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梁粟: 作品数：21 被引量：21H指数：3; 供职机构：石河子大学医学院第一附属医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金高层次人才科研启动基金新疆生产建设兵团医药专项基金更多>>; 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>

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灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响: 2023年; 目的探讨灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响。方法以PBS、BCG菌株、B/R菌株与灭活B/R菌株为分组方式,单次皮下接种免疫C57BL/6小鼠。于免疫后第9周、第12周和第15周,分别取各组小鼠脾脏,提取脾脏淋巴细胞。各组脾脏淋巴细胞半数直接检测,其余部分进行体外培养,并按实验设计以结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)进行刺激,而后进行检测。应用流式细胞技术分别检测未经PPD刺激和经刺激的小鼠脾脏淋巴细胞内中央型记忆性T细胞(T_(CM))和效应型记忆性T细胞(T_(EM))数量。结果免疫后未经PPD刺激,第9周时,灭活B/R组、B/R组、BCG组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=13.20,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=28.15,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=8.92,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=6.13,P<0.05)高于PBS组。第12周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=15.97,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=13.60,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=5.52,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=20.15,P<0.05)高于PBS组。第15周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=15.40,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=7.43,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=6.57,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=9.27,P<0.05)高于PBS组。免疫后经结核特异性抗原PPD刺激,在第9周时,灭活B/R组、B/R组、BCG组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=9.66,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=11.20,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=7.24,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=9.30,P<0.05)高于PBS组。第12周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=9.33,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=6.94,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=67.71,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=10.86,P<0.05)高于PBS组。第15周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=39.88,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=11.93,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=138.80,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=38.47,P<0.05)高于PBS组。值得注意的是,在第15�; 丰启盈邓喜玲张杰董江涛柳小玲梁粟王菊张辉吴江东章乐吴芳张万江; 关键词：灭活疫苗 T淋巴细胞免疫记忆

pup/mpa/dop/pafA基因过表达结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv和无毒株H37Ra的构建: 2015年; 目的构建pup/mpa/dop/pafA基因过表达结核杆菌国际标准强毒株H37Rv和无毒株H37Ra。方法提取已构建的结核杆菌-大肠埃希菌重组穿梭质粒PMV361pup,PMV361mpa,PMV361dop和PMV361pafA,利用电转化方法分别转入H37Rv和H37Ra感受态细胞,构建pup/mpa/dop/pafA基因过表达H37Rv和H37Ra,同时优化电转化脉冲电压,并应用QRT-PCR进行检测及鉴定。结果成功构建了pup/mpa/dop/pafA基因过表达H37Rv和H37Ra,重组菌均能表达目的基因,在2 100~2 300V脉冲电压范围内构建的菌株目的基因相对表达量与电压呈正相关。结论构建的pup/mpa/dop/pafA基因过表达H37Rv和H37Ra均能表达相应目的基因,以电压为2 300V电转化构建的菌株表达量较高。; 张培培吴芳章乐吴江东曹旭东张辉张春军柳小玲王君梁粟张万江

一种新型结核杆菌融合菌株的制备方法及其应用: 本发明公开了一种新型结核杆菌融合菌株的制备方法及其应用，对BCG菌株原生质体和H37Ra菌株原生质体的再生条件进行优化，培养出活性好、生长良好的再生菌株。提供一种制备BCG菌株原生质体和H37Ra菌株原生质体的融合子的方...; 张万江赵正涌张舜文吴芳吴江东张杰董江涛张辉徐芳柳小玲梁粟朱荟云邵萌; 文献传递

一种结核杆菌Pup基因缺失突变菌株的构建及其应用: 本发明公开了一种结核杆菌Pup基因缺失突变菌株的构建方法及其应用，基于融合PCR技术以及T载体克隆技术，首次构建并鉴定基因的置换型缺失突变载体T‑Pup‑N‑K‑Pup‑C，通过电转化技术使得重组的Pup基因缺失突变载体...; 张万江邵萌张舜文吴江东吴芳张辉张杰董江涛徐芳柳小玲朱荟云梁粟; 文献传递

泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性机制研究被引量：6: 2017年; 目的探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的影响及其机制。方法采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因(Pup、Dop、PafA、Mpa基因)分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值的差异;比较加入改变细胞壁通透性试剂后,单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼MIC差值间的差异。结果 (1)与单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC值过表达PafA基因株增加1.03μg/ml,过表达Dop、Mpa基因株分别降低1.03μg/ml、0.68μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.898,P>0.05);过表达Pup基因株异烟肼的MIC值增加8μg/ml,差异有统计学意义(t=2.185,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株异烟肼的MIC值分别降低4.82、4.98、4.99、4.9μg/ml,差异均有统计学意义(F=35.809,P<0.05)。(2)与加入改变细胞壁通透性试剂后单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC差值过表达Pup基因株增加7.78μg/ml,差异有统计学意义(t=2.173,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株分别降低4.58、4.73、4.75、4.68μg/ml,差异均有统计学意义(F=33.598,P<0.05);过表达Dop、Mpa基因株分别降低1μg/ml和0.7μg/ml,过表达PafA基因株增加0.97μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.935,P>0.05)。结论结核分枝杆菌泛素样蛋白蛋白酶体系统可能通过调控单耐异烟肼结核分枝杆菌细胞壁的通透性影响其耐药性。; 张帅张舜文吴芳吴江东章乐张杰董江涛张玉清柳小玲梁粟朱荟云张大龙武青青张万江; 关键词：结核分枝杆菌耐药性异烟肼

PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制研究: 2015年; 目的本研究通过诱导结核分枝杆菌在低氧环境中进入持留状态,来比较分析不同时间不同低氧环境下结核分枝杆菌中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制。方法首先对结核分枝杆菌国际标准无毒株(H37Ra)和结核分枝杆菌国际标准强毒株(H37Rv)在不同低氧环境下进行培养,提取每个样本菌株的总RNA,并进行完整性鉴定;运用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测每个样本菌株中PhoP基因和PhoR基因的表达水平;比较分析不同时间不同低氧环境下的结核分枝杆菌菌株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异。结果在不同时间点对低氧环境的结核分枝杆菌PhoP基因和PhoR基因的表达水平进行检测,结果显示:与第10d相比,培养至第15d时H37Rv菌株和H37Ra菌株中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05);并且培养至第25d时,H37Rv菌株中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平比H37Ra菌株表达均上调2.34倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在不同时间点相同毒力的结核分枝杆菌的PhoPR双组分信号转导系统中PhoP基因和PhoR基因在不同低氧环境下的表达存在差异,而且在相同时间点不同毒力结核分枝杆菌的PhoPR双组分信号转导系统中PhoP基因和PhoR基因在不同低氧环境下的表达也存在差异,表明PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌的持留性具有调控作用。; 邬博雷英吴芳章乐吴江东曹旭东朱彬何丽李瑞山张玉清王钊王君柳小玲张培培梁粟张万江; 关键词：结核分枝杆菌

新型结核病疫苗融合菌株制备及其免疫学特性的研究被引量：6: 2016年; 目的观察由卡介苗(BCG)与结核分枝杆菌国际标准弱毒株H37Ra(H37Ra菌株)构建的融合菌株(B/R菌株)生长特性及其在免疫小鼠体内的生长情况。方法分别测定用7H9培养基培养3、6、9、12、15、18、21、24、27和30d的B/R菌株、BCG和H37Ra菌液在波长600nm处的A值,以时间为横坐标,A600值为纵坐标,绘制细菌生长曲线。将C57BL/6小鼠随机分为B/R菌株、BCG和H37Ra菌株3组,每组30只,分别皮下接种B/R、BCG和H37Ra菌液0.1ml(含活菌数为1.0×106个),免疫15、30、45、60和75d后无菌条件下取小鼠肝脏、脾脏和肺脏,制成脏器组织匀浆,接种罗氏固体培养基斜面,培养20d后计数各脏器菌落数(Log10cfu)。结果细菌生长曲线显示,B/R菌株的适应调整期较长,6d后进入生长对数期,27d后进入稳定期,生长周期约30d左右。免疫15、30、45、60和75d小鼠肝脏、脾脏、肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组高于BCG和H37Ra菌株组。小鼠肝脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫15、60及75d小鼠脾脏定植细菌数(Log 10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P<0.05),免疫30和45d小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P<0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫15和45d小鼠肺脏定植的细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P<0.05),免疫30、60和75d小鼠肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P<0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 B/R菌株的生长周期为30d,在小鼠体内至少存活2个月,定植能力较强。; 柳小玲吴芳吴江东章乐王君梁粟张培培张万江; 关键词：BCG H37RA

不同浓度米诺地尔搽剂对女性雄激素性脱发患者毛发密度、毛发直径变异率与症状评分的影响: 2023年; 目的探讨不同浓度米诺地尔搽剂治疗女性雄激素性脱发(Androgenetic alopecia,AGA)的临床疗效,重点观察对患者毛发直径变异率、毛发密度及症状评分的临床影响。方法本次研究对象为皮肤科2021年9月~2023年2月收治的210例女性AGA患者,数字随机表法均分成两组,对照组105例使用高浓度即5.0%的米诺地尔搽剂,观察组105例使用低浓度即2.0%的米诺地尔搽剂,比较两组临床疗效,毛发直径变异率与密度改善情况与症状评分等。结果观察组总有效率为94.29%,对照组为92.38%,比较差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗前临床症状评分、毛发直径变异率、毛发密度比较差异均无统计学意义,治疗后两组临床症状评分与毛发直径变异率均明显低于同组治疗前(P<0.001),毛发密度均明显高于同组治疗前(P<0.001);观察组不良反应发生率为6.67%,明显低于对照组20.95%(P<0.05);观察组总满意度为69.52%,明显高于对照组53.33%(P<0.05)。结论不同浓度米诺地尔搽剂治疗女性AGA均有良好的临床疗效,均能改善毛发直径变异率与毛发密度及症状评分,而与5%浓度相比2%浓度米诺地尔搽剂安全性更高。; 王雪曾佳贾雪松曹娟梅张亚丽李君梁粟; 关键词：症状评分

结核分枝杆菌PPE2的生物信息学分析被引量：1: 2022年; 目的应用生物信息学软件预测分析结核分枝杆菌PPE2蛋白的结构与功能。方法从NCBI中获得PPE2序列及其编码基因序列,通过OFR Finder、ProtParam、ProtScaleon Expasy、TMHMM Sever v.2.0、SignalP 4.1 Sever、PSORT、NetPhos 3.1 Sever、BLAST、SOPMA、SWISS-MODEL、ABCpred、SYFPEITHI等工具预测分析PPE2编码蛋白的生物学结构与特性。结果PPE2蛋白由556个氨基酸组成,相对分子质量为56951.97×10~3,等电点4.78,为亲水性蛋白,无跨膜区域及信号肽;编码基因Rv0256c总长度为1671 bp,有10个开放阅读框架;PPE2蛋白有53个磷酸化位点,1个保守结构域;蛋白二级结构中α-螺旋占41.91%,β-折叠占11.33%,β-转角占3.96%,无规则卷曲占42.81%;有57个(得分>0.5)B细胞抗原表位和113个(得分>15)T细胞抗原表位。结论PPE2蛋白为亲水蛋白,具有潜在的T、B细胞抗原表位,可作为研发结核病疫苗的候选蛋白。; 冯楠柳小玲张杰董江涛梁粟王菊张辉丰启盈邹炙臻吴江东章乐吴芳张万江; 关键词：结核分枝杆菌生物信息学

一种结核杆菌PUP蛋白过表达菌株的制备及其应用: 本发明公开了一种构建结核杆菌类泛素样蛋白PUP过表达菌株的制备及其应用，培养BCG菌株并提取其基因组DNA。以BCG菌株基因组DNA为模板，PCR扩增结核杆菌Pup蛋白基因；测序、鉴定。以大肠杆菌‑结核分枝杆菌穿梭质粒p...; 张万江赵正涌吴芳吴江东张杰董江涛徐芳柳小玲梁粟王洪洲赵彦恒邵萌; 文献传递

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