李飞飞
- 作品数：14 被引量：50H指数：4
- 供职机构：浙江农林大学农业与食品科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 抗草甘膦基因aroA转化陆地棉胚性愈伤组织的研究被引量：9
- 2014年
- 为了建立以草甘膦为选择标记的农杆菌介导的棉花胚性愈伤组织转化体系,本研究将草甘膦抗性基因（aroA）转化陆地棉WC和YZ-1的胚性愈伤组织,分别以5 mg· L^-1和10 mg·L^-1的草甘膦浓度作为选择压,经过2～3轮筛选,获得了抗性胚性愈伤组织,诱导出胚状体并发育成苗.对T0再生植株进行PCR及草甘膦抗性检测,以WC和YZ-1为受体的转抗草甘膦基因（aroA）分别获得了33株和10株阳性植株,转化效率分别为82.5％和62.5％.该体系为棉花遗传转化提供了实验方法,获得的抗草甘膦棉花为棉花育种提供种质资源;同时抗除草剂基因还可以作为筛选标记与其它基因串联在一起转化棉花,进行基因功能验证.
- 章郑专汤磊鹏王钰何军光蔡文珑戎均康李飞飞
- 关键词：草甘膦胚性愈伤组织陆地棉
- 陆地棉微管蛋白基因Ghtub12转棉花研究
- 2018年
- 棉花(Gossypium spp.)是重要的纤维作物,棉花微管蛋白基因在棉纤维发育过程中特异优势表达,影响棉纤维品质。微管蛋白基因Ghtub12为Tubulin基因家族中的一员,在棉纤维发育中机理尚不明确。以陆地棉(Gossypium hirsutum Linn.)R15下胚轴为受体,以0.5 mg/L Basta为筛选标记,用农杆菌介导法将Ghtub12遗传转化棉花。100个胚轴段经过抗性愈伤组织诱导,得到143块愈伤组织,出愈率为71.50%;再经过3次抗性筛选获得126块愈伤组织,对愈伤组织进行PCR检测,102块检测出bar基因,即抗性愈伤组织转化率为81.00%;其中有45块愈伤组织诱导产生胚性愈伤组织,分化率为44.12%。胚性愈伤组织进行成苗培养得60株苗,对其进行PCR检测,56株扩增出条带,阳性率为93.3%。获得了转微管蛋白基因Ghtub12棉花,为进一步研究Ghtub12基因在棉花中的可能机理和作用提供了试验材料。
- 沈浙南沈秋平彭求吕尊富李飞飞
- 关键词：农杆菌介导法下胚轴
- 陆地棉新陆早45号体细胞胚胎发生及再生体系的建立被引量：4
- 2018年
- 【目的】拓展胚胎发生再生的陆地棉基因型,为棉花遗传转化提供优良受体材料。【方法】以新疆推广的陆地棉品种新陆早45号下胚轴为外植体,设计了6种不同激素组合的培养基进行初生愈伤组织诱导,建立其胚胎发生的再生体系。【结果】新陆早45号下胚轴在激素组合C1 [0.1 mg·L^(-1) 2,4-D(二氯苯氧乙酸)+0.1 mg·L^(-1) KT(呋喃氨基嘌呤)]和C5 [0.1 mg·L^(-1) 2,4-D+0.5 mg·L^(-1) IBA(吲哚-3-丁酸)+0.1 mg·L^(-1) KT]均可诱导出淡黄色疏松状的初生愈伤组织。将增殖后的愈伤组织培养在去掉激素、 KNO_3加倍的MS3培养基上可诱导出胚性愈伤组织,实现胚胎发生和植株再生,初生愈伤组织诱导率和分化率最高分别可达到92.2%和40.3%。研究发现C1和C5激素组合的新陆早45号下胚轴出愈率没有显著差异,但C1诱导愈伤组织的胚胎发生率明显优于C5。【结论】成功建立了陆地棉新陆早45号的胚胎发生再生体系,可为下一步通过农杆菌介导转化新陆早45号提供技术支持。
- 葛书娅沈秋平何积明吕尊富郑海彪李飞飞
- 关键词：陆地棉下胚轴胚性愈伤组织
- 农杆菌介导bar基因转化水稻胚性愈伤组织的研究被引量：5
- 2017年
- 为建立以草丁膦为选择标记的农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的水稻Oryza sativa胚性愈伤组织转化体系,通过农杆菌介导法将bar基因导入了‘日本晴’Oryza sativa‘Nipponbare’‘秀水134’‘Xiushui 134’和‘中花11’‘Zhonghua 11’等3个水稻品种的胚性愈伤组织。在分别以选择压15.0,10.0和10.0 mg·L^(-1)的草丁膦质量浓度进行了3次选择后,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)发现‘日本晴’‘秀水134’和‘中花11’的愈伤组织转化效率分别是77.9%,67.5%和92.2%,获得的抗性愈伤组织可以进一步分化成苗。它们的分化率依次是76.1%,44.4%和86.7%;成苗率分别为65.6%,66.7%和30.7%。在以草丁膦作为筛选标记时,首选‘日本晴’作为转化受体进行遗传转化。该体系为以抗除草剂基因作为筛选标记的水稻遗传转化和基因功能验证提供了技术基础,获得的抗草丁膦转化植株为水稻育种提供了材料。
- 何少海姚盛存丰宇凯汪轲李飞飞
- 关键词：草丁膦BAR基因胚性愈伤组织粳稻
- 草甘膦为筛选标记的水稻高效遗传转化体系的建立被引量：2
- 2021年
- 【目的】建立以日本晴愈伤组织为受体、草甘膦抗性基因CP4为选择标记基因的高效水稻遗传转化体系。【方法】以粳稻日本晴的成熟胚为试验材料,通过农杆菌介导法,将含有草甘膦抗性基因CP4的P1300载体转化日本晴的愈伤组织,分别用质量浓度为10、20和40 mg/L的草甘膦进行3轮抗性筛选,诱导分化和再生成苗;利用1000 mg/L草甘膦对移栽成活的阳性苗进行抗性鉴定。【结果】获得145株转基因幼苗,PCR检测阳性株为128株,阳性率达88.27%;经过3轮抗性筛选后,转基因幼苗的阳性率提高;移栽成活的99株阳性苗中,65株表现为抗性,抗性率为65.66%。【结论】成功建立了以草甘膦为筛选标记的水稻转基因体系,该体系为水稻育种提供了材料,并对以抗草甘膦基因作为筛选标记的水稻转基因和一些基因功能验证提供了技术支持。
- 袁冰丁筠曹含章吕尊富李飞飞
- 关键词：农杆菌介导法高效遗传转化体系
- 冰叶日中花耐盐机制的研究进展被引量：7
- 2018年
- 冰叶日中花(Mesembryanthemum crystallinum L.)是一种耐盐性极强的盐生植物。该研究从冰叶日中花的渗透调节、水通道蛋白调控以及活性氧清除等方面综述了其耐盐机制,旨在为冰叶日中花的种植推广、盐碱地的改良提供理论依据。
- 丰宇凯李飞飞王华森
- 关键词：耐盐机制盐生植物
- CRISPR/Cas9技术敲除水稻BR降解相关基因的研究
- 2017年
- 油菜素内酯(BR)是一种常见的植物类激素,在植物的生长发育过程中起重要的调控作用,对水稻株型改良和抗逆性有重要作用。研究首先构建了水稻4个BR降解相关基因的CRISPR/Cas9载体;然后利用农杆菌介导法,将构建好的4个BR降解相关基因的CRISPR/Cas9载体分别转化水稻中花11的愈伤组织,用50 mg/L的潮霉素作为筛选标记,共获得395株转基因植株。其中,有270株属于野生型,61株属于杂合子类型,64株属于突变类型;64株突变体中有39株是杂合突变体,25株是纯合突变体,纯合突变的概率为6.25%。4个基因均获得了突变材料,但不同基因的突变效率不同,其中转LW26的植株突变率高达41%。
- 叶照楠何璐张琳琳李飞飞刘文真
- 关键词：水稻遗传转化
- 以实际应用为导向的农学专业理论与实践教学探讨被引量：2
- 2017年
- 如今我国的农业高等教育还没有做到理论与实践相结合教学,为了改进我国高等农业院校对农业技术人才的教育模式,为提高作为一名高等农业院校教师的教学能力,前往梅西大学,对其教学模式和农业专业课程内容等方面进行了观摩和学习。梅西大学的农学专业是其传统的优势学科。该文从我在梅西大学的个人收获与体会以及对自身教学的反思等方面讲述,旨在通过梅西大学农业高等教育与我国农业高等教育的比较,取其可借鉴之处,对今后的教学工作提出几点改进措施。
- 吕尊富王睿李飞飞王洋赵光武
- 关键词：农业高等教育教育模式实践教学
- 增强学生对“作物栽培学实验”学习兴趣的探讨被引量：2
- 2016年
- 该文根据在作物栽培学及其实验的教学过程中的心得体会,从实验教学内容和模式、教学手段、教学方法及考核办法等几个方面展开论述,总结了如何增强学生对该实验课程的学习兴趣,以便更好地改善教学质量。
- 李飞飞何少海丰宇凯
- 关键词：作物栽培学实验教学建设教学方法多样化
- 3种陆地棉下胚轴对草甘膦抗性筛选的鉴定
- 2017年
- 为了建立以草甘膦为选择标记且具有高效筛选效率的棉花遗传转化体系,研究选取WC,R15和新陆早45号这3个具有成功再生体系陆地棉的下胚轴为试验材料,分别以选择压2.5,5,10,20,50,100 mg/L的草甘膦质量浓度梯度进行草甘膦敏感性试验。结果表明,WC,R15和新陆早45号的最适抗草甘膦质量浓度分别是5,20,10 mg/L。说明不同陆地棉品种下胚轴具有不同的草甘膦抗性,选择合适浓度的草甘膦是获取阳性转化体的关键之一,研究为提高以草甘膦为选择标记的棉花转基因试验的筛选效率提供了技术支持。
- 何积明吕尊富江九华李飞飞
- 关键词：陆地棉下胚轴草甘膦抗性筛选
