张博
- 作品数：33 被引量：82H指数：5
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生电气工程更多>>
- 一种用于退化草地恢复的翻土装置
- 本实用新型涉及翻土装置技术领域，且公开了一种用于退化草地恢复的翻土装置，包括机座，所述机座表面的右侧固定安装有手持推把，所述机座顶部的左侧固定安装有安装箱，所述安装箱的内腔卡接有蓄电池，且机座的顶部固定安装有位于手持推把...
- 周冀琼邓波杨军张博郑伟
- 文献传递
- 基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法
- 本发明公开了一种基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法，依据靶序列富集多重PCR，采用4对特异性的套式PCR引物和探针，并在各内引物的5’端分别加上能被一对通用引物识别的标签序列。本发明克服了传统PCR方法的...
- 王印彭善珍杨泽晓姚学萍邬旭龙张鹏飞冷伊依肖璐任梅渗曾相杰罗忠永胡凌林星宇张博刘亚东蒙正群李桂黎王波
- 文献传递
- 四川部分地区禽源空肠弯曲菌MLST分型及遗传进化分析被引量：4
- 2019年
- 目的为了解四川部分地区分离到的48株禽源空肠弯曲菌间的分子特征,以对来源不同的空肠弯曲菌进行分子分型及遗传进化分析。方法本研究参照MLST数据库,选取了空肠弯曲菌MLST分型7个管家基因aspA,glnA,glyA,gltA,tkt,pgm和uncA作为目的基因分别扩增及测序,并将所得序列经比对后进行遗传进化分析。结果 48株分离株中共含24种不同的序列型分属于9种不同的克隆系及11种独特型,其中22株分离株含有新序列型,占分离株的45.83%(22/48);9种不同的克隆系中以CC-21、CC-353、CC-464克隆系所含菌株相对较多,而克隆系CC-45、CC-48最少,均为1株分离株;11种独特型共存于21株分离株中,其中以ST-8675序列型最多,为8株。遗传进化树显示,属同一克隆系的不同型别间的分离株亲缘关系较近,如同属于CC-21克隆系的ST-298与ST-760型别分离株处于同一小分支、亲缘关系较近,但不同克隆系的分离株间遗传进化关系较远,鹌鹑源分离株(V13-20)单独处于一大分支与其余禽源分离株间的亲缘关系最远。总体而言,不同地区、宿主来源的分离株呈现遗传多样性。结论本研究中分离株间具有基因多样性,MLST分型为了解该地区空肠弯曲菌的遗传特性和分布特点提供了参考依据。
- 姚学萍张博王寒邬旭龙周丽军曹随忠王印王印杨泽晓
- 关键词：空肠弯曲菌管家基因遗传进化
- 猪霍乱沙门菌C500运载猪瘟病毒新型基因疫苗在家兔体内的免疫应答被引量：3
- 2010年
- 为研究猪霍乱沙门菌C500(S.C500)运载猪瘟病毒(CSFV)新型基因疫苗口服免疫家兔的体内免疫应答特点,采用电转化法将CSFV新型基因疫苗转化到S.C500,构建重组工程菌,口服免疫接种家兔,检测CSFV、S.C500特异性抗体;并用猪瘟兔化弱毒疫苗及猪伤寒沙门菌野毒株依次进行攻毒试验。结果显示,成功构建CSFV新型基因疫苗重组菌S.C500/pCB-ME2-IL-15,S.C500/pCC-ME2-IL-15。口服免疫家兔可以诱导产生抗CSFV和S.C500的特异性ELISA抗体,且S.C500/pCC-ME2-IL-15略显优势。经三免后免疫家兔能够部分抵抗猪瘟兔化弱毒疫苗与猪伤寒沙门菌野毒株的攻击。试验提示以S.C500为CSFV新型基因疫苗运载体的猪用重组活菌苗具有可行性。
- 韩国全郭万柱张博林华陈杨陈弟诗王利娜
- 关键词：猪瘟病毒家兔口服免疫免疫应答
- 猪细小病毒VLPs供外源蛋白插入的候选位点发现及其重组PCV2-ORF2的病毒样颗粒构建
- 试验中先将PPV SC-1株VP2基因扩增产物克隆到pMD18-T载体构建质粒pMD-VP2;设计两对引物（分别引入HindⅢ和SacⅠ两个酶切位点）扩增PCV2 SC株ORF2基因,构建了pMD-ORF2.A和pMD-...
- 朱玲郭万柱蒋清蓉徐志文熊丁杰张博王印赵玲
- 关键词：猪细小病毒病毒样颗粒
- 文献传递
- 一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法
- 本发明公开了一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法，包括LAMP最佳反应体系为25μL：1μL8UBstDNA聚合酶，2.5μL10×ThermoPolbuffer缓冲液，6μL2.5mMeachdNTPs，4μL...
- 王印邬旭龙杨泽晓姚学萍张鹏飞姜睿姣肖璐张博刘亚东冷伊依胡凌林星宇曾相杰罗忠永任梅渗蒙正群
- 文献传递
- 靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用被引量：7
- 2016年
- 靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem–PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重PCR具有独特的反应过程,克服了常规多重PCR扩增条件不兼容、扩增具有偏爱性等缺点,实现了对同一反应体系多种病原的同步检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路,具有较大的发展前景。笔者对Tem–PCR的研究背景、反应原理、技术应用及试剂盒开发等进行综述,旨在为Tem–PCR的研究和发展提供参考依据,为中国应对公共卫生危机提供新思路。
- 邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博
- 关键词：高通量生物技术公共卫生
- 沙门菌nirB基因启动子区域分子克隆及序列分析
- 2011年
- 为了给构建含沙门菌内源性诱导启动子基因疫苗表达载体奠定物质基础,试验从活化培养的猪霍乱沙门菌C500中提取细菌基因组DNA,运用PCR技术扩增nirB基因启动子区域,回收、纯化,将TA克隆到pUCX-T载体上,对阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果表明:成功扩增出nirB基因启动子区域,长约760 bp;成功构建了其TA克隆重组质粒pUCX-Pn irB;序列分析结果显示Pn irB与其他沙门菌相关序列核苷酸同源性较高,为96%～100%,其中与猪霍乱沙门菌SC-B67核苷酸同源性高达100%;NNPP分析结果显示Pn irB启动子基因区域有3个较强的启动子Promotor序列,具有启动基因表达的基本元件。说明成功获得了猪霍乱沙门菌C500 nirB基因启动子区域基因。
- 王小玉韩国全郭万柱林华张博王利娜任玉鹏
- 关键词：分子克隆
- 内江猪IL-15基因的表达与免疫增强作用研究被引量：3
- 2009年
- 参照GenBank中猪IL-15基因的mRNA序列设计1对特异性引物,从经由刀豆蛋白A诱导培养的内江猪外周血淋巴细胞扩增猪IL-15基因;构建其成熟肽原核表达载体pMAL-pIL-15,在Rosetta(DE3)pLysS中表达;构建其真核表达载体pCI-pIL-15,与pCI-gD(PRV)联合免疫雌性BALB/c小鼠以研究其免疫增强作用。测序结果显示,内江猪IL-15基因与发表的猪IL-15基因的核苷酸同源性为97%～99%,含489 bp的完整开放阅读框。SDS-PAGE分析显示,表达的融合蛋白约为52.5 ku,约占菌体总蛋白的27%。Western-blot检测显示,所表达的融合蛋白为麦芽糖结合蛋白的融合蛋白。MTT法试验证实,该融合表达产物经初步纯化、透析复性后,可明显增强淋巴细胞增殖;小鼠免疫试验显示,pCI-pIL-15能够促进小鼠脾CD4+、CD8+T细胞增殖,加强PRV-gD基因疫苗特异性中和抗体的产生。
- 韩国全郭万柱王印徐志文朱玲林华张博王小玉
- 关键词：内江猪分子克隆免疫增强作用
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2主要抗原区域的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 本研究以高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)重组NSP2蛋白为包被抗原,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。通过RT-PCR技术,从PRRSV SCMS08株中,成功扩增出NSP2的主要抗原区域。将其克隆到pET-32a(+),成功构建原核表达载体,并转化宿主菌(E.coli)Rosetta 2(DE3)。以镍柱纯化表达蛋白,SDS-PAGE检测证实重组蛋白获得了高效表达,Western blot检测表明所表达蛋白能够被抗组氨酸标签单克隆抗体和PRRSV阳性血清识别。以此蛋白包被酶标板,初步建立了PRRSV NSP2-ELISA诊断方法。优化的NSP2-ELISA的最佳抗原包被浓度为1.7μg·mL-1,血清的最佳稀释度为1∶40。用该方法检测185份血清样品,与IDEXX公司ELISA试剂盒检测结果符合率为90.8%。建立的间接ELISA方法敏感性高、特异性强,可用于猪繁殖与呼吸综合征的常规诊断及流行病学调查。
- 林华郭万柱张博陈弟诗陈扬王小玉徐志文王印朱玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征NSP2间接ELISA
