- 血清蛋白质组样品处理方法的比较分析被引量：2
- 2007年
- 刘希成梁恒田真张霖陈阳
- 关键词：双向电泳蛋白质组学血清
- 人血清蛋白质组学方法的比较和优化被引量：3
- 2007年
- 目的:对人未做处理的血清以及去除白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)血清的蛋白质组学方法进行比较和优化。方法:应用双向电泳(2-DE)方法分离了未做处理的以及去除白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)的血清,比较优化了高温变性、水化液成份组成及泡胀方式等影响血清2-DE分离效果的因素,并用质谱分析鉴定未做处理和已处理血清的2-DE谱图中部分差异蛋白点。结果:得到了分辨率和重复性较好的2-DE谱图,未做处理的血清、去除白蛋白及IgG血清的平均蛋白质点分别为(482±18)个和(523±29)个,质谱分析了9个差异蛋白点,鉴定为8种蛋白质,其中7种为功能蛋白质。仅出现在未做处理血清中的蛋白有4种,分别是维生素A结合蛋白、可溶性尿激酶血纤维蛋白溶酶原激活剂受体、蛋白激酶1抗原、血清白蛋白。4种蛋白仅出现在去除白蛋白和IgG的血清中,分别是NADH脱氢酶辅酶β亚基、肌动蛋白结合蛋白M1、T细胞活性受体β链、血小板生长因子C。结论:去除高丰度蛋白可增加一些低丰度蛋白质的检出,但非特异性吸附会导致部分功能蛋白质的丢失。
- 刘希成田真梁恒张霖陈阳
- 关键词：双向电泳蛋白质组学血清
- 肾阳虚证候的人血清比较蛋白质组学分析被引量：37
- 2007年
- 利用双向电泳(2-DE)优化分离了除去高丰度蛋白(白蛋白和IgG)的老年体虚肾阳虚患者(以健康组为参照)的血清样本,对比分析pH4～7范围的2-DE谱图,肾阳虚患者和参照组的平均蛋白点分别为(393±32)和(455±19)个.其中肾阳虚证候表达量上调2倍(P<0.05)以上的蛋白点有26个,下调2倍以上的有33个.用质谱获得上述差异蛋白的肽质量指纹图谱,并经数据库检索共鉴定出了49种差异蛋白质,其中有10种在肾阳虚血清中特异表达,有6种在健康组血清中特异表达.蛋白功能分析发现,其中33种蛋白质的差异表达与肾阳虚证密切相关.蛋白质TCRβ及transthyretin的蛋白印迹实验验证了2-DE的结果.该研究结果为阐明中医肾阳虚证的机理提供了一条新途径.
- 刘希成梁恒田真刘颖陈阳张霖
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质组学血清肾阳虚证
