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宁叶
作品数:
2
被引量:28
H指数:2
供职机构:
北京大学生命科学学院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
“九五”国家科技攻关计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
茹炳根
北京大学生命科学学院蛋白质工程...
施定基
中国科学院植物研究所
俞梅敏
北京大学生命科学学院蛋白质工程...
罗娜
北京大学生命科学学院蛋白质工程...
周杰
北京大学生命科学学院
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作者
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罗娜
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宁叶
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生物化学与生...
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2002
1篇
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通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究
被引量:12
2002年
用PCR方法从海洋单细胞蓝藻聚球藻 70 0 2 (Synechococcussp .PCC 70 0 2 )基因组DNA中扩增得到藻蓝蛋白β亚基基因 (cpcβ)的上游序列 (Pcpcβ) ,及编码谷氨酰胺合成酶的 glnA基因片段 .以Pcpcβ作为启动子、以glnA基因片段作为整合平台 ,构建含有小鼠金属硫蛋白 Ⅰ (mMT Ⅰ )cDNA的同源整合表达载体 pKGC MT .通过自然转化法将整合表达载体导入聚球藻 70 0 2中 ,经氨苄青霉素筛选 ,得到遗传性状稳定的转基因藻 .PCR检测证明mMT Ⅰ基因已整合到蓝藻基因组DNA上 ;蛋白质印迹表明mMT Ⅰ已在蓝藻中表达 ;ELISA结果显示mMT Ⅰ在蓝藻中的表达量约为 80 0 μg/ g .
周杰
罗娜
宁叶
施定基
俞梅敏
茹炳根
关键词:
小鼠
聚球藻7002
同源重组
人尿激酶原基因在聚球藻7002中的克隆和表达
被引量:19
2000年
将人尿激酶原基因连在PpsbA启动子之后 ,再将启动子连同基因克隆入整合载体pTZ18中。pTZ18_8中含有一段来源于集胞藻 6 80 3的psbB基因片段作为整合平台。将整合表达载体用直接转化的方法转入聚球藻Syne chococcussp .PCC 70 0 2中。经氨苄青霉素筛选并扩大培养后的转化子进行DNA斑点印迹及Western印迹 ,证明了基因的存在及表达。菌体破碎后的上清液有较高的溶解纤维蛋白的活性 ,说明表达产物未形成包含体。经ELISA测定 ,表达量为每克鲜藻 2× 10 -5~ 3× 10 -5g蛋白。
罗娜
宁叶
施定基
周先碗
俞梅敏
茹炳根
关键词:
尿激酶
溶栓剂
聚球藻7002
克隆
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