胥兵
- 作品数:8 被引量:86H指数:5
- 供职机构:四川农业大学生命科学与理学院更多>>
- 发文基金:四川省教育厅自然科学科研项目四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学环境科学与工程更多>>
- 枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶的纯化及酶学性质被引量:16
- 2006年
- 枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶经硫酸铵、SephadexG-75、SephadexG-100分离纯化后,得到一个电泳纯的葡聚糖内切酶。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量约为35kD。最适反应温度和pH分别为65℃和pH6.8,Zn2+、Pb2+、Fe3+对酶有抑制作用,Ba2+、Fe2+对酶有激活作用,在50℃,pH6.8条件下,酶对CMC-Na的米氏常数Km为0.34g/L,最大反应速度Vmax为0.17mg/(min.mL)。
- 胥兵陈惠韩学易官兴颖吴琦
- 关键词:枯草芽孢杆菌纤维素酶纯化
- 内切葡聚糖酶基因工程菌pET-C36表达条件的研究被引量:1
- 2007年
- 为了提高内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达量,通过实验研究了重组菌Pet-C36的表达条件,结果表明重组菌的培养条件为:最适培养温度43℃,最适培养时间5 h,IPTG诱导终浓度0.1 mmol/L或乳糖诱导终浓度0.1%。基因工程菌在此条件下诱导培养后酶活力比未优化表达条件时提高了2倍,可达141.22 U/mL。
- 官兴颖陈惠吴琦胥兵
- 关键词:内切葡聚糖酶重组菌株
- 枯草芽孢杆菌C-36内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达
- 纤维素酶是一组复合酶的统称,主要包括内切葡聚糖酶,外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶,这三种酶协同作用将纤维素转化成葡萄糖。近年来随着纤维素酶在棉织品水洗整理工艺及洗涤剂工业中的成功应用,细菌纤维素酶制剂已显示出良好的使用性能...
- 胥兵
- 关键词:巨大芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因表达酶学性质
- 文献传递
- 产纤维素酶枯草芽孢杆菌C-36的产酶条件研究被引量:45
- 2006年
- 以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5.0,产酶最适温度为37℃。在此条件下,培养36 h后达到产酶高峰,CMC酶活为196.33 U/mL,是优化前的3倍。
- 韩学易陈惠吴琦梁如玉高凤菊胥兵
- 关键词:纤维素酶枯草芽孢杆菌产酶条件
- 内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及其酶学性质研究被引量:18
- 2008年
- 通过PCR方法将已克隆的内切葡聚糖酶基因(GenBank No.DQ782954)信号肽编码序列去除,然后与表达载体pHIS1525连接后转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-G7并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌WH320原生质体,获得基因工程菌WH320-pHIS1525-G7。刚果红染色和SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。基因工程菌经优化培养后,胞外上清液中的酶活力可达889U,是出发菌株(即枯草芽孢杆菌C-36)的11.22倍。酶学性质研究表明:该酶的最适反应温度与pH值分别为65℃与pH6.0,在pH4.5~10.0范围内50℃保温30min可保持在最高酶活的80%以上。
- 陈惠胥兵廖俊华官兴颖吴琦
- 关键词:巨大芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因表达酶学性质
- 纤维素酶基因工程菌pHBM-End培养条件的研究
- 2008年
- 对基因工程菌pHBM-End培养条件优化的研究结果表明:250mL三角瓶中装入50mLLB培养基(含有10μg/mLTet),按5%的接种量接种种龄为12h的液体种子,培养4h后加入终浓度为0.2%的木糖进行诱导,9h后上清液中酶活可达889U/mL,是出发菌株C-36(79.2U/mL)的11.22倍。
- 韩学易陈惠胥兵阮景军
- 关键词:巨大芽孢杆菌内切葡聚糖酶
- 枯草芽孢杆菌C-36内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达被引量:11
- 2009年
- 以自行分离筛选出的天然枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)C-36的染色体DNA为模板,PCR扩增得到含有内切葡聚糖酶基因的DNA片段,将其克隆到pMD-18T载体中,序列分析表明,克隆得到的DNA片段全长1602bp,编码一个含有499个氨基酸的多肽。与其他芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因序列比对,其核苷酸同源率为90%~93%,其编码的氨基酸序列的同源性在90%~98%,已将此基因注册GenBank(DQ782954)。将含内切葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用Kpn I和EcoR I双酶切后,与相同酶切的表达载体pET-32a相连接,并导入大肠杆菌BL21中表达。蛋白质电泳实验结果表明在6.47×10^4处有表达蛋白带。经测定表达蛋白比酶活力达99.02U/mL,为出发菌C-36(63.78U/mL)的1.55倍。
- 官兴颖吴振芳吴琦胥兵陈惠
- 关键词:枯草芽孢杆菌克隆内切葡聚糖酶基因
- 产角蛋白酶芽孢杆菌的分离筛选与鉴定被引量:6
- 2008年
- 从长期堆积腐烂羽毛的土壤中分离出一株能降解羽毛角蛋白的细菌,经形态学观察和生理生化试验,初步鉴定为短小芽孢杆菌,且命名为短小芽孢杆菌B-15。
- 韩学易陈惠胥兵赖欣
- 关键词:角蛋白酶芽孢杆菌