杨宇虹
- 作品数：21 被引量：63H指数：5
- 供职机构：天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 双启动子shRNA真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。方法:通过PCR分别扩增带有BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有BglⅡ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamHⅠ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO。再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功。结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段。
- 娜仁郭刚张瑞赵郁汪蓓蕾梁东春杨宇虹
- 关键词：聚合酶链反应质粒
- 靶向hTERT与Bcl-2基因的双启动子shRNA表达载体的构建
- 目的构建靶向人端粒酶逆转录酶(Human Telomerase Reverse Transcriptase,hTERT)与B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)基因的...
- 娜仁杨宇虹
- 文献传递
- 关于骨组织和成骨细胞中甲状腺激素受体的研究
- 为了解骨组织以及成骨细胞中TRs的整体状态,本文建立了自人类成骨样细胞系MG63和新生大鼠颅骨组织中直接分离细胞核,提取可溶性核蛋白TRs的方法,利用放射配体结合分析,通过Scatchard作图进行受体动力学参数测定。结...
- 杨宇虹
- 关键词：甲状腺激素受体骨组织
- 文献传递网络资源链接
- 脂蛋白脂肪酶基因突变的研究被引量：9
- 2004年
- 目的:筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变,并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法:对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析,电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点,引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果:在高甘油三酯血症人群中,检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子,1例外显子5Pro207→Leu突变杂合子,在全部样品中检出1例Ser447→stop突变纯合子,50例Ser447→stop杂合子。结论:天津地区人群中存在着LPL基因突变,除Ser447→stop外,内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关,可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。
- 赵郁穆云翔杨宇虹刘新宇葛林解用虹
- 关键词：高甘油三酯血症杂合子LPL剪接PCR产物
- 构型与构象被引量：6
- 2004年
- 构型和构象是表征分子结构特征的易混淆的两个概念 ,构型是指具有一定构造的分子中原子或基团的固有空间排列。广义的构象是指分子中原子或基团在三维空间的取向和定位 ,狭义的构象是指具有相同构造和构型分子中原子或基团在空间的取向和定位。构型和构象既相互区别 ,又相互联系。对分子构型和构象概念的正确认识是阐明生物大分子结构与功能复杂关系的重要前提 ,对其正确地理解和运用将有助于教师教学任务的完成和学生对相关知识的理解和掌握。
- 赵郁刘新宇杨宇虹解用虹
- 关键词：构型构象
- 甲状腺激素对成骨样MG-63细胞甲状腺激素受体不同亚型表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体（TR）的表达情况以及甲状腺激素（T3或T4）对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,为10.70±0.45;TRβ1仅及其半,为5.75±0.10;TRβ2不低,相当于TRβ1的60%,为3.34±0.08;TRα2的表达极低,仅为（3.66±0.59）×10-2.分别加入不同浓度的T3或T4,仅TRα1和TRα2对T3表现明显的降调节,且TRα1和TRα2的表达与相应T3浓度之间负相关,其他亚型无显著性变化,也无相关关系;同样浓度范围的T4作用各亚型,表达均无显著性变化.结论 在骨细胞发育分化中TRα1起关键作用.
- 杨宇虹左爱军朱志峰赵学勤郭刚张镜宇
- 关键词：甲状腺激素甲状腺激素受体基因表达
- 人破骨细胞分化因子基因启动子报告载体的构建
- 2006年
- 目的:构建能够报告人破骨细胞分化因子(ODF)基因启动子活性的表达载体。方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有ODF基因启动子的2段序列(-2433￣-1243bp和-1262￣+100bp),通过T-A克隆将这2个序列片段分别连接到pGEM"-TEasy克隆载体上。利用特定的限制性内切酶位点,将这2个序列片段酶切后进行正确拼接并定向克隆到不含启动子的pEGFP-1报告基因载体上。将该重组质粒pEGFP-1-ODF瞬时转染成骨细胞系UMR106,检测其能否在ODF基因启动子(-2358￣+100bp)的调控下表达报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。结果:pEGFP-1-ODF经酶切鉴定和序列分析证实与设计完全一致。细胞瞬时转染结果表明,pEGFP-1-ODF转染的UMR106能表达EGFP。结论:人ODF基因启动子报告载体的成功构建,为进一步研究ODF基因表达转录水平的调控机制奠定了基础。
- 杨宇虹郑纺刘瑞王宝利
- 关键词：破骨细胞分化因子
- 改进TRIZOL法提取基因组DNA被引量：15
- 2006年
- 目的建立一种在提取总RNA的同时又能制备基因组DNA的方法。方法利用TR IZOL法收集水相沉淀总RNA后余下的中间层和有机相,合并去除蛋白质,再提取基因组DNA。通过紫外分光光度法和电泳法予以鉴定,并以之为模板进行PCR扩增鉴定。结果提取的基因组DNA纯度和浓度俱佳,用于PCR扩增效果良好。结论改进的TR IZOL法可以更加充分地利用实验材料,且可靠易行。
- 杨宇虹梁东春郭刚张镜宇
- 关键词：TRIZOL聚合酶链反应
- 脂蛋白脂肪酶内含子3C→T突变被引量：5
- 2003年
- 为筛查中国人群脂蛋白脂肪酶基因的突变情况 ,并探讨这些突变对脂蛋白代谢可能产生的影响 ,研究者利用聚合酶链反应—单链构象多态性分析技术 ,对 14 0例人群 (高甘油三酯血症组 5 1例 ,正常对照组 89例 )的脂蛋白脂肪酶基因进行了突变筛查 ,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果在外显子 4扩增片段 (包括内含子—外显子交界区 )有 2例可疑突变被检出 ,经测序证实均为内含子 3受位剪接位点上游 6bp的C→T转换突变杂合子。由于该突变仅见于重度高甘油三酯血症患者 ,结合国内外相关文献 ,研究者认为我国人群存在脂蛋白脂肪酶基因内含子 3受位剪接位点的C→T突变 ,该突变可能是我国人群高甘油三酯血症的遗传易患因子。
- 杨宇虹葛林赵郁解用虹
- 关键词：脂蛋白脂肪酶聚合酶链反应-单链构象多态性分析高甘油三酯血症
- 一种新的脂蛋白脂肪酶基因突变(C^(562)→T)被引量：1
- 2006年
- 目的:筛查国人(天津地区)脂蛋白脂肪酶基因突变情况,并探讨其对血脂水平的影响。方法:利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术,对386例患者(血脂正常组278例,血脂异常组108例)的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果:在386例样本中,检出1例外显子3C562→T(Leu103→Leu)同义突变杂合子。结论:新LPL突变(C562→T)的发现,对进一步阐述LPL结构与功能的关系有重要的参考价值。
- 赵莉莉汪军梅穆云翔杨宇虹赵郁刘新宇解用虹
- 关键词：脂蛋白脂酶基因突变聚合酶链反应
