姚晓坤 作品数:11 被引量:15 H指数:2 供职机构: 浙江医药高等专科学校 更多>> 发文基金: 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 北京市重点实验室 莆田市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 理学 更多>>
痢疾志贺菌侵袭素IpaC的原核表达及纯化复性 被引量:1 2017年 目的为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白。方法将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21(DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复性重组蛋白。结果重组蛋白最佳表达条件为0.50mmol/L IPTG、30℃诱导6h,获得分子量约为33kDa的IpaC重组蛋白。Western blotting证实了重组蛋白的特异性。IpaC重组蛋白主要以包涵体形式在宿主菌中表达,通过纯化后得到单一的目的蛋白。结论成功构建IpaC原核表达体系,并获得了蛋白的高效表达及优化。初步建立了IpaC重组蛋白的纯化方案。为进一步研究IpaC的侵袭性作用奠定了基础。 姚晓坤 伦永志 成军 刘顺爱 韩铭 孙杰关键词:IPAC 原核表达 蛋白纯化 一种硫酸特布他林的制备方法 本发明公开了一种硫酸特布他林的制备方法,该方法采用3,5‑二羟基苯乙酮为起始原料,先经苄基保护后得到3,5‑二苄氧基苯乙酮,3,5‑二苄氧基苯乙酮经过溴化铜溴代、DMSO氧化得到3,5‑二苄氧基苯乙酮醛,然后与叔丁胺还原... 姚晓敏 贾姝 姚晓坤 吴静怡文献传递 痢疾志贺菌侵袭素IpaC的生物信息学分析 2016年 以NCBI Gen Bank数据库作为数据来源,基于Ipa C蛋白的基因序列进行理化性质、疏水区、信号肽、亚细胞定位、结构域、跨膜区及二级结构、三级结构预测。分析表明,Ipa C蛋白由382 aa组成,分子量为41.016k Da,理论等电点为8.42,不稳定系数为50.52,亲水性蛋白质;无信号肽;亚细胞定位于细菌体外。跨膜区分析表明,Ipa C蛋白有较短的跨膜区域,大部分区域位于宿主细胞膜外侧。空间结构分析显示,Ipa C蛋白结构以α螺旋为主。分析结果表明,痢疾志贺菌侵袭素Ipa C属于不稳定碱性亲水性的细菌分泌蛋白,嵌于宿主细胞膜外侧,与其生物学功能相一致。 孙杰 姚晓坤 伦永志关键词:痢疾志贺菌 IPAC 生物信息学 大鼠烟酰胺超载与氧化应激相关分子水平的关系 被引量:2 2015年 目的观察烟酰胺超载与氧化应激之间的关系,以确定烟酰胺在机体氧化性损伤中扮演的重要角色。方法利用长期大鼠高烟酰胺喂养模型,结合Real time PCR和Western blot方法,研究烟酰胺超载对氧化应激相关分子水平的影响。结果在烟酰胺的作用下,NNMT、DNMT1、PARP1、Catalase及P53的表达水平呈现剂量依赖性的提高;同型半胱氨酸代谢酶BHMT、CBS与MTR出现了显著的表达补偿机制;INS1的表达受烟酰胺的影响较小。结论烟酰胺超载会触发氧化应激,这种改变可能全面并直接参与代谢综合征及其临床结局的形成和发展。 伦永志 李达 骆宁 姚晓坤 周士胜关键词:烟酰胺 氧化性应激 代谢综合征 人类和小鼠的丝氨酸蛋白酶抑制剂基因超家族 被引量:7 2015年 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin)家族是由结构相似,功能多样的蛋白质组成。最初的serpin是根据他们的功能而命名的,其中许多成员不是抑制剂而是伴侣,它们参与储存,运输及其他作用。在所有领域的基因组中,serpin含有36个编码人蛋白质基因和5个假基因。小鼠则有60个serpin的功能基因,其中有许多是直系同源人的serpin基因,一些基因已扩展到多个旁系同源基因。丝氨酸蛋白酶抑制因子(serpins)分布于全身组织;其中大多数在细胞外,也有一些在细胞内。经研究显示,serpins可能对炎症,免疫功能,肿瘤发生,血液凝固,痴呆和肿瘤转移都有作用。根据这些蛋白的特性,可能将会进一步发现疾病的潜在生物标志物和治疗靶点。 姚晓坤 潘志鹏 伦永志关键词:丝氨酸蛋白酶抑制剂 血液凝固 补体 细胞死亡 肠道病原菌侵袭素在药物纳米载体中的应用 2018年 口服给药是药物递送系统中的优选途径。然而,在通过胃肠道时,肠细胞的低渗透性经常会阻碍药物的有效递送。包囊药物能够解决这一问题的关键,取决于其中的细胞侵袭性靶向基团包裹的纳米颗粒系统。这种药物递送系统的侵入特性是由细菌侵袭素的关键成分提供,这些成分具有快速调节药物穿越肠细胞的作用,从而促进宿主细胞对药物的有效吸收。此综述重点阐述细菌侵袭系统,对合适的侵袭素分别从功能和分子结构、作为靶向药物的相对价值以及在使用过程中可能存在的误区依次进行探讨。此外,对口服给药方法的改进和未来前景也进行了讨论。 孙杰 姚晓坤 伦永志关键词:肠道屏障 一种硫酸特布他林的制备方法 本发明公开了一种硫酸特布他林的制备方法,该方法采用3,5‑二羟基苯乙酮为起始原料,先经苄基保护后得到3,5‑二苄氧基苯乙酮,3,5‑二苄氧基苯乙酮经过溴化铜溴代、DMSO氧化得到3,5‑二苄氧基苯乙酮醛,然后与叔丁胺还原... 姚晓敏 贾姝 姚晓坤 吴静怡烟酰胺超载对大鼠血浆内甲基化反应水平的影响 2014年 利用长期大鼠高烟酰胺喂养模型,观察烟酰胺超载对血浆内甲基化反应指标的影响。结果发现,高烟酰胺摄入将伴随高甲基供体消耗,并引起血中甜菜碱水平明显降低,直接证明过量烟酰胺会导致甲基库耗竭。这表明过量的烟酰胺可能通过甲基耗竭诱导氧化性线粒体和DNA损伤及DNA甲基化样式的改变。 伦永志 孙杰 骆宁 姚晓坤 周士胜关键词:烟酰胺 代谢综合征 甲基化 大肠癌易感性基因文献计量学分析及关键基因的筛选 2019年 通过对大肠癌易感性相关基因的文献计量学及生物信息学分析,筛选获得关键基因,为大肠癌的诊断治疗研究提供参考。在NCBI Pubmed及中国知网(CNKI)数据库中检索关于近5年来发表的有关大肠癌易感性相关基因的文献进行计量学分析,并对相关基因及其产物进行生物信息学分析。共有442篇文献纳入研究,共涉及417个基因。文献计量分析结果显示中国在该领域研究水平处于明显领先地位,其次是美国。生物信息学表明TP53、AKT1、STAT3、IL6、VEGFA、EGFR、PIK3CA、MYC和KRAS等多个基因在相互作用网络中起着关键作用。 伦永志 郑丽衡 姚晓坤 王凯玲关键词:大肠癌 易感基因 文献计量学