张俊强
- 作品数：16 被引量：68H指数：6
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
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- β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A暴露的子鼠雄性生殖细胞中的表达
- 2015年
- 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路主要蛋白(β-catenin、DKK-1)在出生前后双酚A(BPA)暴露的成年子鼠雄性生殖细胞中的表达及意义。方法自受孕第0天(PGD0),ICR孕鼠饮水BPA染毒,随机将孕鼠分为溶剂对照组、BPA低剂量(10 nmol/L)组、BPA中剂量(50 nmol/L)组、BPA高剂量(300 nmol/L)组,每组6只。雄性仔鼠出生后继续饮水染毒,剂量同上,6周(PGD42)处死,取睾丸组织,计算睾丸系数;免疫组化和Western blot法检测β-catenin、DKK-1蛋白的表达。结果 BPA暴露组较溶剂对照组仔鼠睾丸脏器系数降低,β-catenin、DKK-1蛋白表达明显增加;免疫组化显示,β-catenin、DKK-1蛋白多位于睾丸间质细胞和精原细胞中。结论β-catenin、DKK-1可能参与了出生前后BPA暴露对子鼠雄性生殖细胞发育的影响。
- 杨小四刘晓利宋先兵张俊强赵欢陈晓宇
- 关键词：双酚AΒ-CATENIN蛋白睾丸生殖细胞
- 白藜芦醇抑制低浓度H2O2处理佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖的机制研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨抗氧化剂白藜芦醇(Res)对低浓度H_2O_2处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的抑制作用。方法弗氏完全佐剂足趾皮下注射SD雄性大鼠,建立AA模型,14 d后股动脉放血处死AA大鼠,取血清检测氧化应激指标,组织块培养法培养大鼠滑膜细胞,CCK-8法观察不同浓度的H_2O_2对FLS的增殖影响,Western blot法检测氧化应激相关蛋白去乙酰化酶3(SIRT3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白的表达。结果 AA模型大鼠血清氧化应激指标升高,体外实验表明,随着Res的浓度增加,低浓度H_2O_2处理的AA大鼠FLS增殖受抑制,SIRT3、MnSOD蛋白表达降低。结论 Res可减轻AA大鼠体内的氧化应激状态,机制与降低抗氧化应激蛋白SIRT3、MnSOD的表达有关。
- 李娜李娜张俊强曹威胡永涛陈晓宇
- 关键词：佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞白藜芦醇锰超氧化物歧化酶
- Hedgehog信号通路阻断剂环巴胺体外对佐剂性关节炎大鼠的关节软骨细胞增殖的影响被引量：7
- 2016年
- 目的探讨Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂环巴胺体外对佐剂性关节炎大鼠(AA)模型的关节软骨细胞增殖的影响和部分机制。方法弗氏完全佐剂诱导AA大鼠,测量关节炎指数和继发性足肿胀度,HE染色观察两组软骨组织生长情况;取AA大鼠踝关节软骨组织,采用胰蛋白酶-胶原酶法分离、培养、鉴定,环巴胺(0、0.05、0.5、5、20μmol/L)体外给药,MTT法检测AA大鼠踝关节软骨细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染检测AA大鼠踝关节软骨细胞凋亡,Western blotting检测AA大鼠踝关节软骨细胞Shh、Ptch1、Gli1的蛋白表达。结果弗氏完全佐剂诱导后,与正常大鼠相比,AA大鼠关节炎指数和继发性足肿胀度明显升高,HE染色显示,AA大鼠踝关节软骨组织有破坏;甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原鉴定体外成功培养AA大鼠踝关节软骨细胞;体外给药环巴胺(0.05、0.5、5、20μmol/L)可升高AA模型关节软骨细胞增殖,流式细胞检测结果显示,环巴胺能降低AA模型软骨细胞凋亡率;与未用环巴胺组相比,环巴胺(0.5、5、20μmol/L)给药对AA软骨细胞中Hh信号通路相关蛋白(Shh、Ptch1、Gli1)表达显著下降。结论弗氏完全佐剂诱导建立AA大鼠模型成立,体外给药环巴胺可抑制AA大鼠软骨细胞的增殖,抑制软骨细胞的凋亡,该作用与抑制AA大鼠软骨细胞Hh信号有关。
- 宋先兵张俊强曹威杨小四刘梅梅陈晓宇
- 关键词：佐剂性关节炎关节软骨细胞环巴胺HEDGEHOG信号通路增殖
- 白藜芦醇诱导胃腺癌SGC7901细胞凋亡及下调血管生成拟态相关蛋白水平被引量：1
- 2016年
- 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)诱导人胃腺癌SGGC7901细胞株凋亡及对血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响。方法 MTT法检测不同浓度Res对胃腺癌SGC7901细胞株活力的影响,Annexin V/PI双染法流式细胞术检测Res对胃腺癌细胞凋亡的影响,蛋白免疫印迹法检测不同浓度Res对VM相关蛋白VE-cadherin、MMP-2水平的影响。结果Res对胃腺癌SGC7901细胞株活力呈明显的浓度依赖性抑制作用,流式细胞仪检测显示Res处理组细胞凋亡率较对照组显著升高。免疫印迹法检测发现VE-cadherin、MMP-2水平随着RES处理浓度的增加逐渐下降。结论 Res可能通过抑制增殖、下调VM相关蛋白抑制VM,从而诱导胃癌细胞调亡。
- 汪晓庆曹威宋先兵张俊强陈晓宇潘献柱吴义春
- 关键词：白藜芦醇SGC7901细胞细胞凋亡血管生成拟态
- 白藜芦醇对过氧化氢诱导滑膜细胞凋亡的作用及机制被引量：5
- 2016年
- 摘要目的：研究白藜芦醇（RES）对过氧化氢（H2O2）处理的大鼠佐剂性关节炎（AA）成纤维样滑膜细胞（FLS）凋亡的影响，并探讨Fox基因在其中的作用。方法：采用足趾皮下注射弗氏完全佐剂诱导SD大鼠AA模型，26d成模后，取致炎侧踝关节滑膜组织，应用组织块培养法培养FLS，取第3代FLS用于实验，首先采用CCK-8法观察不同浓度的H2O2对FLS增殖的影响，Annexinv-FITC—PI流式细胞术检测不同浓度的白藜芦醇对H202（20μmol／L）处理的FLS细胞凋亡率；RT-PCR检测各组FLS中FoxO1、Fox04基因水平的表达，免疫印迹检测FLS中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果：H202（≤20μmol／L）在一定浓度范围内，促进FLS生长；当H202（〉20μmol／L）增加时，Hz02诱导的FLS凋亡数明显增高；随着白藜芦醇浓度的升高，FLS的细胞凋亡率明显升高，白藜芦醇明显降低FoxO1、FoxO4基因水平的表达，增加了细胞内Bcl-2蛋白表达，抑制细胞内Bax表达。结论：白藜芦醇可通过下调FoxO1、FoxO4基因表达，上调抗凋亡Bcl-2蛋白表达，抑制Bax蛋白的表达，诱导滑膜细胞的凋亡。
- 俞晨张俊强储海峰李简苏会萍曹威宋先兵陈晓宇
- 关键词：白藜芦醇过氧化氢滑膜细胞凋亡
- 白藜芦醇通过下调MnSOD诱导类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡被引量：15
- 2019年
- 目的探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达改变在白藜芦醇(Res)介导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)的增殖和凋亡中的作用。方法 Res处理RA-FLSs后,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测MnSOD蛋白表达水平;慢病毒感染RA-FLSs后,8 mg·L^(-1)的嘌呤霉素筛选感染后细胞,以此建立3种稳定细胞系:MnSOD过表达、MnSOD干扰、MnSOD对照;激光共聚焦显微镜检测每种细胞系在5μmol·L^(-1)过氧化氢(H_2O_2)和200μmol·L^(-1) Res处理后线粒体活性氧(mtROS)水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果 Res抑制RA-FLSs增殖,降低细胞内MnSOD表达;荧光倒置显微镜与Western blot检测证实慢病毒可高效感染RA-FLSs,使MnSOD表达上调和抑制。与对照组相比,在同种因素处理下,MnSOD过表达组mtROS水平降低,凋亡细胞减少。而MnSOD干扰组则呈现相反的结果。结论 Res可通过抑制MnSOD表达来上调mtROS水平,从而促进RA-FLSs凋亡。
- 汪陶荣张晔曹威张俊强殷曈昕朱皓晨苏逸明陈思娴瞿子庭王高远张丽霞陈晓宇
- 关键词：慢病毒白藜芦醇MNSOD类风湿性关节炎
- 环巴胺对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞增殖和凋亡的影响
- 2018年
- 目的观察Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂环巴胺对体外培养的佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法 SD大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型(模型组),对照组足趾皮内注射等量生理盐水;观察继发侧足肿胀,28 d后,HE染色评价踝关节形态学变化;胰酶-胶原酶消化培养AA大鼠软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原染色鉴定软骨细胞,CCK-8法检测环巴胺处理对AA大鼠软骨细胞增殖的影响,Hoechst 33258检测环巴胺对AA大鼠软骨细胞凋亡影响,Western blot法检测AA大鼠软骨细胞中Hh信号通路相关蛋白(Shh、Ptch1、Gli1)的表达情况。结果第12天,AA大鼠继发侧关节肿胀明显,HE染色表明AA大鼠踝关节破坏明显;Ⅱ型胶原和甲苯胺蓝染色证实成功培养AA大鼠软骨细胞;不同剂量的环巴胺可促进AA大鼠软骨细胞增殖,抑制其凋亡,降低Shh、Ptch1、Gli1蛋白表达。结论环巴胺可促进AA大鼠软骨细胞的增殖,抑制其凋亡,其机制与抑制AA大鼠软骨细胞Hh信号通路有关。
- 黄焱平曹威汪陶荣张俊强殷瞳昕宋先兵陈晓宇
- 关键词：HEDGEHOG信号通路环巴胺佐剂性关节炎软骨细胞
- 白藜芦醇通过抑制自噬相关蛋白LC3 Ⅰ/Ⅱ和beclin-1表达促进H_2O_2处理的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡被引量：13
- 2018年
- 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对H_2O_2处理的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)影响及自噬相关蛋白的表达。方法取RA患者血清检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)活性,CCK-8法观察不同浓度H_2O_2对RA-FLS增殖的影响,TUNEL染色观察不同浓度Res对H_2O_2处理的RA-FLS凋亡的影响,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3 I/II(LC3 I/II)和beclin-1蛋白表达水平。结果 RA患者MDA含量升高,总SOD活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性降低;5μmol/L H_2O_2能促进RA-FLS增殖,Res能剂量依赖性的促进5μmol/L H_2O_2处理的RA-FLS凋亡,降低LC3 I/II和beclin-1水平。结论 RA患者机体处于氧化应激状态,低浓度H_2O_2能促进RAFLS增殖,Res可抑制RA-FLS增殖和促进凋亡,其机制可能与降低自噬蛋白LC3 I/II、beclin-1表达有关。
- 俞晨俞晨张俊强曹威王高远殷瞳昕陈晓宇
- 关键词：类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡白藜芦醇
- 野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除被引量：4
- 2017年
- 目的探讨野菊花总黄酮(total fl avonoids of Chrysanthemu m,TFC)清除β淀粉样蛋白的作用和分子机制。方法采用CCK-8法观察不同浓度TFC对SH-SY5Y神经细胞株增殖的影响,ELISA法检测TFC对转染过表达淀粉样前体蛋白(APP)和淀粉蛋白前β位分解酶1(BACE1)的CHO细胞培养上清液中Aβ水平的影响,MDC染色检测TFC处理后的神经元内自噬小体的形成,Western blot检测自噬蛋白LC3表达水平。结果 CCK-8法分析显示,TFC对SH-SY5Y神经元活力无明显影响;ELISA检测显示,TFC处理使过表达APP和BACE1的CHO细胞培养上清液中Aβ水平呈浓度依赖性降低;荧光倒置显微镜下观察和Western blot检测发现,TFC处理后SH-SY5Y细胞自噬增加,LC3/LC3自噬标志物蛋白表达增强。结论 TFC可能通过增强细胞自噬而促进Aβ的清除,减少Aβ细胞毒性。
- 杨小四赵欢曹威张俊强陈晓宇
- 关键词：Β淀粉样蛋白LC3自噬野菊花总黄酮
- 内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153在结肠癌组织中的表达及意义被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨结肠癌组织内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153的表达,并分析其与临床病理特征的关系。方法:选择82例结肠癌患者的结肠癌组织与相应的癌旁正常结肠组织(距癌组织>5 cm)制作蜡块后构建组织芯片,分别用免疫组化法及Western blot法检测CHOP/GADD153蛋白的表达,并分析其表达与患者临床病理特征分关系。结果:免疫组化与Western blot结果均显示,结肠癌组织CHOP/GADD153蛋白的表达水平明显癌旁正常结肠组织(P<0.05);与临床病理特征的关系分析显示,结肠癌组织中CHOP/GADD153蛋白的表达水平随结肠癌组织分化程度的降低而增强(P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、肿瘤的浸润深度和淋巴结转移等因素无关(均P>0.05)。结论:结肠癌组织中CHOP/GADD153蛋白的表达增高,并与结肠癌织的分化程度密切相关,提示内质网应激可能参与了肿瘤分化的调控。
- 朱兴国朱兴国张俊强何慧菊王成宏陈晓宇
- 关键词：结肠肿瘤组织阵列分析
