方元龙
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 链尿佐菌素制备糖尿病神经源性膀胱大鼠模型被引量：3
- 2013年
- 目的对使用单次腹腔注射大剂量链尿佐菌素(STZ)制备糖尿病神经源性膀胱大鼠模型的方法进行探讨。方法使用随机分组的方法将30只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组(NC组)10只、糖尿病组(DM组)20只;给予糖尿病组大鼠单次腹腔注射链尿佐菌素(60 mg/kg),同时给予对照组大鼠相同剂量的柠檬酸钠缓冲液,3 d后测空腹血糖,血糖≥16.7 mmol/L大鼠入选为糖尿病组模型。后观察大鼠一般指标(精神、皮毛光泽度、血糖、体重、饮食量、饮水量等),8周时取出膀胱测残尿量、膀胱湿重、行HE染色。结果 3 d后糖尿病组大鼠糖尿病成模率达到90%,8周后血糖值稳定,糖尿病组膀胱HE染色有明显病理改变。DM组中糖尿病大鼠模型的糖尿病神经源性膀胱大鼠模型成模率为100%。结论通过单次大剂量腹腔注射链尿佐菌素(60 mg/kg)可快速制备稳定的糖尿病大鼠模型,且在此基础上诱导神经源性膀胱大鼠模型的成功率高,在8周时其成模率可达100%。是目前一种简便、快速获取稳定糖尿病神经源性性膀胱大鼠模型的方法。
- 方元龙周兴陈潮江刘杰郑煜
- 关键词：神经源性膀胱糖尿病链尿佐菌素大鼠模型
- 神经干细胞移植对大鼠糖尿病性膀胱神经生长因子表达影响的实验研究
- 实验目的：探讨神经干细胞移植治疗糖尿病大鼠膀胱功能障碍的疗效及NGF的表达情况研究。 实验方法： 1.采用悬浮法培养、收集NSCs，观察NSCs原代及传代细胞的形态、生长特点，并进行Nestin等免疫化学染色，鉴定是...
- 方元龙
- 关键词：神经干细胞移植糖尿病膀胱功能障碍神经生长因子动物模型发病机制
- 文献传递
- 人胎盘微血管内皮细胞的分离培养及鉴定被引量：3
- 2014年
- 背景:建立高纯度的人胎盘微血管内皮细胞体外培养体系对研究胎盘功能是十分必要的。目前,国内外研究多采用三步酶消化法结合免疫磁珠法分离胎盘微血管内皮细胞,然而步骤过于繁琐且对细胞损伤较大。因而,如何简化人胎盘微血管内皮细胞分离步骤,同时又能提高目标细胞纯度的体外培养方法成为研究热点。目的:探索一种简便高效的从早期绒毛组织中分离人胎盘微血管内皮细胞的体外培养方法,观察细胞生长状态并进行鉴定。方法:利用健康孕6-8周孕妇行人工流产后的绒毛组织,经两步酶消化法和非连续Percoll密度梯度离心得到人胎盘微血管内皮细胞,传代时利用胰酶消化法和反复贴壁法对细胞进行纯化。结果与结论:实验成功获取人胎盘微血管内皮细胞,原代培养的人胎盘微血管内皮细胞在培养24 h后基本完全贴壁,第10天进入对数生长期,第12至13天细胞浓度达80%,传代细胞较原代细胞生长活跃,培养5-7 d可长满培养瓶底,呈"铺路石样"排布。免疫荧光化学结果显示,培养的细胞中FⅧ因子与CD31相关抗原双荧光染色呈阳性,细胞阳性率达100%。MTT法测得培养第5代人胎盘微血管内皮细胞的生长曲线呈倒"S"形。结果证实,应用两步酶消化法、非连续Percoll密度梯度离心法分离细胞,并利用胰酶消化法和反复贴壁法纯化细胞,可获得大量高纯度的人胎盘微血管内皮细胞。
- 张慧丽杜培丽方元龙张镜何玉甜孙斌肖雪孙雯周燕媚陈敦金
- 关键词：细胞鉴定胰酶消化CD31MTT法
