陈利
- 作品数：2 被引量：18H指数：2
- 供职机构：四川农业大学动物科技学院动物遗传育种研究所更多>>
- 发文基金：国家级星火计划四川省科技支撑计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 高糖诱导山羊骨骼肌卫星细胞成脂分化过程中相关基因表达的变化被引量：4
- 2014年
- 本研究采用高糖培养基诱导山羊骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)成脂分化,检测诱导分化过程中脂肪酸合成及成脂分化相关基因表达量,为进一步揭示SMSCs的成脂分化机理提供依据。采用含25mmol·L-1葡萄糖的F12培养基诱导山羊SMSCs成脂分化,油红O染色观察脂肪滴形成,qPCR检测诱导前(0d)和分别在高糖、低糖培养基中培养2、4、6、8、10d时脂肪酸合成及成脂分化相关基因ACC、FAS、C/EBPα、PPARγ、SREBP-1、AdipoQ mRNA的相对表达量。结果表明:油红O染色观察到山羊SMSCs高糖培养6d即形成较多脂肪滴,而低糖培养至10d也无明显脂肪滴形成。ACC、C/EBPα表达量在高糖培养2d后显著升高并维持较高值(P<0.05);SREBP-1、FAS表达量在高糖培养6d后显著升高(P<0.05);PPARγ表达量在高糖培养10d后显著升高(P<0.05);AdipoQ表达量在高糖培养2、8、10d时显著升高(P<0.05)。本试验发现高浓度葡萄糖能直接或间接上调脂肪酸合成及成脂肪分化相关基因的表达,促进山羊SMSCs向类脂肪细胞转化。
- 薛科王林杰陈利王薏琳仲涛李利张红平
- 关键词：山羊骨骼肌卫星细胞成脂分化
- 山羊不同组织及不同发育时期骨骼肌内参基因的表达稳定性分析被引量：14
- 2014年
- 为筛选出山羊不同组织、不同时期骨骼肌及骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)中稳定表达的内参基因,以出生后3日龄的山羊不同组织(心、肝、脾、肺、肾、大脑、大肠、小肠、背最长肌、臂三头肌和半膜肌)和不同时期(3、30、60、90和120 d)的3种骨骼肌(背最长肌、臂三头肌和半膜肌)以及培养至不同阶段(1、3、4和7 d)的山羊SMSCs为研究对象,运用qRT-PCR技术及geNorm分析软件,探索9个内参基因(ACTIN、GAP—DH、TOP2β、YWHAZ、SDHA、PGK1、RP2、RPL4和HPRT1)mRNA的表达稳定性。结果表明,在同一时期的11个组织中,内参基因表达稳定度的排序:HPRT1>RP2>TOP2β>SDHA>GAPDH>ACTIN>YWHAZ>PGK1>RPL4,需要2个内参基因(HPRT1和RP2)共同校正目的基因的表达;在不同发育时期的骨骼肌中,各内参的稳定度:YWHAZ>ACTIN>HPRT1>RPL4>TOP2β>SDHA>PGK1>GAPDH>RP2,需引入3个内参(YWHAZ、ACTIN和HPRT1)才能准确地校正定量结果;在SMSCs中各内参表达的稳定度排序:PGK1>SDHA>ACTIN>RPL4>GAPDH>TOP2β>YWHAZ>RP2>HPRT1,需要3个合适的内参(PGK1、SDHA和ACTIN)作为标准化指标校正定量数据。本试验分别筛选出了能在山羊同一时期不同组织、不同发育时期的骨骼肌及SMSCs中稳定表达的内参基因及需要引入的内参数目,有利于更加准确地校正基因mRNA水平的表达量,为更好地研究基因功能奠定了基础。
- 陈利赵薇占思远李丹李利仲涛王林杰张红平
- 关键词：山羊荧光定量PCR内参基因
