戴有金
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
- 供职机构：辽宁大学生命科学院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- δ-睡眠肽与GFP融合蛋白的表达和纯化
- 2012年
- 构建δ-睡眠肽(DSIP)蛋白与GFP的融合基因表达载体,高效表达和纯化GFP-DSIP融合蛋白。通过SOE-PCR拼接DSIP全长编码基因,并使得DSIP上游具有肠激酶识别位点,经双酶切定向克隆至表达载体pET-28a,构建重组载体pET-28a-DSIP,通过PCR扩增GFP全长编码基因,经双酶切定向克隆至pET-28a-DSIP,构建原核重组表达载体pET-28a-GFP-DSIP,通过双酶切和测序鉴定后,导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达融合蛋白,采用镍亲和层析和分子筛凝胶层析获得高纯度蛋白,SDS-PAGE分析鉴定。经测序鉴定成功构建了原核重组表达载体pET-28a-GFP-DSIP,在IPTG诱导下获得可溶性的绿色荧光蛋白与睡眠肽的融合蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化成功获得高纯度的融合蛋白。成功构建了DSIP与GFP融合基因的重组表达载体,确定了GFP-DSIP融合蛋白诱导表达的最佳条件,获得了较高纯度的融合蛋白,为进一步研究DSIP蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 崔小进杨帆戴有金李章富吕永通胡风庆
- 关键词：基因克隆融合蛋白原核表达
- 利用鹿胎下脚料制备复合氨基酸
- 2009年
- 目的:利用鹿胎下脚料为原料制备复合氨基酸.方法:采用微波辅助酸水解法处理鹿胎下脚料,利用Folin-酚法测定蛋白质含量,甲醛滴定法和凯氏定氮法测定氨基酸水解度,氨基酸自动分析仪测定氨基酸种类和各自含量.结果:在微波辅助处理30 min条件下,所得到复合氨基酸水解度最高,达8.27%.复合氨基酸中含有谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸等17种氨基酸.结论:利用微波辅助酸解法处理鹿胎下脚料可获得高质量复合氨基酸,生产成本低,具有一定的推广应用价值.
- 回晶边媛媛杨帆戴有金温惠理胡风庆
- 关键词：复合氨基酸
- 抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明涉及抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白及其制备方法和应用。本发明嵌合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4或如SEQ ID NO.5所示。嵌合蛋白的制备方法如下：构建嵌合基因；将嵌合基因经酶切后，插入到载体质粒pET28a(...
- 胡风庆戴有金胡静
- 抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明涉及抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白及其制备方法和应用。本发明嵌合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4或如SEQ ID NO.5所示。嵌合蛋白的制备方法如下：构建嵌合基因；将嵌合基因经酶切后，插入到载体质粒pET28a(...
- 胡风庆戴有金胡静
- 文献传递
- 新型抗肿瘤溶栓双功能嵌合蛋白的构建
- 戴有金
