吴经才
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
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- 重组质粒pPAHD1的限制性内切酶图谱分析
- 1990年
- 本文对我们构建的含有青霉素酰化酶(Acylace)基因的重组质粒pPAHD1进行了限制性内切酶图谱的测绘。使用了限制酶14种,证明BglⅡ,SalⅠ,SmaⅠ和BamHⅠ在重组质粒上各有切点一个;EcoRⅠ有切点两个:HindlⅡ,AvaⅠ各有切点三个;PvuⅠ有切点四个;EcoRⅤ和XmnⅠ各有切点五个。
- 宋陆铧吴芝清吴经才
- 关键词：质粒青霉素酰化酶
- 青霉素酰化酶酶活的荧光胺测定法
- 1989年
- 青霉素酰化酶酶活可以利用荧光胺和6-氨基青霉烷酸(6-APA)反应加以测定。这一方法操作方便、灵敏度高。底物青霉素对反应没有干扰,其它干扰物质的影响可以通过控制pH4.0加以消除。与6-硝基3-苯乙酰氨基苯甲酸(NIPAB)方法相比,荧光胺方法可以反映酶与其真正底物青霉素之间的作用关系,在数值上,两种方法具有相关性,灵敏度高6倍。与对一二甲胺基苯甲醛(PDAB)法相比,灵敏度高3.6×10~4倍。
- 戴燕静天玉吴经才
- 关键词：青霉素酰化酶酶活测定法
- 探针pBLU的制备与标记
- 1995年
- 本文介绍了检查导入改造的谷蛋白基因情况时所用DNA探针的制备与标记.采用长臂光敏生物素取代同位素对探针进行标记,获得大量可长期保存的DNA探针,标记灵敏度达pg级.
- 宋陆铧吴经才
- 关键词：DNA探针
- 用脱乙酰几丁质制备固定化青霉素酰化酶被引量：4
- 1993年
- 以青霉素酰化酶基因工程菌为酶源,选用脱乙酰几丁质为载体,试用了4种固定化方法,从4个方面(pH、温度、盐浓度和结合酶量)摸索了固定化条件。结果在适宜条件下获得比活900U/g(干)(NIPAB法)的固定化青霉素酰化酶,回收率可达56%。并测定其酶学性质。
- 侯建明吴经才杨秀琴
- 关键词：青霉素酰化酶
- 615小鼠血红蛋白α链的氨基酸组成及个别肽段的氨基酸序列
- 2001年
- 用CM Cellulose 2 3柱层析分离纯化了 6 15小鼠珠蛋白α链 ,测定其N端氨基酸残基为缬氨酸 .6 15小鼠珠蛋白α链含有 141个氨基酸残基 ,其中 19个亮氨酸残基 ,10个组氨酸残基 ,9个缬氨酸残基 ,上述氨基酸残基的数目与文献中其亲本C57BL不同 .用胰蛋白酶水解 6 15小鼠珠蛋白α链 ,发现有不溶性的‘核心’和可溶性的酶解片段 .其中一个酶解肽段从N端数第 8位氨基酸残基发生了突变 ,由亲本的缬氨酸变为亮氨酸 .
- 武金霞张贺迎王建平吴经才
- 关键词：615小鼠珠蛋白氨基酸组成氨基酸序列血红蛋白
- 大肠杆菌108(pPAHD1)青霉素G酰化酶的纯化与结晶
- 1992年
- 大肠杆菌108(pPAHD1)发酵液经离心沉淀,蔗糖高渗处理得到青霉素酰化酶粗品,再经苯乙酰胺-Sepharose4B疏水层析和DEAE-Cellulose DE-52分离纯化,得到可用于结晶的青霉素G酰化酶。在55％饱和度硫酸铵-0.05mol/LPBS,pH7.5条件下批量静置得到该酶晶体。
- 任向宇王建平吴经才
- 关键词：纯化青霉素酰化酶
- 硅藻土在青霉素G酰化酶提纯中的应用被引量：2
- 1994年
- 国产硅藻土经氢氧化铵处理后可用于从发酰液中直接取青霉素Ｇ酰化酶，平均吸附量为９０Ｕ／ｇ。吸附的酶可用２２％硫酸铵－０．３ｍｏｌ／ＬＰＢＳ（ｐＨ８．０）溶液洗脱。平均比１８Ｕ／１８Ｕｍｇ蛋白（ＮＩＰＡＢ法）。硅藻土可反复使用。苯乙酰胺－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ树脂可对酶作进一步的纯化。
- 任向宇王建平张贺迎吴经才
- 关键词：青霉素G酰化酶硅藻土提纯
- 青霉素酰化酶产生菌的分子育种及其产酶条件的研究被引量：5
- 1989年
- 用EcoR1分别酶切质粒pACYC184和Ec108染色体,经连接、转化、筛选,得到7株克隆了青霉素酰化酶基因的转化体-C600(pPAHD1-7)。重组质粒pPAHD1在不同受体细胞内的酶活表达水平相差20倍。据此构建的工程菌其青霉素酰化酶活比出发菌株提高4～5倍。本文还对工程菌的产酶条件进行了研究。
- 杨秀琴吴芝清宋陆铧王彦芳张贺迎汪丽珠吴经才
- 关键词：青霉素酰化酶分子育种产酶条件
