梁思婷
- 作品数：11 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 巨型艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究被引量：2
- 2014年
- 为了确定巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)早熟株合适的免疫剂量,本文设立7个早熟株免疫攻虫组、7个母株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组,7个早熟株/母株免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个/羽,经嗉囊感染,7日龄首次免疫,14日龄以同等剂量进行第二次免疫,21日龄以8×104个/羽的同源母株进行攻虫,28日龄结束试验,以增重、肠道病变记分和卵囊减少率为试验指标。对早熟株中免疫保护效果较好的2个免疫剂量进行重复试验,免疫方法、试验周期、试验指标和攻虫剂量同第一批试验。结果显示:早熟株和母株200、400、600、800、1000、2000个/羽免疫组攻虫后的增重与健康对照组差异不显著(P>0.05),100个/羽免疫组明显低于健康对照组(P<0.05);各免疫组的卵囊减少率均达90%以上,肠道病变记分均与不免疫攻虫组差异不显著(P>0.05)。用早熟株200、400个/羽进行免疫重复试验,两个免疫组攻虫期间的增重和肠道病变记分均与健康对照组差异不显著(P>0.05),而与不免疫攻虫组差异显著(P<0.05),其卵囊减少率均在86%以上。研究结果表明,该巨型艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性,每只鸡免疫200或400个孢子化卵囊均可诱发鸡产生良好的免疫保护力,可考虑以200个孢子化卵囊作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。
- 赵其平朱顺海韩红玉李莎翟颀梁思婷杨斯涵黄兵董辉
- 关键词：球虫巨型艾美耳球虫早熟株免疫
- 上海市市售蟾蜍寄生蠕虫感染情况初步调查被引量：2
- 2014年
- 为了解上海市市售蟾蜍寄生蠕虫的感染情况,对60只中华大蟾蜍进行剖检,按脏器检查、收集寄生虫虫体,统计寄生虫的感染率与感染强度。结果显示,蟾蜍寄生虫感染率为100%,平均感染强度为28.23条。不同种类寄生虫的感染情况明显不同,线虫、吸虫、绦虫和棘头虫的感染率分别为93.33%、73.33%、8.33%和15.00%,感染强度分别为17.52、14.48、10.40和2.67条。不同脏器寄生虫的感染情况不同,肠道和肺脏的寄生虫感染率最高,分别为100%和88.33%;肠道、肺脏、肌肉寄生虫的感染强度分别为15.63、12.28和11.33条,明显高于其他器官。不同种类寄生虫的寄生虫部位明显不同,线虫主要来源于肺部和肠道,吸虫和棘头虫主要来源于肠道,绦虫主要来源于肌肉。通过对检出虫体的形态进行初步观察,吸虫、线虫、绦虫和棘头虫种类分别约有3、4、1和1种,但具体种类尚需进一步鉴定。本调查结果为掌握上海市市售蟾蜍寄生虫感染状况和做好寄生虫病防控提供了基础数据。
- 赵其平董辉韩红玉吴有陵朱顺海李榴佳吴迪梁思婷李莎翟颀杨斯函裴恩乐黄兵
- 关键词：蟾蜍中华大蟾蜍寄生虫
- 柔嫩艾美耳球虫保守蛋白Et CHP39基因及其应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因，该基因为Et CHP39基因，包含SEQ ID NO.1所示的开放阅读框核苷酸序列。本发明的柔嫩艾美耳球虫基因，是柔嫩艾美耳球虫的新基因，与子孢子入侵宿主细胞相关，对开发抑制子孢子入侵...
- 韩红玉黄兵翟颀董辉赵其平朱顺海梁思婷李莎杨斯涵
- 文献传递
- 喜鹊和山斑鸠体内棘口科吸虫的种类鉴定被引量：2
- 2015年
- 为鉴定喜鹊和山斑鸠体内棘口吸虫种类,本文采用形态学结合分子生物学方法对其进行了种类鉴定。分子生物学结果显示,来源于喜鹊和山斑鸠虫体的线粒体NADH脱氢酶1(ND1)基因同源性为99%,在构建的系统发育树中,两种鸟的虫体ND1序列归类在同一分支,与其亲缘关系最近的是强壮棘口吸虫(Echinostoma robustum)和弗氏棘口吸虫(E.friedi)。形态学观测结果显示,来自同一种鸟的虫体具有相似的形态结构,而两种鸟之间的虫体形态存在一定差异;通过比较所获得虫体与强壮棘口吸虫、弗氏棘口吸虫之间的形态特征,发现这两种鸟体内检出的棘口吸虫均与弗氏棘口吸虫的的形态特征更为相符。结合分子生物学和形态学鉴定的结果,确定感染喜鹊和山斑鸠的棘口科吸虫均为弗氏棘口吸虫,这是弗氏棘口吸虫在国内的首次报道,喜鹊和山斑鸠应为弗氏棘口吸虫的新宿主。
- 梁思婷董辉朱顺海韩红玉赵其平吴迪翟颀李莎杨斯涵裴恩乐黄兵
- 关键词：喜鹊山斑鸠
- 柔嫩艾美耳球虫保守蛋白CHP559基因克隆与真核表达
- 为构建柔嫩艾美耳球虫保守蛋白EtCHP559基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-flag-EtCHP559,并转染DF-1细胞进行表达.利用5'RACE技术克隆获得了柔嫩艾美耳球虫EtCHP559基因全长cD...
- 翟颀黄兵董辉赵其平朱顺海梁思婷李莎杨斯涵韩红玉
- 柔嫩艾美耳球虫入侵相关蛋白Et CHP559基因及其应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因，该基因为Et CHP559基因，包含SEQ ID NO.1所示的开放阅读框核苷酸序列。本发明的柔嫩艾美耳球虫基因，是柔嫩艾美耳球虫子孢子阶段高表达的新基因，与子孢子入侵宿主细胞相关，对...
- 韩红玉黄兵翟颀董辉赵其平朱顺海梁思婷李莎杨斯涵
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫保守蛋白CHP559基因克隆与真核表达被引量：4
- 2015年
- 为构建柔嫩艾美耳球虫保守蛋白Et CHP559基因的真核表达重组质粒pc DNA3.1-flag-Et CHP559,并转染DF-1细胞进行表达。利用5'RACE技术克隆获得了柔嫩艾美耳球虫Et CHP559基因全长c DNA序列,该基因全长为1 746 bp,ORF为104-1 327 bp,编码407个氨基酸,编码蛋白的分子量约为46 k D,并利用生物信息学分析该基因编码蛋白的性质、结构等特征,发现该蛋白含有跨膜结构和信号肽。通过RT-PCR扩增得到含完整开放阅读框的基因片段,并将其与真核表达载体pc DNA3.1-flag连接,构建了真核重组表达质粒pc DNA3.1-flag-Et CHP559,所构建的真核重组表达质粒pc DNA3.1-flag-Et CHP559经过PCR和双酶切鉴定,可见一条大小约为1 224 bp的目的条带;重组质粒转染DF-1细胞后,免疫印迹检测可见大小约为47 k D的目的蛋白条带,间接免疫荧光实验显示在DF-1细胞中检测到绿色荧光。这些研究结果表明已成功获得了Et CHP559的全长序列,并成功构建了Et CHP559的真核重组表达质粒,在真核细胞DF-1中获得表达,为深入研究Et CHP559的功能奠定了基础。
- 翟颀黄兵董辉赵其平朱顺海梁思婷李莎杨斯涵韩红玉
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫真核表达
- 柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其在蛋白定位中的应用
- 为了制备柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶(Eimeria tenella lactate dehydrogenase,EtLDH)单克隆抗体,用大肠杆菌表达的重组EtLDH可溶性蛋白免疫BALB/c小鼠,经5次免疫后取脾脏制备免...
- 李莎董辉梁思婷赵其平韩红玉朱顺海翟颀杨斯涵黄兵
- 柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其在蛋白定位中的应用被引量：2
- 2015年
- 为了制备柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶(Eimeria tenella lactate dehydrogenase,Et LDH)单克隆抗体,用大肠杆菌表达的重组Et LDH可溶性蛋白免疫BALB/c小鼠,经5次免疫后取脾脏制备免疫脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,经3次亚克隆后获得2株能稳定分泌Et LDH单克隆抗体的杂交瘤细胞株2F7和2H4,抗体亚类鉴定均为Ig G1,腹水效价分别为1:8000和1:64 000。Western blot结果显示2F7抗体能识别柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中大小约为35 k Da的天然蛋白。利用该单抗对Et LDH在柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中的分布进行了定位,结果显示该蛋白主要分布于裂殖子的细胞质,表明成功地制备了Et LDH单克隆抗体,为深入研究Et LDH的功能和特性奠定了基础。
- 李莎梁思婷赵其平韩红玉朱顺海翟颀杨斯涵黄兵董辉
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶单克隆抗体免疫荧光定位
- 柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2真核表达质粒的构建及在细胞中的表达被引量：4
- 2015年
- 为构建柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2(Eimeria tenella silent information regulator 2,Et SIR2)的真核表达质粒,以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子c DNA为模板,PCR扩增出Et SIR2基因,PCR产物经酶切回收纯化目的片段后与经相应酶切的真核表达载体p CAGGs连接。连接产物经PCR和酶切鉴定,再经测序鉴定正确后,分别转染DF-1细胞和BHK细胞进行表达,用Western blot和间接免疫荧光鉴定Et SIR2基因的表达情况。结果表明:成功扩增了Et SIR2基因,长度为909 bp;Western blot可见大小约为37 k Da的表达蛋白条带;间接免疫荧光可以检测到特异性绿色荧光,表明成功构建了Et SIR2的真核表达质粒p CAGGsEt SIR2,并能在哺乳动物细胞和禽类细胞中表达。该研究结果为深入研究Et SIR2的生物学特性和球虫DNA疫苗的研制打下了基础。
- 杨斯涵赵其平韩红玉朱顺海李莎翟颀梁思婷杨亮宇黄兵董辉
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫BHK细胞真核表达
