张亮
- 作品数：8 被引量：23H指数：4
- 供职机构：新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区果树学重点学科基金国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 扁桃AcCBF1转录因子的克隆及表达分析被引量：5
- 2015年
- 【目的】分离和克隆新疆栽培扁桃CBF1转录因子基因,了解其在扁桃响应环境胁迫和逆境相关激素诱导的表达情况。【方法】以新疆扁桃幼苗为试验材料,对其进行低温、干旱、盐及ABA处理,使用PCR技术从新疆扁桃‘双果’克隆得到CBF1转录因子基因,通过农杆菌将35S-Ac CBF1-GFP融合质粒转化洋葱表皮细胞后在激光共聚焦显微镜下观察结果,并通过实时荧光定量PCR技术分析了SG-Ac CBF1转录因子基因在不同非生物逆境胁迫下的表达情况。【结果】序列分析表明,该基因编码框为729 bp,编码242个氨基酸,蛋白质分子量为27.405 ku,命名为SG-Ac CBF1,GenBank登录号为KM245571。氨基酸序列同源比对分析证实,SG-Ac CBF1属于CBF转录因子家族基因。系统发育树分析表明,SG-Ac CBF1与甜樱桃Pa DREB1的亲缘关系最近。亚细胞定位分析显示,SG-Ac CBF1蛋白定位于细胞核中。实时荧光定量PCR分析结果表明,低温、干旱、盐及ABA均能诱导SG-Ac CBF1基因表达。【结论】SG-Ac CBF1转录因子具有核定位功能,并参与了植物对逆境胁迫的调控。由于该转录因子属于家族基因,因此其对环境胁迫响应的强弱还有待探讨。
- 张亮李疆帕提曼.阿布都热合曼罗淑萍田嘉王敏
- 关键词：扁桃AC亚细胞定位
- 扁桃AcCBF1转录因子的克隆及抗逆功能分析
- 温度信号可以调节植物的休眠状态及冷驯化，是其冬季生存的决定因素。CBF转录因子家族介导的低温信号就是很好的研究机制之一。降温后，CBFs转录诱导迅速发生，随后其靶基因（CBF调节子）的表达量增加，CBFs在冷驯化过程中发...
- 张亮
- 关键词：扁桃CBF转录因子基因克隆
- 甜瓜果斑病抗性鉴定及抗性相关形态和生理研究
- 本研究以25份不同来源的甜瓜材料为试验对象，在室内采用人工喷雾接种法对2～3片真叶时期的幼苗进行果斑病抗性鉴定。在室内采用喷雾接种法分别对幼果期和膨大期的果实进行2次果斑病抗性鉴定。同时根据抗性鉴定结果分别筛选出抗、感材...
- 张亮
- 关键词：甜瓜果斑病抗病性生理指标
- 文献传递
- 新疆野扁桃CBF基因启动子克隆及瞬时表达分析被引量：6
- 2015年
- CBF基因主要功能是调控下游大量抗冷基因的表达。CBF基因是植物抗冷途径的枢纽,对增强植物的抗冷能力极为重要。本研究利用染色体步移法得到了新疆野扁桃(Amygdalus ledebouriana Schleche)CBF基因家族成员Als CBF翻译起始位点上游的启动子序列,长度为1 391 bp(Gen Bank登录号:KP662710)。对启动子序列进行生物信息学分析表明,该序列存在启动子的基本元件CAAT-box和TATA-box,并且含有多个与植物非生物胁迫有关的响应元件:ABA响应元件、MYB、MYC结合位点、光应答元件和LTRE低温应答元件等。在烟草叶片中进行瞬时表达的结果表明,该启动子序列具备在逆境胁迫下诱导驱动报告GUS基因表达的功能。本研究可为揭示CBF基因在野扁桃抗寒性、抗旱性等抗逆过程中的作用机理,以及为增强野扁桃CBF基因在扁桃的抗逆性遗传改良中的作用奠定一定的基础,同时对野扁桃的繁育和保护也有极为重要的意义。
- 余曦瑶李疆姚正培任艳萍罗淑萍张亮王敏
- 关键词：野扁桃CBF基因启动子染色体步移
- 扁桃AcCBF2基因的克隆及其在逆境胁迫下的表达分析被引量：2
- 2017年
- 本研究根据扁桃生物信息学数据库,采用PCR的方法从扁桃(Amygdalus communis L.)中克隆了一个CBF转录因子基因,命名AcCBF2,基因开放阅读框(open reading frame,ORF)为717 bp,编码238个氨基酸,预测其分子量26.59 kD,等电点为5.29。氨基酸多重序列比对显示,AcCBF2基因编码的氨基酸与其它植物冷胁迫相关的CBF氨基酸序列具有高度同源性,含有一个AP2功能结构域和2个特征基序;系统发育树分析显示,AcCBF2基因属于DREB家族中的A-1亚族,荧光定量显示,AcCBF2基因只对低温和干旱胁迫有响应,对盐胁迫和ABA(脱落酸)没有明显响应。在低温胁迫下,表达量上调;而在干旱胁迫下,表达量先上调后下调。初步预测AcCBF2基因可能对扁桃非生物胁迫有重要的调控作用。
- 郭淑朋张亮李疆李鹏罗淑萍陈婷婷
- 关键词：扁桃低温胁迫荧光定量PCR
- 扁桃CBF1基因的克隆与生物信息学分析被引量：4
- 2014年
- 为揭示CBF基因在扁桃抗逆机制中发挥的功能,对扁桃CBF1基因进行克隆与分析。以新疆扁桃主栽品种‘鹰嘴’为材料,根据已经报道的CBF1基因序列设计引物,通过PCR技术从扁桃基因组DNA中获得CBF1基因,命名为YZ-Ac CBF1,并已登录Gen Bank(登录号KJ818900)。经生物信息学分析,该基因开放阅读框为729 bp,编码242个氨基酸,分子式为C1195H1886N346O368S13,相对分子质量为27.405 k Da,等电点为7.69,半衰期为30 h,脂肪系数为63.72,疏水性平均值为-0.646。对其亚细胞定位、跨膜结构、信号肽及疏水性/亲水性进行分析,表明其定位在细胞核,不存在跨膜结构,为非分泌性亲水蛋白。系统发育分析结果显示其与桃(AGS13699)的亲缘关系最近。二级结构预测显示该蛋白主要由26.86%的α螺旋和58.68%的无规卷曲组成。三维结构预测表明其符合AP2结构域模型特点。
- 张亮张智俊李疆代培红田嘉罗淑萍
- 关键词：扁桃克隆CBF1生物信息学
- 扁桃CBF1转录因子的克隆及原核表达分析被引量：4
- 2015年
- 为了探明CBF转录因子在扁桃中的抗寒分子机理,以新疆栽培扁桃‘矮丰’叶片为材料,通过PCR技术从扁桃基因组DNA中获得CBF1转录因子,命名为AF-Pd CBF1,Gen Bank登录号为KM245570。序列分析表明,该基因开放阅读框为729bp,编码242个氨基酸,推测蛋白质分子量为27.405 k D,并且该蛋白没有信号肽。进化树分析表明,AF-Pd CBF1与甜樱桃和中国梅的亲缘关系最近。将该基因片段连接到原核表达载体p ET-32a(+)中,构建融合表达质粒p ET-Pd CBF1,转化到E.coli Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白与预期大小一致,分子量大小约为47.8 k D。对重组蛋白的诱导条件进行优化后结果表明,重组蛋白p ET-Pd CBF1在IPTG浓度为0.2 mmol/L、诱导4 h时,其表达量最佳。试验结果可为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定基础。
- 张亮李疆代培红罗淑萍李鹏彭弯弯
- 关键词：扁桃原核表达
- 扁桃CBF2基因的克隆及原核表达
- 2018年
- 为进一步研究扁桃CBF2目的蛋白功能,探明CBF2转录因子在扁桃中的抗寒分子机制,以新疆栽培扁桃(Amygdalus communis L.)‘双软’叶片为材料,通过PCR技术从基因组DNA中克隆CBF2基因,命名为AcCBF2,将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)上,构建重组质粒pET-AcCBF2并转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达;生物信息学推测显示该基因的开放阅读框(ORF)为717 bp,编码238个氨基酸,其分子量为26.59 kD,等电点为5.29。系统发育树分析结果显示,AcCBF2基因与扁桃CBF1、光核桃和桃的亲缘关系最近。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,该蛋白分子量约47 kD,与预期蛋白大小基本一致。AcCBF2基因在E.coli Rosetta中的最佳诱导条件为IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导4 h。
- 郭淑朋李疆张亮李鹏罗淑萍陈婷婷
- 关键词：扁桃克隆生物信息学原核表达
