孙杰
- 作品数：13 被引量：19H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 痢疾志贺菌侵袭素IpaC的原核表达及纯化复性被引量：1
- 2017年
- 目的为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白。方法将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21(DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复性重组蛋白。结果重组蛋白最佳表达条件为0.50mmol/L IPTG、30℃诱导6h,获得分子量约为33kDa的IpaC重组蛋白。Western blotting证实了重组蛋白的特异性。IpaC重组蛋白主要以包涵体形式在宿主菌中表达,通过纯化后得到单一的目的蛋白。结论成功构建IpaC原核表达体系,并获得了蛋白的高效表达及优化。初步建立了IpaC重组蛋白的纯化方案。为进一步研究IpaC的侵袭性作用奠定了基础。
- 姚晓坤伦永志成军刘顺爱韩铭孙杰
- 关键词：IPAC原核表达蛋白纯化
- 重组人Hespintor对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用
- 2017年
- 目的完善重组Hespintor蛋白(rHespintor)的纯化方法,提高蛋白提取效率,并探讨其对肝母细胞瘤HepG2细胞增殖及侵袭作用的影响。方法在重组蛋白提取中增加包涵体洗涤过程,更改蛋白纯化缓冲体系,并利用Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐(BAPNA)为作用底物,测定纯化的rHespintor对胰蛋白酶水解抑制活性。以空白组为对照组,通过MTT实验、细胞划痕愈合实验、肿瘤细胞侵袭实验分别检测rHespintor对肝母细胞瘤HepG2细胞生长的影响及作用效果。结果对包涵体蛋白进行尿素梯度洗涤后可有效去除目的蛋白中绝大多数杂蛋白,一步纯化后,目的蛋白rHespintor具有较高胰蛋白酶水解抑制活性,且抑制效果呈剂量依赖关系。rHespintor作用于肝母细胞瘤HepG2细胞后,细胞增殖受到抑制,迁移能力减弱,侵袭的细胞数量显著减少。结论 rHespintor在体外可明显抑制肝母细胞瘤HepG2细胞的增殖及侵袭作用。
- 孙杰赵梓晗潘志鹏潘凌鸿伦永志
- 关键词：重组蛋白质类细胞增殖细胞运动细胞侵袭
- 基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立被引量：4
- 2016年
- 目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检测方法。方法先利用常规菌群分析方法鉴定正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠的菌群状况,再提取其基因组DNA,最后以肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)为模板,利用ERIC-PCR方法获得正常小鼠和模型小鼠的肠道菌群指纹图谱,与常规菌群分析结果作比较,验证ERIC-PCR技术的准确性。结果常规菌群分析结果表明四种优势菌群在数量上出现明显的变化,证实造模成功。经ERIC-PCR技术成功获得两组小鼠粪便基因组DNA图谱,两组间呈现具有一定对比性的特异性指纹图谱。结论从小鼠粪便基因组经ERIC-PCR后的图谱中特异性条带的分布、数目和亮度来看,能说明肠道菌群的分布状况存在明显差异,结合常规菌群分析方法作对比,说明ERIC-PCR技术是一种分析小鼠肠道菌群失调高效快捷的检测方法。
- 孙杰孙丽妲伦永志潘志鹏潘凌鸿赵梓晗
- 关键词：菌群失调ERIC-PCR
- 糖脂代谢参与糖尿病脑损伤的研究进展被引量：3
- 2020年
- 糖尿病脑损伤是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的主要并发症之一,表现为海马区神经细胞损伤、β-淀粉样蛋白沉积、Tau蛋白异常磷酸化与神经纤维缠结的形成、突触可塑性下降、脑萎缩和痴呆等类似于阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)样改变。糖脂代谢异常与DM脑损伤发生有密切关系。胰岛素抵抗、线粒体功能障碍、氧化应激等在糖脂代谢异常中起重要作用。通过研究糖脂代谢在DM脑损伤的作用机制,以期从代谢的角度,寻找延缓DM脑损伤、防治AD的新方法。
- 董雯刘美琴伦永志伦永志孙杰潘凌鸿
- 关键词：阿尔茨海默病糖脂代谢胰岛素抵抗氧化应激
- 2型糖尿病差异表达基因筛选及其调控网络构建
- 2021年
- 运用生物信息学方法对2型糖尿病(T2DM)易感基因进行筛选、分析,从分子水平探讨T2DM发病机制。利用GEO数据库查找T2DM患者外周血单个核细胞差异表达的基因集;利用DAVID数据库进行GO功能富集分析、KEGG信号通路分析;利用STRING工具与Cytoscape软件及MCODE插件对差异表达基因做蛋白质互作网络分析。结果如下:1)GO功能富集分析显示T2DM差异表达基因主要分布在G蛋白偶联受体信号通路、细胞增殖分化、信号转导等生物过程中,大部分与神经传导相关;2)KEGG信号分析结果显示差异表达基因主要集中在神经活性配体-受体相互作用信号通路、Ras信号通路等通路;3)共得到可信度较高的RAC1、PIK3R1、CDC42等12个关键基因。可见T2DM的发病受到炎症反应、氧化应激及神经信号转导等多种因素的影响。
- 程学英彭益彬孙杰孙杰刘奔
- 关键词：2型糖尿病基因生物信息学
- 实验小鼠烧伤后对皮肤解毒酶表达水平的影响
- 2017年
- 本文旨在通过检测烧伤诱导的大鼠体内烟酰胺降解的改变,探索皮肤本身可能在胰岛素抵抗中起到的重要作用。此实验通过检测与解毒相关的酶的m RNA的表达(包括烟酰胺N-甲基转移酶、醛氧化酶、儿茶酚-O-甲基转移酶、单胺氧化酶A、超氧化物歧化酶2、谷胱甘肽过氧化物酶1、过氧化氢酶和过氧化还原酶1)。进而研究假烧伤大鼠与烧伤大鼠体内的烟酰胺和N1-甲基烟酰胺的清除能力是否有所差异。结果表明,在烧伤大鼠的皮肤中酶均未表达,但假烧伤大鼠均有表达。假烧伤大鼠的烟酰胺的代谢能力大于烧伤大鼠的代谢能力且全层烧伤的大鼠皮肤中检测不到异型生药物代谢酶的表达。烧伤能降低机体对过多烟酰胺的清除能力。
- 潘凌鸿孙杰周士胜伦永志
- 关键词：烧伤皮肤烟酰胺
- 植物乳杆菌PUM1785抑菌作用及耐胆盐和耐盐性能被引量：4
- 2020年
- 目的通过分析植物乳杆菌PUM1785体外抑菌活性和部分耐受能力,为进一步研发乳杆菌微生态制剂提供理论和数据支持。方法以模式菌株WCSF1为对照株,采用双层琼脂点种法进行体外抑菌试验,并开展高胆盐、高盐环境耐受试验。结果植物乳杆菌PUM1785体外抑菌活性与模式菌株相近,对6种常见致病菌均有较强的抑制作用,对革兰阴性菌的抑菌效果优于革兰阳性菌。在不同浓度胆盐溶液中培养24 h后,2株乳杆菌生长均受抑制,当胆盐浓度从0 g/100 mL持续增至0.5 g/100 mL后,2株乳杆菌活菌数量呈下降趋势,但始终维持在10~5 CFU/mL数量级以上,并且PUM1785与WCSF1活菌数量比呈上升趋势;在不同浓度的NaCl溶液中培养24 h后,2株乳杆菌均生长良好,当NaCl浓度从0 g/100 mL升高到8 g/100 mL时,2株乳杆菌活菌数始终维持在10~8 CFU/mL数量级以上,并且PUM1785与WCSF1活菌数量比呈明显上升趋势。结论植物乳杆菌PUM1785具有与模式菌株相近的抑菌活性,对胆盐和高盐环境耐受力均强于模式菌株,表明PUM1785具有良好的生物学特性,可以作为微生态制剂研发的候选菌株。
- 孙杰元少尉王秋燕赵文琪伦永志
- 关键词：植物乳杆菌抑菌胆盐高盐耐受
- 痢疾志贺菌侵袭素IpaC的生物信息学分析
- 2016年
- 以NCBI Gen Bank数据库作为数据来源,基于Ipa C蛋白的基因序列进行理化性质、疏水区、信号肽、亚细胞定位、结构域、跨膜区及二级结构、三级结构预测。分析表明,Ipa C蛋白由382 aa组成,分子量为41.016k Da,理论等电点为8.42,不稳定系数为50.52,亲水性蛋白质;无信号肽;亚细胞定位于细菌体外。跨膜区分析表明,Ipa C蛋白有较短的跨膜区域,大部分区域位于宿主细胞膜外侧。空间结构分析显示,Ipa C蛋白结构以α螺旋为主。分析结果表明,痢疾志贺菌侵袭素Ipa C属于不稳定碱性亲水性的细菌分泌蛋白,嵌于宿主细胞膜外侧,与其生物学功能相一致。
- 孙杰姚晓坤伦永志
- 关键词：痢疾志贺菌IPAC生物信息学
- 一株植物乳杆菌SAL及其制剂、应用
- 本发明提供了一种新的保藏于CGMCC，保藏号为CGMCC No.21786的植物乳杆菌SAL及其制剂和应用。所述植物乳杆菌SAL对人体胃肠道环境具有较强的耐受力，可抑制细菌生长，所述细菌包括金黄色葡萄球ATCC25923...
- 伦永志孙杰
- 虚拟仿真教学平台在实践教学中的应用--以“临床血液学检验技术”课程为例被引量：7
- 2022年
- 为了丰富实践教学手段,增强专业课实践教学的时效性,培养学生的思维能力、综合分析与判断能力、发现与解决问题的能力,通过虚拟仿真教学平台开展了“临床血液学检验技术”课程的实践教学。教学效果分析表明,虚拟仿真教学平台对“临床血液学检验技术”课程的实践教学工作具有促进作用,尤其有助于教师进行重点、难点内容讲解,缓解了实践教学环节中教学资源不足的问题。虚拟仿真教学平台所具备的独特优势能降低实验教学成本,能有效解决传统实验平台建设周期长、投入大、更新换代慢等问题,即使在新冠肺炎疫情常态化背景下也可以保障正常教学秩序,具有广泛的实际应用价值。
- 刘奔董雯孙杰孙杰伦永志潘凌鸿
