d后,后3组的囊胚发育率显著高于FSH12h组和对照组(P<0.01);将这些克隆囊胚移植同步发情的受体牛子宫后,仅LH26h组的卵所获得的克隆胚能实现全程发育(直至克隆小牛出生)。经RT-PCR分析颗粒细胞中FSHr、LHr和连接蛋白43(Connexin43,Cx43)等mRNA含量变化,以及Western印迹分析其Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化,证实该组卵巢提供的同步发育卵泡为早期闭锁卵泡。结论E2-P4-FSH48h-LH26h组合处理可人为调控牛卵泡的同步发育;处于早期闭锁状态卵泡的卵母细胞具备较高的发育潜能。
- 陈娟沙红英田海滨丁利军黄志军陈建泉葛来香徐旭俊吴友兵成国祥
- 关键词：奶牛
- 山羊MII期卵母细胞胞质支持异种间克隆胚的着床前发育(英文)
- 2008年
- 研究去核山羊(Capra hircus)体内成熟的M II期卵母细胞与异种成年的哺乳动物(包括山羊、波尔山羊、牛、塔尔羊、熊猫)及人的成纤维细胞融合形成的体细胞核移植胚胎着床前的发育能力。结果显示这些异种体细胞核移植重构胚可以完成着床前发育,并形成囊胚。种内体细胞核移植胚的融合率和囊胚发育率分别为78.67%(557/708)和56.29%(264/469);亚种间或种间体细胞核移植胚的融合率和囊胚发育率分别为:波尔山羊78.18%(541/692)、33.90%(40/118),牛70.53%(146/207)、22.52%(25/111),塔尔羊53.51%(61/114)、5.26%(3/570),熊猫79.82%(1159/1452)、8.35%(75/898),人68.76%(317/461)、5.41%(16/296)。由此结果得出以下结论:(1)山羊M II期卵母细胞胞质与供核细胞之间的亲缘性不影响两者的融合率;(2)山羊M II期卵母细胞的胞质能支持异种间体细胞核移植胚的着床前发育;(3)亲缘关系近的种间核移植胚的囊胚发育率高于亲缘关系远的种间核移植胚的。
- 徐旭俊刘国辉陈建泉陈娟沙红英吴友兵张爱民成国祥
- 关键词：山羊胞质发育能力
