王昱
- 作品数：97 被引量：186H指数：7
- 供职机构：重庆大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目重庆市科技计划项目广东出入境检验检疫局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学自动化与计算机技术轻工技术与工程电气工程更多>>
- 四种猪呼吸道疾病综合征病原多重PCR检测方法的建立及应用被引量：6
- 2015年
- 为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)和猪肺炎支原体(M.hyo)的多重PCR方法,分别针对PRRSV的ORF1a基因、PCV2的ORF2基因、APP的OMLA基因和M.hyo的P46基因的保守区域设计4对特异性引物,优化反应体系及条件,建立了可同时扩增PRRSV(225bp)、PCV2(337bp)、APP(107bp)、M.hyo(176bp)相应基因的四重PCR方法。结果显示,该方法能单管同时特异地鉴别检测PRRSV、PCV2、APP、M.hyo 4种病原体,对猪瘟病毒、副猪嗜血杆菌、猪呼吸道冠状病毒、猪流感病毒、猪细环病毒及猪细小病毒等无特异性扩增,说明该PCR具有良好的特异性;方法的灵敏度分别为195、272、241、321pg/μL。应用该方法对重庆市的61份样品进行检测,其中PRRSV、PCV2、APP、M.hyo的阳性率分别为22.9%(14/61)、18.0%(11/61)、8.2%(5/61)和18.0%(11/61)。该方法的建立为临床上4个病原的快速鉴别诊断提供了有力的技术手段。
- 陈玉燕杨俊聂福平王昱张姜琳秦敏肖进文王国民李应国蔡家利
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型胸膜肺炎放线杆菌猪肺炎支原体
- 肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用被引量：1
- 2015年
- 目的为建立肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）的DPO-PCR快速检测方法。方法本研究以EIECipaH基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸（DPO）引物,建立了EIEC DPO-PCR检测方法。结果退火温度范围在47℃~67℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与EIEC的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.17×102 cfu/mL。利用该检测方法对采集的230份样品进行检测,共计检出3份EIEC阳性样品,与国标法（GB 4789.6-2003）检测结果一致,显示了良好的实用性。结论该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。
- 李丹丹徐义刚邱索平王昱高会江高慎阳
- 关键词：IPAH基因
- 一种仿人采摘动作的多爪气动无损果蔬采摘机械手
- 本发明公开了一种仿人采摘动作的多爪气动无损果蔬采摘机械手，包括多爪采摘机械手机构和无损采摘气动系统；多爪采摘机械手机构包括夹持机构和采摘机构；夹持机构包括三爪气缸、移动底座、真空发生器、下拉杆、移动滑块、上拉杆、真空吸盘...
- 陈子文孙霄杨云帆皮磊王昱
- 一株产脂肪酶芽孢杆菌的鉴定及其脂肪酶基因LIP的克隆分析
- 2013年
- 依据形态学和生理生化特征,将一株产脂肪酶芽孢杆菌BL03初步鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。提取该菌核酸,PCR扩增出地衣芽孢杆菌脂肪酶基因LIP,克隆到pMD19-T载体后进行PCR鉴定及序列测定和生物信息学分析,结果表明该菌LIP基因片段完整,开放阅读框为615bp,编码204个氨基酸,与已发表地衣芽孢杆菌脂肪酶基因(GeneID:3098655)相比,核酸序列相似为99.67%,推导编码氨基酸序列相似性为99.02%,该基因的获得为其异源表达及相关研究奠定了基础。
- 刘生峰肖进文周蓓莉杨俊聂福平王昱周庆李应国
- 关键词：地衣芽孢杆菌脂肪酶基因克隆
- 副溶血弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立被引量：4
- 2016年
- 为建立检测副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的快速检测方法,本研究以VPtoxR基因为靶基因设计合成引物及TaqMan探针,建立了实时荧光定量PCR快速检测VP的方法。结果显示,对15株试验菌株进行实时荧光定量PCR检测,只有VP检测为阳性,表明该检测方法特异性强;该方法的灵敏度为4.9CFU/mL,利用该检测方法对采集的150份样品进行检测,共计检出3份VP阳性样品,与国标法(GB 4789.7—2013)检测结果一致,显示了良好的实用性。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。
- 李丹丹徐义刚王昱邱索平高会江高慎阳
- 关键词：副溶血弧菌实时荧光定量PCR
- 猪传染性胃肠炎病毒NASBA检测方法的建立被引量：5
- 2010年
- 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)NASBA的检测方法,本研究利用BioEdit和BlastN,根据GenBank中猪TGEV的S基因保守序列设计引物,建立了扩增TGEV的NASBA检测技术。利用该方法建立的反应体系在41℃反应2h即可得到有效扩增。实验结果表明:该方法对TGEV进行扩增获得约200bp特异性目的条带,而对CSFV、PRRSV、PCV-2、PPV、PEDV和ST细胞扩增结果均为阴性。NASBA的灵敏度高于普通RT-PCR,与病毒分离方法相当,可检测到5pg的核酸。该方法为TGEV的早期诊断提供了新途径。
- 李小兰聂福平李应国肖进文徐自忠胡世君王昱
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒
- 孟加拉进口黄鳝中致病性嗜水气单胞菌的分离与鉴定被引量：2
- 2013年
- [目的]了解致病性睹水气单胞菌的存在状况和风险水平.[方法]采用分离培养、生化鉴定、序列测定和动物试验等方法,对2批孟加拉进口黄鳝进行致病性睹水气单胞菌检测.[结果]从孟加拉进口黄鳝体内分离出4株高度致病性的嗜水气单胞菌.嗜水气单胞菌对孟加拉黄鳝本身致病性不明显,但是对小鼠的致病性却高达10 000～ 100 000 CFU/ml.[结论]孟加拉进口黄鳝存在致病性睹水气单胞菌的感染,且对我国的食品和卫生安全存在一定的风险.
- 王昱袁增壮聂福平肖进文杨俊李应国叶自霞李正国
- 关键词：致病性嗜水气单胞菌
- 人机物知识图谱制造产线运维决策方法及系统、存储介质
- 本发明公开一种人机物知识图谱制造产线运维决策方法及系统、存储介质，该方法利用时频信号技术进行分析得到特征指标；并在人机物知识图谱中推理相适应的算法模型，并调用推荐的模型参数；利用算法模型进行特征提取与分析，得到状态评估；...
- 王昱杨波杜卡泽康玲王时龙赵闯张洋申小玉
- 鹦鹉热衣原体real-time quantitative PCR检测方法的研究被引量：8
- 2008年
- [目的]为鹦鹉热衣原体的快速、准确检测奠定基础。[方法]根据鹦鹉热衣原体主要外膜蛋白（MOMP）基因序列设计一对特异性引物，以SYBRGreenI为荧光染料，建立了鹦鹉热衣原体Real-time quantitativePCR检测方法。根据检测结果，计算样品的批内和批间变异系数（CV）。[结果]以提取的鹦鹉热衣原体DNA为模板。用引物Cps-1和Cps-2进行PCR扩增，得到长100bp的片段。扩增产物回收纯化后。连接到pGEM-TEasy载体上并转化到大肠杆菌DH50α。菌落PcR检测筛选阳性克隆，培养后提取质粒DNA。当模板浓度范围为1.78×10^2～1.78×10^8拷贝／μl时，标准曲线相关系数达0.998；批内和批间变异系数（CV％）分别为1．30％～4．59％和5.72％～9.87％。[结论]为鹦鹉热衣原体的感染、流行调查等提供了重要的技术参考。
- 吴东海李应国杨迎伍邓伟王昱李正国
- 关键词：鹦鹉热衣原体荧光实时定量PCR外膜蛋白基因
- 猪六种重要病原寡核苷酸芯片检测方法的初步建立被引量：1
- 2016年
- 为建立同时鉴别检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）、副猪嗜血杆菌（HPS）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪肺炎支原体（Mhp）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪瘟病毒（CSFV）这6种病原的寡核苷酸芯片方法,根据这6种病原的特异保守序列,设计了6对特异性引物和探针,建立多重PCR体系,优化杂交参数,进行方法评估。结果显示,该方法检测APP、HPS、Mhp、PCV2、PRRSV及CSFV的灵敏度分别为5.8×10^2copies/L、7.8×10^3copies/L、6.8×10^3copies/L、6.3×10^2copies/L、4.8×10^3copies/L、5.5×10^2copies/L,且与猪源伪狂犬病病毒、猪细小病毒、日本乙型脑炎病毒、猪水疱病病毒、水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病病毒、小反刍兽疫病毒及沙门菌等9种病原无交叉反应。用建立的多重PCR对186份临床样本的检测结果显示,单一感染率为18.3%（34/186）,混合感染率为5.9%（11/186）,与测序验证完全一致。该方法为多种病原的流行病学调查和临床诊断提供了一种快速、高通量的检测手段。
- 保雨聂福平杨俊王昱刘亚娟王国民李贤良李应国张超刘力
- 关键词：寡核苷酸芯片HPSMHPPCV2PRRSVCSFV
