吴恒芳
- 作品数：31 被引量：93H指数：5
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- 心肌肌钙蛋白I磷酸化及降解与肥厚型心肌病
- 2006年
- 目的:观察心肌肌钙蛋白I在肥厚型心肌病小鼠心肌组织中的磷酸化与降解作用。方法:实验于2005-03/2006-01在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所及南京医科大学动物中心SPF级动物房进行。取4周龄BALB/c雌鼠12只,随机分为模型组6只,正常对照组6只,适应性饲养1周后模型组小鼠转染带有EGFP报告基因的CTnIArg146Trp突变基因。饲养至20周龄时二维超声心动图检测证实模型组小鼠室间隔肥厚,断颈处死两组小鼠后,称取小鼠心脏质量(湿),心尖部心肌组织光镜病理学检查,小鼠心肌组织进行WesternBlotting检测重组蛋白、肌钙蛋白I的磷酸化及降解表达,GAPDH作为内参半定量。结果:12只小鼠进入结果分析。①模型组小鼠心脏明显增大,心脏质量(湿)/体质量比显著高于正常对照组(P<0.01);模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱、间质血管增生、少量炎性细胞浸润;两组血清肌钙蛋白I水平均正常(P>0.05)。②模型组小鼠心肌组织用抗EGFP单克隆抗体在Mr55000,24000检测到突变CTnI-EGFP及其降解片断表达。③模型组在Mr55000,30000,28000分别检测到磷酸化突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000见磷酸化肌钙蛋白I表达,模型组内源性磷酸化肌钙蛋白I表达明显高于对照组(1.18±0.15,0.97±0.15,P<0.05)。④去磷酸化抗肌钙蛋白I单克隆抗体在Mr55000,28000,检测到去磷酸化突变肌钙蛋白I-EGFP、内源性肌钙蛋白I降解片断表达,正常对照组未见去磷酸化肌钙蛋白I表达;用针对不同位点的抗肌钙蛋白I单克隆抗体3E3,2I-14,8I-7,MF4分别在Mr55000,30000,28000检测到突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000,见肌钙蛋白I表达,未见降解片断。结论:AdcCTnIArg146Trp-EGFP突变基因在小鼠体内成功转染心肌组织并有明显表达及降解片断出现,小鼠心脏呈现明显室间隔肥厚;小鼠内�
- 朱春霞吴恒芳马继政朱舒舒陈相健卞智萍徐晋妉杨笛张寄南
- 关键词：肌钙蛋白I心肌
- 肥厚梗阻型心肌病化学消融术酒精用量对术后早期血流动力学和心脏重构的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨经皮室间隔心肌化学消融术(PTSMA)最适酒精使用剂量。方法:连续选择2007年1月～2010年12月在本院接受低剂量酒精(≤2.0 ml)消融的肥厚梗阻型心肌病(HOCM)患者10例;按1∶2配比的病例对照研究,选择2000年1月～2006年12月接受较大剂量酒精(>2.0 ml)消融治疗的患者20例作为历史对照组,分别评估两种治疗方案对术后早期血流动力学和心脏重构的影响。结果:低剂量和对照组术后即刻[(28.0±8.8)mmHg和(27.5±7.2)mmHg]、术后3个月[(29.5±6.6)mmHg和(28.1±5.0)mmHg]的左心室流出道压力阶差(LVOTPG)均较基线时[(69.9±13.1)mmHg和(70.6±13.4)mmHg]显著性下降(P<0.01),术后室间隔厚度明显减小(P<0.01),左心室舒张末内径无变化;而两组间术后即刻、术后3个月LVOTPG水平及下降幅度均无差异(P>0.05);相关分析显示,酒精用量分别与术后即刻LVOTPG以及术后3个月LVOTPG、室间隔厚度和左室舒张末内径等变化无相关性(P>0.05)。结论:小剂量酒精消融同样导致术后早期血流动力学和心脏结构的改善。
- 王晖徐东杰吴恒芳朱铁兵王连生戴振华杨迪杨志健曹克将
- 关键词：经皮室间隔心肌化学消融术
- 黄芪甲苷逆转血管紧张素Ⅱ引起的主动脉平滑肌细胞线粒体功能障碍被引量：5
- 2015年
- 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、AngⅡ24 h处理组、48 h对照组、AngⅡ48 h处理组、As-Ⅳ治疗组。24 h对照组和AngⅡ24 h处理组使用线粒体呼吸功能检测仪进行线粒体呼吸功能检测,线粒体ATP含量检测;48 h对照组、AngⅡ48 h处理组和As-Ⅳ治疗组进行线粒体呼吸功能检测、线粒体ATP含量检测、电镜观察线粒体结构变化,共聚焦显微镜检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和Mn-SOD活性检测。结果:AngⅡ24 h处理组与24 h对照组相比,线粒体耗氧率(oxygen consumption rates,OCRs)出现下降,线粒体ATP含量减少(P≤0.05);AngⅡ48 h处理组与48 h对照组相比,线粒体OCRs显著下降,线粒体ATP含量明显减少(P<0.05),线粒体出现嵴模糊、肿胀、空泡,线粒体内ROS水平升高(P<0.05),Mn-SOD活性下降(P≤0.05);As-Ⅳ治疗组较AngⅡ48 h处理组线粒体OCRs和线粒体ATP含量明显回升(P<0.05),线粒体形态结构损伤减轻,线粒体内ROS水平降低(P<0.05),Mn-SOD活性升高(P≤0.05)。结论 :As-Ⅳ可以通过增强线粒体Mn-SOD活性,降低线粒体内ROS水平,进一步减轻线粒体结构损伤并提高线粒体OCRs和ATP含量,从而逆转AngⅡ引起的线粒体功能障碍。
- 路遥徐晋妉卞智萍吴恒芳顾春荣陈相健杨笛
- 关键词：黄芪甲苷线粒体功能障碍活性氧平滑肌细胞
- 肥厚型心肌病发病与心肌肌钙蛋白IArg145Trp突变研究
- 背景:肥厚型心肌病/(HCM/)是一种常染色体显性遗传的心肌疾病,主要表现为心肌肥厚,心肌细胞排列紊乱及间质纤维化。其人群发病率约0.2/%,是心血管系统最早发现且最常见的遗传性疾病。目前已检测出近300种突变与HCM的...
- 吴恒芳
- 关键词：肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白T复制缺陷型腺病毒成年大鼠心肌细胞无血清培养显微注射
- 文献传递
- 心脏肿瘤学(CardiOncology)--面对肿瘤病人心脏问题的一个新学科分支
- 陈相健吴恒芳赵树梅顾春荣杨笛李虹伟顾复生张寄南
- OX40L逆向信号对主动脉内皮细胞胞浆游离钙浓度的影响
- 背景:炎症反应在急性冠状动脉综合征及其它动脉粥样硬化性疾病中扮演重要的角色,并且OX40/OX40L双信号通路具有促进和加重炎症反应的作用。同时,在动脉粥样硬化斑块部位的巨噬细胞、内皮细胞以及淋巴细胞中均可检测到丰富的O...
- 刘强韩学府张丹丹吴恒芳卞智萍张寄南杨笛
- 关键词：游离钙浓度
- 文献传递
- 黄芪甲苷对小鼠心肌梗死后左室功能的作用
- 研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对小鼠心梗后左室功能的影响及可能机制.分离冠脉左前降支(LAD)与伴行静脉并于左心耳下缘2mm处结扎制备心梗模型(手术组),结扎后小鼠每日腹腔注射10 mg·kg AS-Ⅳ(治疗组);以分离LAD...
- 李苏陈相建吴恒芳杨笛
- C反应蛋白对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。将内皮细胞用1μmol/L阿托伐他汀预处理30 min后,加入100 mg/L CRP,观察阿托伐他汀对CRP作用的影响。结果:与对照组相比,CRP可显著升高内皮细胞胞内[Ca2+]i并呈剂量依赖关系;阿托伐他汀可明显降低CRP引起的[Ca2+]i升高。结论:CRP可导致和加重小鼠主动脉内皮细胞的炎症反应,阿托伐他汀可部分拮抗CRP的致炎作用。
- 刘强张丹丹徐晋妉卞智萍吴恒芳顾春荣陈相健杨笛
- 关键词：C反应蛋白内皮细胞动脉粥样硬化
- 黄芪甲苷改善过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激损伤的研究被引量：10
- 2017年
- 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_2O_2损伤组细胞经H_2O_2(400μmol/L)持续损伤36 h,AS-Ⅳ治疗组细胞经H_2O_2损伤12 h后加入含50μg/m L AS-Ⅳ的培养基继续干预处理24 h。观察AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤及线粒体功能损伤的修复作用。结果:H_2O_2损伤后HAECs丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶活性及线粒体活性氧(ROS)水平显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及线粒体膜电位显著降低;H_2O_2损伤的HAECs经AS-IV治疗后,HAECs的MDA含量、NADPH氧化酶活性及线粒体ROS含量明显降低,SOD和Mn-SOD活性及线粒体膜电位显著增高。结论:AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤具有保护作用,提高线粒体的抗氧化功能是其可能的机制之一。
- 陈宇琼孙东岳吴恒芳卞智萍陈相健杨笛
- 关键词：黄芪甲苷线粒体过氧化氢
- 经皮室间隔心肌化学消融酒精用量对围手术期心肌损伤和心律失常的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨经皮室间隔心肌化学消融(PTSMA)酒精用量与围术期心肌损伤和心律失常发生的关系。方法:连续选择接受低剂量酒精(≤2ml)消融的肥厚型梗阻性心肌病(HOCM)患者10例(低剂量组),从资料库中筛选常规较大剂量酒精(>2ml)治疗的患者20例作为对照组,分别记录两组患者围术期血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值及心律失常的发生情况,同时评估两种剂量酒精对术后血流动力学和心脏结构的影响。结果:低剂量组和对照组PTSMA围术期CK-MB峰值分别为(126.9±55.3)U/L和(232.8±58.7)U/L(P<0.01);相关分析显示,CK-MB峰值与酒精剂量呈显著正相关(r=0.646,P<0.01);两组发生急性房室传导异常(含束支、室内传导和Ⅰ～Ⅲ度房室传导阻滞)分别为6例(60%)和13例(65%),发生Ⅲ度房室传导阻滞分别为2例(20%)和5例(25%);两组术后左心室流出道压力阶差(LVOTPG)和室间隔厚度较基线水平均显著下降(均P<0.01),但两组间术后LVOTPG水平及下降幅度均差异无统计学意义。结论:低剂量酒精能减少PTSMA围术期心肌坏死,并显著改善术后血流动力学和心脏结构,但不能减轻传导系统的损伤。
- 杨吉猛王晖徐东杰吴恒芳朱铁兵王连生戴振华杨迪杨志健曹克将
- 关键词：心律失常心肌损伤
