刘鹏 作品数:21 被引量:34 H指数:4 供职机构: 郑州市第三人民医院 更多>> 发文基金: 河南省医学科技攻关计划项目 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
MiR-127-3p靶向MAPK4对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量:7 2020年 [目的]探讨miR-127-3p对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。[方法]通过RT-qPCR检测人葡萄膜黑色素瘤组织及细胞、正常组织及细胞中miR-127-3p与MAPK4mRNA的表达;通过Lipofectamine2000说明书将mimic-NC、miR-127-3pmimic、pc-MAPK4质粒分别或联合转染进入SP6.5或OM431细胞;通过双荧光素酶报告检测miR-127-3p与MAPK4复染靶向关系;通过CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白印迹法检测AKT/mTOR通路蛋白相对表达水平。[结果]在葡萄膜黑色素瘤组织和细胞系中,miR-127-3p表达明显下调(P<0.01),而MAPK4表达明显上调(P<0.01);miR-127-3p与MAPK43′UTR区存在结合位点,miR-127-3p高表达明显抑制了含有野生型MAPK4质粒的荧光素酶活性(P<0.01),但对突变型MAPK4质粒的荧光素酶活性无影响;与Control组相比,miR-127-3pmimic组SP6.5细胞和OM431细胞增殖均明显下降(P<0.01),凋亡率均明显增加(P<0.01),划痕闭合率均明显降低(P<0.01),每视野侵袭细胞数目均明显减少(P<0.01),p-AKT(T308)/AKT、p-mTORr(S473)/mTOR蛋白表达均明显下调(P<0.01),共转染pc-MAPK4逆转上述变化。[结论]M iR-127-3p通过靶向下调MAPK4来抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,这可能与抑制AKT/mTOR通路激活有关。 魏丽 连红梅 刘鹏 刘兴华 吴书一 刘萌萌关键词:葡萄膜黑色素瘤 增殖 迁移 富集有核细胞法制备肺癌胸腔积液细胞块中EGFR基因突变的检测 2021年 目的探讨富集有核细胞层沉淀法制备的非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLS)胸腔积液细胞沉渣块中的表皮生长因子受体(EGFR)基因的突变率。方法选取NSCLS伴恶性胸腔积液患者116例,应用富集有核细胞层沉淀法制备胸腔积液细胞沉渣块,并应用突变扩增阻滞系统(ARMS)法检测胸腔积液细胞沉渣块中的EGFR基因的突变情况。结果EGFR基因突变率为50.86%,其中腺癌突变率为57.83%,非腺癌突变率为33.33%。结论富集有核细胞层沉淀法制备的NSCLS胸腔积液细胞沉渣块中EGFR基因突变率高于传统的离心细胞沉渣法,有效提高了肿瘤细胞的获得率及DNA提取率,为肺癌患者的诊断、治疗及分子生物学检测提供了有效手段。 刘萌萌 孔天东 魏丽 刘鹏 刘兴华 乔森焱关键词:表皮生长因子受体基因 宫颈原发性腺肉瘤伴横纹肌肉瘤分化的临床病理分析 被引量:1 2015年 目的探讨宫颈原发性腺肉瘤伴横纹肌肉瘤分化的临床病理学特征。方法对1例发生于宫颈的腺肉瘤进行临床病理分析,并复习相关文献,讨论其临床病理特征及鉴别诊断。结果患者以发现宫颈赘生物为主要症状。镜下肿瘤由良性腺上皮成分和肉瘤性间质成分组成;腺体呈不规则分支状,间质肉瘤成分中可见横纹肌肉瘤成分。结论宫颈原发性腺肉瘤是一种极为罕见的肿瘤,诊断主要依靠组织形态学特征,需要与宫颈息肉、子宫内膜的腺肉瘤和胚胎性横纹肌肉瘤鉴别。 刘萌萌 李洪滢 魏丽 刘鹏关键词:腺肉瘤 横纹肌肉瘤 宫颈 胃肠间质瘤26例临床病理学特征 2015年 目的探讨胃肠间质瘤(GIST)的临床病理学特征。方法 26例胃肠间质瘤进行临床病理分析,讨论其临床病理特征。结果 26例GIST中21例位于胃,5例位于小肠。良性14例,恶性8例,未确定恶性潜能4例;梭形细胞型20例,上皮细胞型4例,混合细胞型2例。免疫组化:25例CD117(+),24例DOG1(+),19例CD34(+)。结论 GIST好发于中老年人,诊断主要依靠组织形态学特征和免疫组化,手术是重要和有效的治疗方法。 刘萌萌 闵志雪 魏丽 刘鹏关键词:胃肠间质瘤 病理学特征 P16与P53在子宫内膜浆液性腺癌与子宫内膜样腺癌鉴别诊断中的作用 被引量:2 2016年 目的探讨P16与P53在子宫浆液性腺癌与宫内膜样腺癌鉴别诊断中的作用。方法采用免疫组织化学检测P16和P53在子宫浆液性腺癌和宫内膜样腺癌中的表达。结果 P16灶性、片状(弱-中等强度)表达:6例于宫内膜样腺癌癌细胞胞核和胞浆,而在18例子宫浆液性腺癌中弥漫强表达表达,2例呈中等强度阳性,两者表达差异有统计学意义(χ2=26.61,P〈0.01)。P53局灶状(弱-中等强度)表达:7例在宫内膜样腺癌的癌细胞胞核,在18例子宫浆液性腺癌中弥漫强表达,两者表达差异有统计学意义(χ2=21.94,P〈0.01)。P16与P53呈强正相关(rs=0.687,P=0.001)。结论 P16与P53在子宫浆液性癌中的表达强于子宫宫内膜样腺癌,差异有统计学意义,P16与P53在两者的鉴别诊断中有重要价值,P16与P53在子宫浆液性腺癌中呈强的正相关,在其发生过程中起到了重要作用。 魏丽 刘鹏 刘萌萌 刘若慧关键词:子宫内膜样腺癌 P16 P53 NFATc1可能通过调节RhoA/ROCK信号通路影响乳腺癌细胞的增殖与凋亡 被引量:4 2020年 目的:检测NFATc1在乳腺癌患者癌及癌旁组织的表达,并探讨其表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法:收集于我院就诊的39例乳腺癌患者癌及癌旁组织,采用RT-PCR技术、免疫印迹及免疫组化染色技术检测NFATc1在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达状况。利用小干扰RNA(siRNA)构建NFATc1稳定敲除的MCF7及MDA-MB-231细胞系。利用CCK-8试剂盒及克隆形成实验检测NFATc1敲除对乳腺癌细胞增殖的影响,同时利用Ki67染色检测对照组和NFATc1敲除组乳腺癌细胞中Ki67阳性细胞的比例。此外,采用流式细胞学技术检测NFATc1基因敲除对乳腺癌细胞凋亡的影响,最后利用免疫印迹技术分析各组细胞RhoA/ROCK信号通路的表达状况。结果:NFATc1在乳腺癌患者癌组织中的mRNA及蛋白表达显著增高(P<0.05)。流式细胞学结果表明NFATc1 siRNA干预能够显著促进两组乳腺癌细胞系的凋亡(P<0.05)。此外,Ki67染色、CCK-8实验及克隆形成实验结果表明NFATc1敲除后两种乳腺癌细胞系的增殖能力明显下降(P<0.05)。免疫印迹结果揭示,NFATc1敲除能够明显抑制癌细胞中RhoA/ROCK信号通路的激活(P<0.05)。结论:NFATc1可能通过调控RhoA/ROCK信号通路进而促进乳腺癌细胞增殖,有望成为治疗乳腺癌的新靶点。 刘萌萌 魏丽 王轶娟 刘鹏 刘兴华 张明关键词:乳腺癌 增殖 凋亡 DAB显色后去黑色素法在免疫组化中的应用 被引量:5 2019年 在病理科的日常工作中,经常会遇到含有黑色素的组织,由于未经染色的黑色素呈棕褐色或深褐色的颗粒,特别是在免疫组化的诊断中,DAB的显色与黑色素的颜色相近,会影响免疫组化结果的判读。去除黑色素的方法有很多,文献报道比较常用的是高锰酸钾草酸法和过氧化氢脱色法[1],但两者均为强氧化剂,在先去除黑色素后再进行相关免疫组化染色时,对抗原有一定的损伤。为解决上述问题,本科室在DAB显色后再用强氧化剂去除黑色素既不破坏抗原又能把黑色素完全去除,得到了满意的效果,现报道如下。 刘兴华 刘鹏 刘萌萌 魏丽 刘若慧 张萌关键词:黑色素 氧化剂 DAB 免疫组织化学 基质金属蛋白酶基因突变与老年慢性阻塞性肺疾病发生风险的关系研究 被引量:4 2019年 目的:探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、MMP-7、MMP-12基因突变与老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)发生风险的相关性。方法:选取2017年11月至2019年4月,在本院就诊的108例COPD患者为COPD组,另选取同期门诊体检的80例健康体检者为对照组。采用聚合酶链式反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)法检测MMP-3基因rs679620位点、MMP-7基因rs11568818位点及MMP-12基因-1082位点的基因分型,比较不同基因型与老年COPD发生风险的关系。Hardy-Weinberg遗传平衡定律验证两组基因型频率是否具有代表性。收集老年COPD患者肺功能及疾病严重程度相关参数并分析其与各基因型的关系。采用Logistic回归法分析影响COPD发生风险的相关因素。结果:MMP-3基因rs679620位点G→A基因突变,MMP-7基因rs11568818位点A→G基因突变,MMP-12基因-1082位点A→G基因突变,各基因型分布均符合Hardy-Weinberg定律。COPD组与对照组MMP-3基因G、A等位基因突变频率分布比较差异无统计学意义(P>0.0167),MMP-7基因G、A等位基因突变频率显著高于对照组(P<0.0167),MMP-12基因G、A等位基因突变频率显著高于对照组(P<0.0167);携带MMP-3基因A突变基因、MMP-7基因G突变基因、MMP-12基因G突变基因的COPD患者吸烟指数、支气管壁厚度、支气管壁分级均分别显著高于GG基因型、AA基因型患者(P<0.05),而相邻动脉直径显著降低(P<0.05);Logistic分析显示MMP-3 AA、MMP-7 GG及MMP-12 GG突变基因型均为COPD发生的危险因素。结论:MMP-3、MMP-7、MMP-12基因突变可能与老年COPD发生有关,突变基因型AA(MMP-3)、GG(MMP-7)、GG(MMP-12)均可增加老年COPD发生风险。 刘萌萌 刘鹏 王蔚蔚 刘灵 乔森焱 李艳艳 魏丽 刘兴华 邹燕关键词:慢性阻塞性肺疾病 基质金属蛋白酶-3 基质金属蛋白酶-7 膀胱多形性巨细胞癌的临床病理特征分析 2016年 目的探讨膀胱多形性巨细胞癌的临床表现和病理学特征。方法应用HE染色及免疫组化法在光镜下观察5例膀胱多形性巨细胞癌标本,并收集分析其临床病理资料,结合文献进行分析。结果患者临床症状大多数表现为血尿、尿频、尿急、尿痛;肿瘤由多形性上皮样单个核细胞、多核瘤巨细胞及数量不等的普通型尿路上皮癌组成。瘤细胞呈乳头状、巢状、片状排列。免疫组化结果显示上皮样单个核细胞及多核瘤细胞弥漫表达细胞角蛋白7(CK7)(5/5)、细胞角蛋白20(CK20)(4/5)、P63(4/5)、上皮膜抗原(EMA)(4/5)及表皮生长因子受体-2(HER-2)(5/5),弱表达CK20(1/5)、P63(1/5)及S-100(2/5);增殖细胞抗原(Ki-67)阳性指数为30%~95%,突变型P53强阳性、阳性指数为20%~80%。随访5~13个月,2例复发转移,2例复发,1例死亡。结论膀胱多形性巨细胞癌是一种高级别尿路上皮癌,恶性程度高、预后不良,易复发、转移,确诊的主要依据是形态学及免疫组化检测,需与其他类型的膀胱癌进行鉴别。 魏丽 刘鹏 刘萌萌 屈彩霞口腔黏膜黑色素瘤临床病理学分析 2024年 目的探讨口腔黏膜黑色素瘤(OMM)的临床病理学特征、遗传学特征、诊断、鉴别诊断及预后相关性。方法收集2016年1月至2021年12月郑州市第三人民医院手术切除且病理明确诊断为OMM的病例共8例,采用免疫组织化学法检测相关蛋白,荧光定量聚合酶链法(PCR)及基因测序检测相关基因突变情况。结果男1例,女7例,年龄30~81岁。临床病损主体表现为口腔黏膜黑色肿物,肿瘤发生于牙龈者6例,上腭者1例,颊黏膜者1例,临床分期均为晚期黑色素瘤(Ⅲ期和Ⅳ期各4例)。镜下瘤细胞呈梭形、上皮样、小蓝圆细胞、透明细胞及多形性等多种形态学表现;8例均表达HMB45、S-100和Melan A蛋白,Ki-67阳性指数10%~60%。BRAF、c-kit、PDGFRa及NRAS基因检测结果显示2例出现NRAS第二外显子突变。随访至2022年1月31日,2例存活,6例死亡。结论OMM罕见,恶性程度高,病死率高,需做到早诊断、早治疗,避免漏诊及误诊。 魏丽 王轶娟 王艳 刘灵 乔森焱 刘兴华 刘鹏 梁宪斌 刘萌萌关键词:黑色素瘤 口腔黏膜 突变