崔莉
- 作品数:17 被引量:4H指数:1
- 供职机构:上海交通大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程理学文化科学更多>>
- β‑井冈霉烯胺的生物制备方法
- 本发明公开了β‑井冈霉烯胺的生物制备方法,是以式II所示的井冈霉烯酮为底物,使其在氨基转移酶的作用下,与氨基供体发生反应,生成式I所示的β‑井冈霉烯胺,其反应路线如下:<Image file="DDA0000591821...
- 冯雁崔莉白林泉邓子新关晓青
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- 井冈霉烯胺的生物制备方法
- 本发明公开了一种井冈霉烯胺的生物制备方法;包括在体外条件下用氨基转移酶WecE完成井冈霉烯酮<Image file="DDA0001147253830000011.GIF" he="371" imgContent="dr...
- 冯雁崔莉白林泉邓子新刘璋敏
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- 链霉菌来源谷氨酰胺合成酶GLnA_Shy的性质表征
- 2020年
- 在大肠杆菌BL21(DE3)中对吸水链霉菌5008的GLnyShy基因进行克隆表达。GLnAShy蛋白由469个氨基酸组成,其分子量约为5.2×10^4。体外酶学性质及酶动力学测定结果显示,GLnAShy酶催化反应的最适温度为35℃,最适pH为7.5,对底物谷氨酸的米氏常数(Km)和催化常数(kcat)分别为(21.8±3.2)μmol/L和(3.8±0.5)×10^-3 s^-1。进化树分析和同源建模结果显示GLnAShy蛋白属于谷氨酰胺合成酶(GS)家族,该酶包含一个较小的N端结构域(残基区域为16~94)和一个较大的C端结构域(残基区域为101~466),其三级结构具有GS典型的双通道结构,与底物谷氨酸的结合位点为Glu131、Ser264、Arg320和Arg359。谷氨酰胺合成酶在含氮化合物的生产上应用广泛,通过解析GLnAShy的功能,为进一步对其进行定点改造提供了理论基础。
- 刘辉刘璋敏冯雁李谦崔莉
- 关键词:谷氨酰胺合成酶大肠杆菌同源建模链霉菌克隆表达
- S公司节能减排及成本控制的可行性研究
- 近几年,中国环境问题层出不穷,污染形势严峻,能资源浪费严重。大量的工业废水和生活污水排入水中,造成多地出现饮用水源被严重污染。在我国“十二五”规划纲要当中制定了节能减排时间表,要求到2015年主要污染物的排放总量降低10...
- 崔莉
- 关键词:节能减排成本控制
- 文献传递
- 鲍曼不动杆菌UDP-葡萄糖4-差向异构酶Gne1的表征
- 2021年
- 异源表达鲍曼不动杆菌AB0057的UDP-葡萄糖4-差向异构酶并表征其酶学性质以及分析其结构与功能。将异构酶基因构建到pET-28a表达载体并在大肠埃希菌BL21(DE3)中异源表达,使用高效液相色谱检测酶活力及表征酶学性质。系统发育分析、序列比对、同源建模与分子对接分析其结构与关键催化位点。结果显示,重组酶Gne1获得可溶性表达,质量约为38.9 kD,催化最适温度为44℃,最适pH为6.0,米氏常数K_(M)与催化常数k_(cat)分别为(1.227±0.0824)mmol/L和(82.64±3.562)×10^(-3)·min^(-1)。该酶属于NADB_Rossmann超家族并分属于UDP_G4E_1_SDR_e亚组,分别具有典型GXGXXG基序与YXXXK基序。N端结构域与NAD结合,而C端结构域用来结合底物,催化关键位点为S125和Y150。本研究验证了Gne1的差向异构酶活性,阐释了其序列特点和结构特征,揭示了其与底物、辅因子的结合模式,分析了关键催化位点。为蛋白质工程改造提高酶活力进而利用生物酶法合成稀有功能糖提供了理论依据。
- 张展冯雁李谦崔莉
- 环氧树脂固定化环状芽孢杆菌糖氨基转移酶的研究被引量:1
- 2020年
- 使用环氧树脂MC-150EP对来自环状芽孢杆菌的糖氨基转移酶BtrR进行固定化以制备光学纯β-井冈霉烯胺,在单因素试验的基础上,采用响应面试验进一步优化固定化工艺,得到最佳固定化条件:载体与蛋白质投放比例为21, pH值8.2,温度17℃,盐离子浓度460 mmol·L^-1,固定化时间15 h,辅酶浓度0.2 mmol·L^-1,由此制得的固定化酶比活力为20.6 U·g^-1(湿载体),酶活回收率为66.5%。酶学性质研究表明,固定化酶的立体选择性与游离酶相同,最适反应温度和pH值分别为39℃和8.5,热稳定性和酸碱稳定性与游离酶相比有较大提高;同时,固定化酶具有良好的操作稳定性和储存稳定性,在连续使用9个批次后,固定化酶保留初始酶活的50.5%;4℃下连续放置20 d后,固定化酶的比活力为初始酶活的81.6%。
- 厉刚刚阿合丽马·阿力木别克冯雁李谦崔莉
- 关键词:环氧树脂固定化响应面法
- 酶定向分子进化:拓展生物催化和生物转化的功能空间
- 酶定向分子进化是指在体外模拟自然进化机制,对酶功能进行再设计和改造,进而为生物催化和生物转化提供高效生物催化剂。近年来,后基因组时代迅猛增加的生物信息资源及计算生物学等学科的快速发展,使酶分子进化技术面临全新格局,应用现...
- 崔莉罗玉常冯雁
- 关键词:分子进化蛋白质工程代谢工程合成生物学
- 井冈霉烯胺生物合成途径的设计与构建
- C7N 氨基环醇类化合物β-井冈霉烯胺是β-糖苷酶抑制剂的先导化合物,目前依赖于化学全合成,其衍生物可作为化学分子伴侣应用于各种由β-糖苷酶异常引起的溶酶体贮积症。由于其分子结构中存在多个手性中心,化学合成存在困难。结合...
- 崔莉
- 关键词:氨基转移酶生物合成
- 井冈霉醇胺的直接生物合成方法
- 本发明公开了一种井冈霉醇胺的直接生物合成方法,是以7‑磷酸景天庚酮糖为底物及辅因子、氨基供体,在环化酶、异构酶和转氨酶的依次催化下,经生物化学反应生成井冈霉醇胺;实施方案包括在体外催化和构建基因工程菌通过发酵产生井冈霉醇...
- 崔莉张文杰赵梦莹
- 南极假丝酵母脂肪酶B分子进化及催化合成(S)-1,4-苯并二噁烷
- 本发明提供了南极假丝酵母脂肪酶B和突变体及其制法和应用。具体地,本发明涉及一种南极假丝酵母脂肪酶B的体外定向进化及其催化动力学拆分(R,S)‑1,4‑苯并二噁烷‑2‑甲酸甲酯合成手性药物中间体的应用及其条件优化。本发明还...
- 冯雁张琦唐璐瑶崔莉