王洁琼
- 作品数：22 被引量：62H指数：5
- 供职机构：河南农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株及其应用
- 本发明公开了一种超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株，其保藏编号为：CCTCC NO:V201316，以及该超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株在制备鸡传染性法氏囊病病毒疫苗、诊断用抗原试剂、诊断用阳性血清试剂和...
- 李新生崔保安黄宗梅周云飞常婧竹王洁琼王莉
- 文献传递
- 一株H9亚型低致病性禽流感病毒及其应用
- 本发明公开了一株H9亚型低致病性禽流感病毒，分类命名：H9亚型禽流感病毒X‑13毒株，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏单位简称：CCTCC，保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期：2017年7月26日，保藏编...
- 李新生黄宗梅崔沛周云飞徐耀辉王洁琼赵玉杰岳旭龙
- 铁皮石斛RCA2基因克隆与生物信息学分析被引量：4
- 2017年
- 核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶是光合碳同化作用的关键酶,它对调节铁皮石斛Rubisco活性和光合速率具有直接的作用,对其进行基因等方面的研究,会对改变植物光合速率打下良好基础。该研究以一年生铁皮石斛叶片为材料,采用RT-PCR和RACE技术成功克隆了Rubisco活化酶(RCA)基因,并对其进行生物信息学分析。结果表明:RCA基因全长1 730 bp,命名为RCA2(Gen Bank登录号KT205842),其中5'-UTR 81 bp、3'-UTR 326 bp,开放阅读框1 323 bp,编码440个氨基酸,分子质量为48.53 k Da,等电点为6.19,包含P-loop NTPase超家族基因结构。氨基酸多重序列比对发现RCA2核苷酸序列与蝴蝶兰的相似性高达87%。RCA2编码蛋白为亲水性蛋白;亚细胞定位于叶绿体基质;蛋白质二级结构分析,α螺旋占30.68%,延伸链占25.45%,不规则折叠占43.86%。RCA2编码蛋白质的功能预测发现,RCA2在中间代谢起到了一个非常重要的角色。该研究发现对铁皮石斛光合作用关键酶Rubisco的分析可为其光合作用特性的发掘提供理论基础,并为提高温室大棚栽培效率提供理论依据。
- 蒋素华张燕王默霏王洁琼崔波
- 关键词：铁皮石斛克隆生物信息学分析
- 农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化体系研究被引量：6
- 2015年
- 以铁皮石斛原球茎为受体,研究了农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化体系,对遗传转化中的草甘膦筛选压力,菌液浓度,乙酰丁香酮浓度,预处理方法,侵染时间,美罗培南浓度等转化影响因子进行了优化。结果表明,摁压处理下的原球茎在添加浓度为200μmol·L-1乙酰丁香酮的菌液中侵染30 min,菌液浓度OD600为1.0,共培养48 h后,转入添加质量浓度为50 mg·L-1美罗培南和质量浓度为2.0 mg·L-1的草甘膦筛选培养基中,转化效率最高。经GUS组织化学染色及PCR分析鉴定,初步证明ACC合成酶反义基因已整合到铁皮石斛的基因组中。
- 崔波刘佳王洁琼蒋素华武振江叶永忠
- 关键词：铁皮石斛原球茎ACC合成酶
- 蝴蝶兰Rubisco活化酶基因PhRCAα的序列特征及在低温胁迫下的表达分析被引量：5
- 2016年
- 为研究蝴蝶兰Rubisco活化酶基因(RCA)及其在低温胁迫下的响应机制,本研究利用RT-PCR及RACE技术从蝴蝶兰叶片中克隆了一个Rubisco活化酶基因PhRCAα的c DNA序列(登录号KU187968)该基因全长1 642 bp,编码473个氨基酸,包含P-loop_NTPase超家族结构域,预测其成熟蛋白的分子质量为46.16 k D,等电点为5.73,属于RCA基因的α亚基。实时荧光定量PCR分析显示,在13℃/8℃的昼夜温度条件下,蝴蝶兰PhRCAα基因的转录表达在处理3 d、6 d、9 d和15 d时明显下降,恢复正常温度条件后,该基因的表达升高;在4℃低温条件下,PhRCAα基因的转录表达在处理0.5 h、1 h和2 h内逐渐升高,而在处理4 h时其表达量下降,一直到低温处理48 h时,其表达量维持在较低水平。结果表明PhRCAα对驯化低温(13℃/8℃)和冷胁迫(4℃)具有不同的响应机制,PhRCAα对短期的冷胁迫有一定的防御作用。
- 袁秀云许申平王洁琼崔波
- 关键词：RUBISCO活化酶低温胁迫
- 萼脊兰SeAP1-like基因的克隆与表达载体构建被引量：4
- 2015年
- 根据NCBI网站上萼脊兰AP1-like全长基因序列设计引物,采用RT-PCR法从萼脊兰花瓣中扩增Se AP1-like基因,对扩增产物进行克隆和测序。结果表明,获得的萼脊兰Se AP1-like基因为743 bp,编码247个氨基酸。将Se AP1-like基因插入p CAMBIA1304载体中,经PCR、双酶切鉴定,证实重组表达质粒中含有目的片段,表明成功构建了高效植物表达载体p CAMBIA1304-Se AP1。对Se AP1-like基因的结构域和所表达蛋白质的亲水性进行了分析,并预测了该基因所表达蛋白的二维结构。结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守域,属于MADS-box基因家族,该蛋白分子属于亲水性蛋白。二级结构分析表明,其包含57.49%的α螺旋、6.07%的延伸链、36.44%的不规则折叠。
- 蒋素华袁秀云王洁琼武振江张国付崔波
- 关键词：SE克隆
- 菊花高效再生体系的建立及抗生素对叶片分化的影响被引量：4
- 2015年
- 以菊花的叶片为外植体,研究无菌体系的建立以及不同植物生长调节剂组合对菊花愈伤组织的诱导及分化的影响;同时研究了筛选抗生素G418和抑菌抗生素美罗培南对菊花叶片分化的影响。结果表明,以2%Na Cl O为主要灭菌剂,处理20 min,同时加入2滴Tween-20,灭菌效果最佳。最适的愈伤组织诱导及分化培养基为MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,平均每外植体上可诱导出5.3个芽。G418浓度为15 mg/L能完全抑制外植体的分化;低浓度的美罗培南对菊花叶片再生具有明显抑制作用,但是高浓度反而促进叶片的分化。
- 梁芳王默霏王洁琼袁秀云刘建松崔波
- 关键词：菊花叶片美罗培南愈伤组织培养基配方
- 一种禽腺病毒Ⅰ群4型毒株WZ株及其应用
- 本发明公开了一种禽腺病毒Ⅰ群4型毒株WZ株，其保藏编号为：CCTCC NO：V201662，分类命名为：Ⅰ群4型禽腺病毒WZ株，保藏日期为：2016年12月14日，活性成分包括灭活的禽腺病毒Ⅰ群4型病毒毒株的禽腺病毒Ⅰ群...
- 李新生黄宗梅崔保安周云飞周薇帆赵玉杰王洁琼高文明张剑刘琳陈盼盼王莉
- 铁皮石斛DORCA基因的克隆及表达分析
- 铁皮石斛(Dendrobium officinale)是一种多年生的草本植物,在中草药植物中属于珍贵的品种,不仅具有良好的观赏价值,而且还具有极高的药用价值。在中国,铁皮石斛分布地区主要为南方潮湿地带,如云南、广西、浙江...
- 王洁琼
- 关键词：铁皮石斛克隆生物信息分析
- 文献传递
- 濒危植物太行菊组织培养及快繁技术研究被引量：8
- 2015年
- 研究旨在建立一种珍惜濒危植物太行菊的高效再生方法,为工厂化生产提供理论基础。以MS为基本培养基,用不同激素组合对太行菊无菌苗的叶片和茎段离体培养及植株再生、炼苗移栽等过程进行研究。结果表明,太行菊的叶片分化不定芽比茎段难,茎段最适合作为外植体进行愈伤组织的诱导及不定芽分化;筛选出了最佳培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,在此培养基中,茎段外植体可一步成苗,不需转换培养基即可完成愈伤组织的诱导分化及不定芽增殖过程;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L;再生苗在花园土中移栽成活率可达80%。研究简化了培养流程,建立了太行菊一步式高效再生体系。
- 梁芳蒋素华王洁琼袁秀云崔波
- 关键词：快繁
