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磷酯酶C对人血小板细胞质游离钙离子浓度的影响被引量：8: 2004年; 目的　测定磷酯酶C(phospholipaseC ,简称PLC ,下同 )对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法　将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura 2 /AM进行负载 ,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理荧光负载后的血小板 ,采用双波长荧光分光光度法分别测定经过不同处理后的血小板在静息状态和以ADP为诱导剂时的激活状态下的胞质游离钙离子浓度 [Ca2 + ]i。结果　以健康成人血为样品时 ,经生理盐水、ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1处理后的血小板 ,在静息状态下测得的胞质游离 [Ca2 + ]i 浓度 (nmol·L-1)分别为15 2 5 5± 15 0 7,131 6 3± 15 5 8,14 0 2 7± 12 0 3,139 4 8± 1 73,12 1 11± 9 5 8,116 6 2± 15 96和 10 7 2 0± 17 0 7,而以ADP为诱导剂激活血小板后测得的胞质游离 [Ca2 + ]i(nmol·L-1)分别为 90 2 6 2± 94 74 ,6 87 99± 6 2 86 ,810 99± 72 37,70 1 73± 2 1 37,4 2 9 6 7± 71 5 9,342 82± 4 4 86和 2 6 3 2 7± 2 5 4 6。以生理盐水作为对照 ,ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1剂量组对激活状态下血小板胞质 [Ca2 + ]i 的抑制率I(% )分别为 2 5; 杨芳王常高干信陈明锴王近芬陈涛; 关键词：人血小板荧光测定

四株高产磷脂酶C新菌株的鉴定和分类被引量：13: 2004年; 在前面研究高产磷脂酶C(PLC)菌株筛选及其抗血小板功能的基础上 ,对新筛选的四株高产PLC的75 4 1、779、970和 110 7菌株进行了鉴定和分类。通过形态特征、培养特征、生理生化特征以及 16SrRNA序列测定及其同源性分析 ,证实 75 4 1菌株与Bacilluscereus基本一致 ,因此将 75 4 1菌株分类属于蜡状芽孢杆菌 ,命名为蜡状芽孢杆菌深圳株 75 4 1,B cereusshenzhen 75 4 1strain。而 779、970和 110 7三株菌则与Bacillusmycoides基本一致 ,因而将这三株菌分类属于蕈状芽孢杆菌 ,分别命名为蕈状芽孢杆菌深圳株 779,B mycoidesshenzhen 779strain ,蕈状芽孢杆菌深圳株 970 ,B mycoidesshenzhen 970strain ,和蕈状芽孢杆菌深圳株 110 7,B mycoidesshenzhen 110 7strain。这将为进一步利用这些菌株及其PLC打下坚实的基础。; 王常高高林宋冬林陈明锴张勇孙春来杨芳陈涛; 关键词：磷脂酶C 菌株蜡状芽孢杆菌

PLC对血小板游离钙离子浓度作用实验条件研究: 2004年; 对荧光法测定磷酯酶C对血小板细胞质游离钙离子浓度作用的实验条件进行了研究.结果表明,在本实验条件下,Fura 2／AM合适的浓度为4μmol／L;最适pH为7.4;血小板的浓度在1×108～3×108个／L;保护剂ASA及激活剂ADP的浓度分别为0.937mmol／L和20mmol／L;波长选用350nm和380nm;背景值对实验结果没有影响.; 杨芳王常高干信; 关键词：PLC 游离钙离子浓度荧光法 FURA-2/AM 指示剂

PLC对ADP诱导的兔血小板cAMP的影响被引量：2: 2005年; 目的　测定磷酯酶C(phospholipaseC,简称PLC,下同)对ADP诱导的兔血小板cAMP的影响,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法　取家兔的PRP,除去红细胞,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理,以ADP诱导激活,采用三氯醋酸法制备血小板cAMP,再用放射免疫分析法分别测定cAMP含量。结果　家兔血小板经生理盐水处理后的cAMP含量为 ( 20 16±0 91 ) pmol/109platelets,而经生理盐水、ASA668μmol·L-1、5、10、15、20和25UPLC·ml-1各组处理,并以ADP激活的血小板,测得的cAMP含量分别为 13 85±1 14, 16 27±0 36, 18 74±0 55,19 80±0 52, 20 49±0 43, 22 55±0 61和 24 24±0 85(pmol/109 platelets)。以生理盐水作为对照,ASA668μmol·L-1、5、10、15、20和 25UPLC·ml-1剂量组对激活状态下血小板cAMP的含量有增加的作用,增加率 (% )分别为17 47, 35 31, 42 96, 47 94, 62 82, 75 02。结论　PLC使得ADP激活后的兔血小板cAMP水平提高(P<0 01),且呈剂量依赖性,表明PLC具有提高血小板中cAMP水平的作用。这可能是PLC抗血小板聚集作用的重要原因之一。; 王常高杨芳陈明锴干信何东平陈涛; 关键词：PLC 血小板 CAMP 抗血小板聚集

磷酯酶C对血小板细胞质游离钙离子浓度作用的实验条件研究: [Ca2+]是血小板代谢与功能的一个重要因子。它参与血小板激活的许多重要环节，包括形状变化、聚集和释放。了解细胞活性状态下细胞质内游离钙离子的浓度有助于对细胞整体功能和代谢的认识。多数抗血小板药均通过直接或间接作用影响血...; 杨芳王常高干信; 关键词：血小板游离钙离子微生物发酵法药效学; 文献传递

酵母发酵液中叶酸的分离纯化被引量：2: 2003年; 本实验从三种酵母发酵液中分离纯化叶酸。发酵液经过透析、微滤、柱层析提取出叶酸,再用高效液相色谱法检测。叶酸在Vc存在的条件下损失相对较少,测得其中产朊发酵液中叶酸含量最高,为1.43μg/mL。; 杨芳姜发堂干信; 关键词：叶酸纯化高效液相色谱法

磷脂酶C对ADP诱导的兔、人血小板肌动蛋白聚合的抑制作用被引量：2: 2004年; 目的　测定磷脂酶C(PLC)对ADP诱导的兔、人血小板肌动蛋白聚合的的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法　取家兔和健康成人的PRP分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理 ,以ADP诱导激活 ,采用Triton抽提液提取和SDS PAGE分离出肌动蛋白 ,再以分光光度法分别测定其肌动蛋白相对含量。结果　家兔血小板经生理盐水处理后的肌动蛋白相对含量为 1 6 82±0 319。而经生理盐水、ASA 6 6 8μmol·L-1、PLC 5、10、15、2 0和 2 5U·ml-1各组处理 ,并以ADP激活的血小板 ,测得的肌动蛋白相对含量分别为 2 4 5 0± 0 5 6 2 ,1 0 89± 0 32 2 ,1 72 7± 0 4 4 2 ,1 4 5 0± 0 32 4 ,1 16 1± 0 30 6 ,0 85 7± 0 2 4 2和0 6 92± 0 187。以生理盐水组作为对照 ,各处理组血小板肌动蛋白聚合的抑制率I(% )分别为 5 5 5 5 ,2 9 5 1,4 0 82 ,5 2 6 1,6 5 0 2 ,71 76。人血小板经生理盐水处理后的肌动蛋白相对含量为 1 35 8± 0 376。而经生理盐水、ASA 6 6 8μmol·L-1、PLC 5、10、15、2 0和 2 5U·ml-1各组处理并以ADP激活后的血小板 ,测得的肌动蛋白相对含量分别为2 4 4 5± 0 75 0 ,1 0 96± 0 344 ,1 70 5± 0 5 0 7,1 4 37±0 4 16 ,1 16 5± 0 35 5 ,0 84 5± 0 2 5 7?; 王常高杨芳干信陈明锴陈涛; 关键词：PLC 抗血小板聚集

磷酯酶C对血小板细胞质游离钙离子浓度作用的实验条件研究: [Ca2+]i是血小板代谢与功能的一个重要因子,它参与血小板激活的许多重要环节,包括形状变化、聚集和释放。了解细胞活性状态下细胞质内游离钙离子的浓度有助于对细胞整体功能和代谢的认识。多数抗血小板药均通过直接或间接作用影响...; 杨芳王常高干信; 文献传递

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杨芳