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抗GPC3 C端抗体辅助杀伤肝癌细胞HepG2的活性检测及抗原表位鉴定被引量：2: 2013年; 目的：检测制备的7株抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）蛋白C端单克隆抗体是否具有辅助杀伤肝癌细胞的活性，并研究其识别的抗原表位。方法：用细胞增殖法检测制备的抗体是否具有抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）活性；用生物信息软件分析GPC3蛋白C端（359～580残基）的结构及抗原特征，并据此将其分为4个截短片段，将克隆的各基因片段分别连接到原核表达载体pGEX-4T-1中，进行蛋白表达和纯化，用间接ELISA和Western印迹分析GPC3C端单克隆抗体的表位识别情况。结果与结论：制备的7株单克隆抗体对肝癌细胞HepG2均具有不同程度的辅助杀伤作用，其中5号单克隆抗体的辅助杀伤效果最好；表达并纯化了GPC3C端4个截短片段的重组蛋白；间接ELISA和Western印迹检测结果表明，7株抗体均特异性结合GPC3蛋白的473～525残基区段。; 张红飞张慧娜李军锋于虹代晓朋赵光宇郭彦王凯娟张建营周育森; 关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 肝癌细胞HEPG2

抗肝癌活性单克隆抗体及其应用: 本发明公开了一种抗肝癌活性单克隆抗体及其应用。该单克隆抗体，是可以与GPC3抗原表位特异性结合的单克隆抗体；所述GPC3抗原表位的氨基酸序列为自GenBank accession Number为AAA98132.1的氨基...; 周育森李军锋张慧娜于虹寇志华陈万荣

X线修复交叉互补基因1399位点多态性与肝细胞癌关系的Meta分析被引量：2: 2010年; 目的探讨X线修复交叉互补基因1(XRCC1)399位点多态性与肝细胞癌发病风险之间的关系。方法检索国内外数据库,获得有关XRCC1基因多态性与肝细胞癌发病风险的病例-对照研究资料,用Review Manager 4.2.8分析软件对纳入本项Meta分析的各研究数据进行综合统计处理及异质性检验,计算合并的OR值(95%CI)。结果符合纳入标准的共有7篇文献。累计肝细胞癌病例1133例,对照1747例。Meta分析结果显示,与野生基因型Arg/Arg相比,杂合变异基因型Arg/Gln和(Arg/Gln+Gln/Gln)合并的OR值(95%CI)均为1.00(0.68,1.47),纯合变异基因型Gln/Gln合并的OR值(95%CI)为1.02(0.60,1.72)。XRCC1 399位点多态性与肝细胞癌的发病风险之间的关系均无统计学意义。结论未发现XRCC1 399位点多态性与肝细胞癌发病风险之间的统计学相关性。; 张慧娜王鹏代丽萍王凯娟运玉霞张建营; 关键词：肝细胞癌 META XRCC1 多态性

抗肝癌活性单克隆抗体及其应用: 本发明公开了一种抗肝癌活性单克隆抗体及其应用。该单克隆抗体，是可以与GPC3抗原表位特异性结合的单克隆抗体；所述GPC3抗原表位的氨基酸序列为自GenBank accession Number为AAA98132.1的氨基...; 周育森李军锋张慧娜于虹寇志华陈万荣; 文献传递

用于鉴定microRNA靶基因的新型双萤光素酶报告基因系统的构建及应用被引量：4: 2011年; 目的:构建用于鉴定microRNA靶基因的报告基因系统。方法:在pGL3-Basic载体的luc基因上游插入CMV启动子,下游插入用于克隆靶基因3'UTR的多克隆位点,构建报告基因载体pMIR-luciferase;将pMIR-lu-ciferase载体的luc基因替换成Rluc基因,构建内参载体pMIR-control;将补体因子H(CFH)的3'UTR插入pMIR-luciferase载体的多克隆位点处,构建含有CFH 3'UTR的报告基因载体;用pIRES2-EGFP载体构建microRNA146a真核表达载体;将含有CFH 3'UTR的报告基因载体、microRNA146a真核表达载体及内参载体共转染HepG2细胞,进行报告基因的活性检测。结果:构建了报告基因载体、内参载体和microRNA146a真核表达载体,经酶切和测序鉴定正确;microRNA146a真核表达载体转染细胞72 h后,经荧光显微镜观察确认载体转染及表达;用实时定量PCR检测,microRNA146a的表达水平显著上调(P<0.01);用构建的报告基因系统检测,结果表明microRNA146a显著地抑制了含CFH 3'UTR的报告基因的活性(P<0.05)。结论:构建了一种新型的报告基因载体系统,该系统可用于miRNA靶基因的鉴定。; 鲍春旸李军锋张慧娜张红飞孙世惠于虹周育森; 关键词：MICRORNA

重组表达乙肝病毒x蛋白的腺病毒构建及在HepG2细胞的表达被引量：1: 2012年; 目的:构建重组表达HBx的腺病毒,并通过感染细胞建立HBx高表达的细胞模型。方法:首先将HBx基因插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,限制性酶切鉴定正确后将其用PmeⅠ酶切线性化,转到BJ5183感受态细菌进行同源重组,重组后的腺病毒载体pAd-HBx经PacⅠ酶切线性化后,转染到QBI-293A细胞中,根据EGFP的表达判断重组腺病毒的包装情况。RT-PCR鉴定重组腺病毒的HBx基因表达。根据GFP的表达检测病毒滴度和感染效率。将病毒感染人肝癌HepG2细胞,48h后收集裂解细胞,Westernblot检测HBx蛋白的表达。结果:重组腺病毒载体pAd-HBx经酶切鉴定确认构建成功。将pAd-HBx转染到QBI-293A细胞,荧光检测提示病毒获得成功包装,RT-PCR检测到细胞中HBx基因的表达。重组病毒感染人肝癌HepG2细胞,Westernblot检测到HBx蛋白表达。结论:成功构建了携带HBx基因的重组腺病毒,感染肝癌HepG2细胞后检测到了HBx蛋白的表达,提示建立了HBx高表达的细胞模型,为后续的HBx的功能研究奠定了基础。; 张红飞李军锋户义张慧娜鲍春旸王凯娟周育森; 关键词：腺病毒载体 HBX基因肝癌细胞

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张慧娜