王兴武
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- OsteopontinRNAi对人乳腺癌细胞MDA—MB-231生物学行为的影响
- 2012年
- 目的观察乳腺癌细胞MDA—MB-231 osteopontin（OPN）RNA靶向干扰效果。方法采用OPNmRNA干扰质粒转染MDA-MB-231细胞，建立OPN基因沉默细胞株，采用RT-PCR、蛋白质印迹法从mRNA和蛋白水平检测乳腺癌细胞OPN表达量的变化，侵袭试验检测OPN下调对细胞侵袭能力的影响，MTT法测细胞增殖能力的改变，裸鼠成瘤后观察OPNRNA干扰对肿瘤细胞生长的影响及对移植瘤乏氧程度的影响。结果与MDA—MB-231细胞相比，OPN沉默细胞在常氧和乏氧状态下OPN表达均显著下调（均P〈0．05），OPN稳定沉默细胞侵袭力和增殖能力下降（均P〈0．01），OPNRNAi能明显抑制裸鼠移植瘤的生长（P〈0．05），且移植瘤内乏氧程度降低（P〈0．05）。结论OPNRNA干扰可抑制乳腺癌细胞MDA—MB-231细胞侵袭力和增殖能力，降低移植瘤的乏氧程度。
- 杨莉魏玲赵伟宋现让王兴武郑刚郑美珠左文述
- 关键词：骨桥蛋白质RNA干扰
- 拉帕替尼耐药乳腺癌细胞株的建立及耐药机制的研究被引量：1
- 2014年
- 目的 :建立对拉帕替尼(lapatinib)耐药的乳腺癌SKBR3细胞株并筛选与拉帕替尼耐药相关的基因。方法:采用间隙大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导建立拉帕替尼耐药的乳腺癌细胞模型;应用CCK-8(cell counting kit-8)和FCM法检测亲本、耐药细胞增殖及凋亡的情况,蛋白质印迹法检测人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)通路中相关蛋白的表达情况,应用人类全基因组表达谱芯片检测亲本和耐药细胞中基因表达的差异。结果 :CCK-8和FCM法检测结果显示,耐药SKBR3细胞对拉帕替尼的敏感性明显降低,拉帕替尼对亲本和耐药细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)分别为(0.35±0.07)μmol/L和(3.89±0.09)μmol/L,经计算耐药倍数约为11.11。蛋白质印迹法检测结果显示,耐药细胞中磷酸化HER2、HER3、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated protein kinase1/2,ERK1/2)的表达水均明显低于亲本细胞。全基因组芯片检测结果显示,差异表达基因(上调或下调)共1 598个,其中上调的基因为989个,下调的基因为609个。对差异表达基因进行功能分类,涉及氨基酸代谢、糖代谢、脂类代谢、细胞凋亡和细胞间黏附等相关细胞转导通路共391条。结论:成功建立了拉帕替尼获得性耐药的乳腺癌细胞株,细胞代谢等通路中基因的表达异常可能与乳腺癌细胞对拉帕替尼的耐药有关。
- 王蕾蕾张朝蓬王兴武魏玲马传栋
- 关键词：乳腺肿瘤ERBB2抗药性肿瘤拉帕替尼
