王艳艳
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属华山医院检验医学科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 建立高分辨率熔解曲线法筛选含VEB-3型基因菌株被引量：1
- 2010年
- 目的 建立高分辨率熔解曲线法筛选含VEB-3型基因菌株.方法 不重复收集2003年1-12月革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株292株,用酚-氯仿法抽提基因组DNA;首先以基因组DNA为模板,PCR扩增VEB基因;挑选阳性菌株34株再PCR扩增包含168位点的一段约110 bp的基因片段,高分辨率熔解曲线（high resolution melt,HRM）分析后测序验证.结果 VEB-3亚型与其他亚型基因通过HRM分析具有显著的差别;测序结果与HRM分型结果一致.结论 应用HRM技术可以准确快速筛选含VEB-3型基因菌株.
- 李刚魏取好倪瑛乔王艳艳杜昕蒋晓飞
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶
- 金黄色葡萄球菌对替考拉宁药敏试验分析
- 艾芙琪杜昕王艳艳阮斐怡韩立中蒋晓飞
- 泛耐药肺炎克雷伯菌株的医院内流行特性的研究被引量：14
- 2011年
- 目的 了解华山医院泛耐药肺炎克雷伯菌株及其流行的特点.方法 收集2006年8月-2009年12月对CLSI推荐常规检测药物均耐药的肺炎克雷们菌临床分离株,共57株.所有菌株都进行药物敏感试验、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）初筛及表型确证试验、改良Hodge试验、等电聚焦电泳,聚合酶链反应及其产物测序、接合试验、肠杆菌基因间重复共有序列PCR（ERIC-PCR）和多位点序列分型（MLST）.结果 所有菌株都携带blaKPC-2、blaCTX-M-14、blaSHV12和blaTEM-1及qnrB和aac（6＇）-I b-cr基因.57株细菌中ST423型5株,MIST ST11型52株.ST423型散发,而ST11型呈医院内流行.57株细菌都对替加环素耐药,对多黏菌素、米诺环素和多西环素部分敏感.结论 本次泛耐药肺炎克雷们流行主要为ST11型菌株;不同的肺炎克雷伯菌株,播散能力不同;检出泛耐药肺炎克雷伯菌时应增加检测药物的种类.
- 王艳艳刘红杜昕李刚魏取好陈晓耘蒋晓飞
- 关键词：泛耐药肺炎克雷伯菌多位点序列分型PCR
- 纸片法头孢西丁敏感的青霉素耐药葡萄球菌分析被引量：4
- 2010年
- 目的 评估不同检测方法 对纸片法头孢西丁敏感,苯唑西林耐药葡萄球菌耐药性状的检测能力,并对非mecA基因介导苯唑西林耐药的匍萄球菌进行药敏谱分析.方法 收集2007年1月至2009年5月间复旦大学附属华山医院就诊患者呼吸道、尿、分泌物和无菌体液标本中分离得到的255株金黄色葡萄球菌,采用苯唑西林纸片法、苯唑西林MIC法、头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法枪测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性：用苯唑西林MIC法和头孢西丁纸片法检测75株凝固酶阴性萄萄球菌对苯唑西林的敏感性：将所有葡萄球菌进行mecA基因检测,结合试验结果 分析葡萄球菌苯唑西林耐药原因,并对非mecA基因介导的苯唑西林耐药葡萄球菌用MIC法进行抗菌药敏谱分析.结果 255株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的金黄色葡萄球菌苯唑西林纸片法检测出6株中介,4株耐药;头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法、苯唑西林MIC法全敏感、mecA基因检测全阴性.75株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的凝固酶阴性葡萄球菌,苯唑西林MIC法59株敏感,16株耐药;mecA基因阴性为71株,阳性为4株.12株非mecA基因介导苯唑西林耐药的葡萄球菌庆大霉素敏感为10株,克林霉素8株、环丙沙星11株、红霉素6株、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑11株,头孢菌素类、替考拉宁、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦、四环素12株.结论 金黄色葡萄球菌用头孢西丁检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,具有很好的可靠性.凝固酶阴性葡萄球菌最好同时使用头孢西丁纸片法和苯唑西林MIC法检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,以提高检出率.非mecA基因介导的苯唑西林耐药,临床可依据实际药物敏感实验结果 选择性使用β内酰胺酶稳定的青霉素、β内酰胺酶抑制剂复合药、头孢类和碳青霉烯类药物治疗.
- 田月如王艳艳陈晓耘阮斐怡蒋晓飞
- 关键词：头孢西丁
- 利用EZ-Tn5转座子插入突变探索细菌基因组中影响其耐药性变化的因素被引量：1
- 2010年
- 目的研究细菌基因组中影响抗菌药物活性的因素。方法用EZ-Tn5转座复合物通过电转化,随机插入大肠埃希菌BL21细菌染色体基因组,获得BL21菌株的插入突变文库;对所有突变克隆株进行37种抗菌药物体外药敏试验;耐药性发生明显恒定改变的菌株进行反向PCR,并对产物进行测序和序列分析,确定转座子插入的确切位点;结合被灭活基因的表达功能推测耐药性改变的原因。结果确定大肠埃希菌电转化最佳条件为菌液OD值为0.8(600 nm)时进行感受态制备,10%甘油缓冲体系和2.7 V电击电压;共得到182株成功插入Tn5转座子的克隆,建立大肠埃希菌BL21菌株随机插入突变文库,其中插入突变菌株BLmu29对青霉素、头孢唑林、头孢克洛、头孢丙烯等抗菌药物的敏感性增加,其中以对青霉素的变化最为明显,抑菌圈直径从对照菌株的12 mm扩大到17 mm;对其进行反向PCR,并对PCR产物测序证实插入转座子的位点为1736,其灭活的基因为甘油-3-磷酸酰基转移酶。结论灭活大肠埃希菌基因组中甘油-3-磷酸酰基转移酶所对应基因,使对细菌对青霉素等亲水性抗菌药物的耐药表型发生改变,提示此基因可影响大肠埃希菌对于亲水性抗菌药物的耐药性。
- 陈晓耘蒋晓飞魏取好李茹王艳艳吕元
- 关键词：大肠埃希菌细菌耐药电穿孔
- 高分辨率熔解曲线法检测临床常见KPC基因亚型被引量：3
- 2011年
- KPC是一种近年新出现的碳青霉烯酶,可以水解包括碳青霉烯类抗菌药物在内的所有β内酰胺类抗菌药物,且仅轻微或不被克拉维酸抑制,给临床治疗带来极大困难[1].目前已经公开报道的亚型有KPC-2至KPC-11,但临床中流行的主要是产KPC-2或KPC-3的肺炎克雷伯菌[2],
- 李刚赵燕魏取好王艳艳杜昕蒋晓飞
- 关键词：基因亚型熔解曲线法肺炎克雷伯菌抗菌药物碳青霉烯酶
