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重组人Hespintor对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用: 2017年; 目的完善重组Hespintor蛋白(rHespintor)的纯化方法,提高蛋白提取效率,并探讨其对肝母细胞瘤HepG2细胞增殖及侵袭作用的影响。方法在重组蛋白提取中增加包涵体洗涤过程,更改蛋白纯化缓冲体系,并利用Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐(BAPNA)为作用底物,测定纯化的rHespintor对胰蛋白酶水解抑制活性。以空白组为对照组,通过MTT实验、细胞划痕愈合实验、肿瘤细胞侵袭实验分别检测rHespintor对肝母细胞瘤HepG2细胞生长的影响及作用效果。结果对包涵体蛋白进行尿素梯度洗涤后可有效去除目的蛋白中绝大多数杂蛋白,一步纯化后,目的蛋白rHespintor具有较高胰蛋白酶水解抑制活性,且抑制效果呈剂量依赖关系。rHespintor作用于肝母细胞瘤HepG2细胞后,细胞增殖受到抑制,迁移能力减弱,侵袭的细胞数量显著减少。结论 rHespintor在体外可明显抑制肝母细胞瘤HepG2细胞的增殖及侵袭作用。; 孙杰赵梓晗潘志鹏潘凌鸿伦永志; 关键词：重组蛋白质类细胞增殖细胞运动细胞侵袭

基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立被引量：4: 2016年; 目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检测方法。方法先利用常规菌群分析方法鉴定正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠的菌群状况,再提取其基因组DNA,最后以肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)为模板,利用ERIC-PCR方法获得正常小鼠和模型小鼠的肠道菌群指纹图谱,与常规菌群分析结果作比较,验证ERIC-PCR技术的准确性。结果常规菌群分析结果表明四种优势菌群在数量上出现明显的变化,证实造模成功。经ERIC-PCR技术成功获得两组小鼠粪便基因组DNA图谱,两组间呈现具有一定对比性的特异性指纹图谱。结论从小鼠粪便基因组经ERIC-PCR后的图谱中特异性条带的分布、数目和亮度来看,能说明肠道菌群的分布状况存在明显差异,结合常规菌群分析方法作对比,说明ERIC-PCR技术是一种分析小鼠肠道菌群失调高效快捷的检测方法。; 孙杰孙丽妲伦永志潘志鹏潘凌鸿赵梓晗; 关键词：菌群失调 ERIC-PCR

JAK/STAT信号通路在机体免疫及相关疾病中的作用机制被引量：11: 2016年; JAK/STAT（Janus kinase/Signal transducer and activator of transcription）信号通路目前已成为研究细胞膜到细胞核信号传递中的经典信号途径,同时也解释了大量细胞因子和激素是如何发挥其相关功能的。解析JAK/STAT信号通路同样有助于细胞间通讯和细胞外基因表达控制的研究。目前针对JAK/STAT信号通路的特异性临床治疗已取得一定成就。; 潘志鹏伦永志; 关键词：信号通路 JAK/STAT 细胞间通讯 TRANSDUCER STATS

人类和小鼠的丝氨酸蛋白酶抑制剂基因超家族被引量：7: 2015年; 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin)家族是由结构相似,功能多样的蛋白质组成。最初的serpin是根据他们的功能而命名的,其中许多成员不是抑制剂而是伴侣,它们参与储存,运输及其他作用。在所有领域的基因组中,serpin含有36个编码人蛋白质基因和5个假基因。小鼠则有60个serpin的功能基因,其中有许多是直系同源人的serpin基因,一些基因已扩展到多个旁系同源基因。丝氨酸蛋白酶抑制因子(serpins)分布于全身组织;其中大多数在细胞外,也有一些在细胞内。经研究显示,serpins可能对炎症,免疫功能,肿瘤发生,血液凝固,痴呆和肿瘤转移都有作用。根据这些蛋白的特性,可能将会进一步发现疾病的潜在生物标志物和治疗靶点。; 姚晓坤潘志鹏伦永志; 关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂血液凝固补体细胞死亡

乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式调节蛋白HBVDNAPTP1基因全长cDNA RACE克隆: 2017年; 目的利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式调节蛋白HBVDNAPTP1基因的全长cDNA序列。方法提取肝母细胞瘤细胞系HepG2总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)技术建立RACE cDNA文库,进行RACE实验,扩增HBVDNAPTP1基因全长cDNA序列。结果经RACE实验,获得HBVDNAPTP1基因全长cDNA序列为2 537bp,经RT-PCR验证确定该基因真实存在,且与GenBank数据库中注释的其他基因无同源性。结论成功获取HBVDNAPTP1基因的全长cDNA序列,为进一步开展HBVDNAPTP1生物学功能及调控机制研究提供了线索和依据。; 潘志鹏韩铭袁晓雪刘顺爱成军伦永志; 关键词：乙型肝炎病毒 DNA聚合酶反式激活 RACE

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潘志鹏