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张健慧

作品数：6 被引量：5H指数：2
供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇整合酶
  • 4篇艾滋病
  • 4篇艾滋病毒
  • 4篇HIV-1整...
  • 4篇病毒
  • 3篇单链
  • 3篇单链抗体
  • 3篇抗体
  • 3篇活性
  • 2篇HIV
  • 2篇纯化
  • 1篇影响因素
  • 1篇生物活性
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学活性
  • 1篇噬菌体
  • 1篇菌体
  • 1篇活性测定
  • 1篇活性检测
  • 1篇合酶

机构

  • 6篇军事医学科学...
  • 2篇中国药科大学

作者

  • 6篇张健慧
  • 4篇凌世淦
  • 3篇马贤凯
  • 3篇李南
  • 3篇孟莉
  • 3篇宋晓国
  • 3篇韩保光

传媒

  • 3篇细胞与分子免...
  • 1篇国外医学（病...
  • 1篇军事医学科学...
  • 1篇中国药科大学...

年份

  • 2篇2000
  • 2篇1999
  • 2篇1998
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
HIV-1整合酶的纯化及活性检测
2000年
含整合酶基因的重组质粒 pET p31在E coliBL2 1(DE3)中以包含体形式高效表达HIV 1整合酶 (p31蛋白 )。初步纯化的包含体用 8mol/L尿素变性溶解 ,经阳离子交换剂柱层析和分子筛柱层析纯化 ,并通过梯度透析的复性过程去除尿素 ,获得可溶性及高纯度 p31。测定证实 ,复性后的 p31蛋白呈现良好的 3′加工。
李南张健慧凌世淦
关键词：艾滋病毒整合酶包含体纯化
HIV-1整合酶单链抗体对整合酶生物学活性抑制作用的研究被引量：1
1999年
从抗ＨＩＶ１ 整合酶（ｉｎｔｅｇｒａｓｅ ，ＩＮ） 单链抗体（ｓｉｎｇｌｅ ｃｈａｉｎ ｆｒａｇ ｍｅｎｔ ｖａｒｉａｂｌｅ ，ＳｃＦｖ） 的ＨＢ２１５１ 表达菌中选取３ 个克隆，进行ＳｃＦｖ 的可溶性表达与纯化，并观察ＳｃＦｖ 对ＩＮ 体外生物学活性的影响。结果显示，在ＳｃＦｖ ：ＩＮ摩尔浓度为８ ∶１ 时，３ 个克隆的ＳｃＦｖ 可明显抑制ＩＮ 的３′端加工、链转移及去整合活性； 而相同浓度的ＢＳＡ 及抗人交联纤维的ＳｃＦｖ 对ＩＮ 活性无明显影响。测序结果表明，此３ 个克隆的ＳｃＦｖ 基因序列完全相同，符合鼠抗体可变区序列。完全抑制３′端加工及去整合反应所需ＳｃＦｖ 的浓度高于链转移反应。研究结果提示，抗ＩＮ 的ＳｃＦｖ 可抑制ＩＮ 的体外生物学活性，此结论为进一步研究此类ＳｃＦｖ 对ＨＩＶ 在细胞内复制的影响及其机制奠定了基础。
张健慧李南宋晓国孟莉韩保光凌世淦马贤凯
关键词：艾滋病毒整合酶生物活性单链抗体
HIV-1整合酶单链抗体在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定被引量：3
1999年
将具有HIV－1整合酶结合活性的单链抗体重组噬菌体感染HB2151大肠杆菌，经IPTG诱导．在周质腔萃取物及培养基上清中，均检测到有较特异与整合酶结合的可溶性单链抗体的表达。利用HiTrapAnti－Etags对单链抗体进行了亲和层析纯化。Western-blot结果初步表明，单链抗体不仅可与整合酶的单体反应，而且也可与其二聚体结合。提示：研制的单链抗体可用于对HIV－1整合酶活性影响的研究。
张健慧宋晓国孟莉冯玉英韩保光凌世淦马贤凯
关键词：整合酶单链抗体艾滋病毒大肠杆菌纯化
HIV整合酶研究进展被引量：1
1998年
HIV整合酶（Integrase，IN）催化了HIV在人体内复制的基本步骤──病毒的双链DNA整合到宿主细胞DNA的过程，因此，IN为AIDS治疗的理想靶位。IN的分子结构尚未完全明确，对其功能的研究常分区进行。一些化合物可抑制IN在体外的催化活性，显示可能具有治疗AODS的潜在作用。本文综述了近年来HIVIN的结构、功能及其抑制剂的研究进展。
张健慧
关键词：HIVHIV整合酶
利用噬菌体表面呈现技术制备HIV-1整合酶单链抗体的初步研究被引量：2
1998年
目的：研制ＨＩＶ－１整合酶（ｉｎｔｅｇｒａｓｅ，ＩＮ）的重组噬菌体单链抗体。方法：采用噬菌体表面呈现方法。结果：由ＩＮ蛋白免疫的小鼠脾细胞ｍＲＮＡ中构建了单链抗体基因ｃＤＮＡ文库，克隆入噬菌粒载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ，经转化大肠杆菌ＴＧ１，获得了库容为３．５×１０５的表达文库。利用包被在酶联板上的ＩＮ蛋白进行四轮亲和富集，筛选出７６株具有ＩＮ结合活性的重组噬菌体。对随机挑选的一株克隆进行了ＤＮＡ序列分析，证明其符合小鼠抗体序列。结论：获得了抗ＨＩＶ－１ＩＮ的噬菌体单链抗体，为其进一步研究打下基础。
张健慧孟莉韩保光宋晓国冯玉英凌世淦马贤凯
关键词：艾滋病毒整合酶单链抗体噬菌体
影响HIV—1整合酶活性因素的探讨
2000年
目的：探讨HIV－1整合酶活性的影响因素，优化其活性测定条件。方法 以同位素标记的寡核苷酸链为底物，体外模拟HIV－1病毒DNA整合过程，检测HIV－1整合酶的3'端加工，链转移和去整合活性，并考察HIV－1整合酶活性测定中，二价高子、酸碱度、温度和时间等的影响。结果 Mn^2+对整合酶活性的辅助作用，明显强于Mg^2+，而3'端加工反应对二价离子的依赖性较小。酸碱度对各种反应的影响较大，温度和时间影响较小。结论 整合酶活性检测的最佳反应条件为pH7.0-7.5,37℃，15mmol/L M^2+及反应时间1h。
李南张健慧等
关键词：HIV整合酶活性测定影响因素
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