程宁宁
- 作品数：13 被引量：44H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 破伤风毒素C片段单克隆抗体的研制被引量：2
- 2009年
- 目的:研制抗破伤风毒素C片段(TetC)的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。Westernblot鉴定mAb的特异性,并用mAb亚类试剂盒鉴定mAb亚类。结果:共获得5株稳定分泌抗TetC的杂交瘤细胞株,分别命名为1E5、5G10、6B9、7D6、7F5,其腹水效价除1E5为3×210外,其余均为1×105,亚类鉴定结果均为IgG1。West-ernblot分析结果显示,5株mAb均与融合蛋白His-TetC发生特异性反应。结论:成功制备了抗TetC的mAb,为进一步研究TetC的生物学功能、破伤风毒素结构与功能的关系以及建立快速检测破伤风抗毒素水平的方法奠定了基础。
- 单艳菊潘志明程宁宁张成全孙林焦新安
- 关键词：单克隆抗体
- H9亚型禽流感病毒黏膜DNA疫苗与灭活油乳苗的联合免疫研究被引量：2
- 2008年
- 目的构建减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感病毒黏膜DNA疫苗,并探讨黏膜DNA疫苗与灭活油乳苗联合应用的免疫效力。方法以RT-PCR法扩增H9N2亚型禽流感病毒分离株(A/Chicken/China/N/2005)的血凝素(HA)基因,然后克隆入pmcDNA3.1+载体中,获得重组质粒pmcDNA3.1-HA。通过电穿孔法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建沙门氏菌介导的黏膜DNA疫苗SL7207(pmcDNA3.1-HA)。重组菌与灭活油乳苗联合免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,并设立重组菌SL7207(pmcDNA3.1-HA)单独免疫组、油苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组。用HI或ELISA测定血清和小肠黏膜抗体效价,以H9N2亚型禽流感病毒攻击,计算免疫保护力。结果联合免疫组和重组菌SL7207(pmcD-NA3.1-HA)单独免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与其他试验组之间存在显著性差异(P<0.05)。联合免疫组和重组菌SL7207(pmcDNA3.1-HA)单独免疫组的免疫保护力均与空载体组、空白对照组有显著差异(P<0.05),且联合免疫组的免疫保护率最高,达100%。结论成功构建H9亚型禽流感病毒黏膜DNA疫苗,DNA疫苗与灭活油乳苗联合应用具有良好的免疫协同作用。
- 程宁宁潘志明刘蓓蓓孙林耿士忠贾自文黄金林焦新安
- 关键词：H9亚型禽流感减毒沙门氏菌灭活油乳苗联合免疫
- 稳定携带新城疫病毒DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性
- 采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F中扩增出新城疫病毒JS5株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1+中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-F。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌...
- 潘志明程宁宁游猛崔一晨黄金林焦新安刘秀梵
- 关键词：新城疫DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌质粒稳定性免疫效力
- 文献传递
- 小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导被引量：1
- 2007年
- 分离树突状细胞（DC）的原理是依据DC的低密度和半黏附特性，DC缺乏Fc受体，可对获得的DC进一步纯化。这种方法获取的DC数量有限。细胞因子诱生法是目前体外扩增DC常用的方法。其中，扩增效果最好的细胞因子是粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）和白细胞介素4（IL-4）。
- 胡茂志戴华焦新安张辉潘志明高明燕程宁宁刘秀梵
- 关键词：树突状细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子体外诱导髓源性鼠骨白细胞介素
- 运送禽流感病毒DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌的实验室免疫效力研究
- 本文将带H5N1型禽流感病毒HA基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pcDNA3.1-HA)、SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG...
- 唐丽华潘志明程宁宁张晓明黄金林胡青海焦新安
- 关键词：减毒沙门氏菌禽流感病毒DNA疫苗禽流感
- 文献传递
- 运送禽流感病毒DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌的实验室免疫效力研究
- 将带H5N1型禽流感病毒HA基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA)、 SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pcDNA3．1-HA)、SL7207(pcDNA3．1-HA-CpG)...
- 唐丽华潘志明程宁宁张晓明黄金林胡青海焦新安
- 关键词：减毒沙门氏菌禽流感病毒DNA疫苗
- 文献传递
- 携带禽流感病毒DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门菌的免疫效力被引量：2
- 2007年
- 将从重组质粒pVAX1-HA中扩增的HA基因和从pVAX1-HA-CpG中切出的HA-CpG基因分别克隆入pcDNA3.1(+)载体中,获得重组质粒pcDNA3.1-HA和pcDNA3.1-HA-CpG。将上述重组质粒分别转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验检测发现HA基因可在COS-7细胞中表达。将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门菌SL7207,构建成携带DNA疫苗的重组沙门菌SL7207(pcDNA3.1-HA)和SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG)。将重组菌分别以5×109CFU口服免疫1日龄鸡2次,重组菌免疫组产生的小肠黏膜抗体效价与空载体组及油乳剂灭活疫苗组间存在显著差异。攻毒免疫保护结果表明,SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG)免疫组与空载体组之间存在显著差异,而SL7207(pcDNA3.1-HA)免疫组则与空载体组间无显著差异,说明CpG可增强DNA疫苗的免疫效果。
- 潘志明唐丽华程宁宁黄金林胡青海焦新安刘秀梵
- 关键词：禽流感病毒减毒鼠伤寒沙门菌DNA疫苗CPG免疫效力
- 减毒沙门氏菌介导H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用研究被引量：3
- 2007年
- 构建获得含有H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组真核表达质粒pCAGGS-HA。重组质粒电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,获得重组沙门氏菌SL7207(pCAGGS-HA)。重组菌SL7207(pCAGGS-HA)以5×109cfu的剂量2次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡后,再以油乳剂灭活疫苗加强免疫1次,并设立重组菌单独免疫组、灭活苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组。联合免疫组和重组菌单独免疫组的小肠黏膜抗体效价与其他组之间存在显著差异(P<0.05),且两组的攻毒免疫保护水平与空载体组之间差异显著(P<0.05),其中联合免疫组的免疫保护率最高,达100%,而灭活苗免疫组保护率为80%,表明减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用具有良好的免疫协同作用。
- 潘志明程宁宁刘蓓蓓孙林耿士忠陈祥黄金林焦新安
- 关键词：H9亚型禽流感减毒沙门氏菌DNA疫苗灭活油乳苗联合免疫
- 玉米赤霉菌对养猪生产的危害及其对策被引量：7
- 2004年
- 高和坤柳丽刘莹卞建春黄玉政程宁宁
- 关键词：饲料中毒症状
- 稳定携带H5亚型禽流感病毒候选DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性被引量：12
- 2007年
- 采用PCR技术从重组质粒pVAX1-HA扩增出禽流感病毒JSGO(H5N1)株的血凝素(HA)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1+中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-HA。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207*,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207*(pmcDNA3.1-HA)。经体内体外试验证实,重组质粒pmcDNA3.1-HA在沙门氏菌中的稳定性显著高于pcDNA3.1-HA。将重组菌SL7207*(pmcDNA3.1-HA)和SL7207*(pcDNA3.1-HA)分别以2×109CFU剂量两次口服免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可产生针对禽流感病毒HA蛋白的黏膜抗体。重组菌以5×109CFU剂量两次口服免疫试验鸡,免疫鸡的小肠样品中可测到针对禽流感病毒HA蛋白的黏膜抗体,且SL7207*(pmcDNA3.1-HA)免疫组的抗体效价高于SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组。免疫保护试验结果显示,SL7207*(pmcDNA3.1-HA)和SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组的免疫保护率均与空载体组之间存在显著性差异(P<0.05),且SL7207*(pmcDNA3.1-HA)免疫组的保护率较SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组提高了22.6%,说明稳定携带H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌具有良好的免疫原性和免疫保护性。
- 唐丽华潘志明程宁宁焦新安张晓明黄金林
- 关键词：禽流感DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌质粒稳定性免疫效力
