孟祥平
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：暨南大学药学院基因组药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组人TRIM5α基因嵌合体的构建、表达纯化及其体外抑制HIV-1的研究
- 艾滋病是由人类免疫缺陷病毒感染所导致的以全身免疫系统的严重损害为特征的，以患者易于发生机会性感染以及肿瘤为特征的临床综合征。全球约95％以上的艾滋病感染是由HIV—1造成的。自1981年美国报道首例艾滋病患者以来，全球已...
- 孟祥平
- 关键词：基因克隆表达纯化免疫缺陷病毒
- 人天然免疫基因TRIM5α的序列及进化分析被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆人TRIM5α基因,对其编码序列进行分析,并进行分子进化研究。方法:以HeLa细胞cDNA为模板,用RT-PCR方法克隆人TRIM5α基因,与人基因组序列对比分析其结构;用BioEdit、Genedoc和MEGA4.1软件进行蛋白序列联配和进化分析。结果:扩增了长1482bp的人TRIM5α基因片段,序列分析表明其覆盖了完整编码框,编码由493个氨基酸残基组成的人TRIM5α蛋白;人TRIM5α蛋白与黑猩猩、大猩猩、猩猩、猕猴TRIM5α蛋白的相似度分别为98.2%、96.8%、93.7%和87.6%。结论:克隆了人TRIM5α基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 孟祥平李秀英孙晗笑莫雪梅
- 关键词：人免疫缺陷病毒进化克隆
- 人TRIM5α嵌合体蛋白与HIV-1gag蛋白体外分子间相互作用的鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:表达和纯化人TRIM5α嵌合体蛋白[TRIM5αH(R328-332)],并探讨该蛋白和HIV-1gag间的相互作用。方法:将构建的TRIM5α嵌合体pET28aTRIM5αH(R328-332),转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组表达质粒pETTRIM5αH(R328-332),30℃下经IPTG诱导,该融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。获得的重组的蛋白再经过纯化,SDS-PAGE分析重组蛋白,并用免疫共沉淀技术和ELISA等检测重组蛋白与HIV-1gag间的相互作用。结果:构建的重组质粒在大肠杆菌中获得表达,重组TRIM5αH(R328-332)蛋白经纯化复性后,通过免疫共沉淀和ELISA等技术,证明TRIM5αH(R328-332)蛋白能够与HIV-1gag间的相互作用。结论:在大肠杆菌表达系统中成功表达了重组TRIM5αH(R328-332)蛋白,并且证实其在体外与HIV-1gag有结合作用。
- 孟祥平李秀英孙晗笑莫雪梅
- 关键词：纯化免疫共沉淀ELISA
- 人TRIM 5α基因改构体的表达、纯化及其体外免疫活性研究
- 2009年
- 构建TRIM5α改构体TRIM5αH(R328-332)的原核表达载体pET28a。转化大肠杆菌BL21 codon plus(DE3),获得重组表达质粒pETTRIM5αH(R328 332),30℃下经IPTG诱导,该融合蛋白在大肠杆菌BL21 codon plus(DE3)中表达。获得的重组的蛋白再经过纯化,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白,并用免疫其沉淀和ELISA等对重组蛋白进行功能研究。结果构建的重组质粒在大肠杆菌中获得表达,经纯化后的重组pETTRIM5αH(R328 332)蛋白纯度可达90%以上,并且证实其在体外与HIV-1gag有结合作用。
- 孟祥平李秀英孙晗笑莫雪梅
- 关键词：纯化免疫共沉淀
