方华
- 作品数：11 被引量：10H指数：2
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- 乙型肝炎患者病毒含量和血清标志物关系研究被引量：2
- 2004年
- 目的探讨乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒DNA定量与血清标志物的关系。方法采用荧光PCR定量法检测424例乙型肝炎患者血清中的DNA含量,与HBV血清标志物作对比研究。结果血清HBeAg阳性组中HBVDNA含量大于107拷贝/ml的占该组的60.34%,明显高于抗-HBe和抗-HBc阳性组中的12.09%和14.74%。而后两组HBVDNA检出率仍较高,分别为59.68%和63.24%。结论荧光定量PCR法检测HBVDNA具有高度特异性和灵敏度,且与HBeAg密切相关,能够准确反映病毒复制情况,从而为乙型肝炎患者临床治疗中药物选择及疗效观察提供直接依据。
- 方华胡志军高峰
- 关键词：乙型肝炎荧光定量乙型肝炎病毒标志物
- 定性、定量两种PCR方法检测HBVDNA的比较被引量：1
- 2005年
- 目的 评价定性量两种PCR方法检测HBV-M阳性乙型肝炎患者HBV DNA的灵敏度和特异性。方法 使用市售酶免试剂检测452例乙型肝炎患者HBV-M后,分别采用定性和荧光定量两种聚合酶链式反应方法检测其HBV DNA。结果 HBsAg和抗-HBc阳性组、HBsAg,抗-HBe和抗HBc阳性组、HBsAg和抗-HBe阳性组以及抗-HBs,抗HBe和抗-HBc阳性组定性、定量两种PCR HBV DNA检出率分别为65.00%和92.78%、65.75%和89.04%、26.44%和68.97%以及5.56%和11.11%。检测标准质粒,定量PCR灵敏度为1×103copies/ml,定性PCR为1×105copies/ml。结论 定量PCR在HBV-M阳性乙肝患者和灵敏度方面与定性PCR相比均有显著性差异。提示定量PCR可以替代定性PCR在临床工作中发挥更大作用。
- 方华程豪为贺春民陈洪涛
- 关键词：HBVHBVDNAPCR荧光定量
- 真核细胞DNA分子电镜图象及样品制备
- 2004年
- 胡志军方华
- 关键词：分子生物学
- 十年前河南地区302名献血员丙型肝炎病毒感染状况的研究
- 1997年
- 本文对十年前河南地区３０２名献血员的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）血清学指标进行了回顾性调查，结果抗－ＨＣＶ、抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ和ＨＣＶＲＮＡ检出阳性者分别为３例、１例、１例，阳性率各为０．９９％、０．３３％和０．３３％。男女献血员抗－ＨＣＶ检出率分别为１．１０％和０．８３％，差异无显著性意义（Ｐ＜０．０５）。其中１例抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ、ＨＣＶＲＮＡ均阳性，而抗－ＨＣＶ阴性，故ＨＣＶ总感染率为１．３２％。结果显示，十年前河南地区献血员与一般人群丙型肝炎病毒感染状况相似，感染率很低。
- 高峰金静张亚冰杨小昂方华金志宏
- 关键词：献血员丙型肝炎病毒血清学指标
- 丁型肝炎病毒重组抗原的制备及应用被引量：1
- 2004年
- 目的 :获得能够应用于丁型肝炎病毒 (HDV)酶免试剂的重组丁型肝炎病毒抗原。方法 :采用RT PCR自HDV感染急性期的土拨鼠肝脏扩增编码丁型肝炎病毒抗原的HDVcDNA ,插入质粒pET 3α ,转化大肠杆菌BL2 1,制备丁型肝炎病毒抗原表达菌株 ;对其表达蛋白的特异性、灵敏度、稳定性及活性进行鉴定 ;并将以该重组蛋白为主要原料制备的抗 HD酶免试剂与爱尔兰Noctech抗 HD试剂盒进行比较。结果 :重组质粒PED SHDAg和PED LHDAg经异丙基 硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达的 2种蛋白经SDS PAGE电泳后 ,WesternBlot检测显示均与抗 HD发生强烈反应。该表达蛋白对抗 HD阳性血清抑制率为 86 % ,37℃保存 7d稳定性良好 ,比活性为 1:80 0 0 ,检测抗 HD灵敏度与国外同类试剂盒结果一致。结论 :该重组丁型肝炎病毒抗原可用于抗 HD酶免试剂的制备。
- 高峰方华杨小昂金志宏
- 关键词：丁型肝炎病毒重组抗原
- 丁型肝炎系列酶免诊断试剂的研制及应用
- 1998年
- 为解决丁型肝炎诊断试剂短缺的问题，本研究采用实验感染ＨＤＶ的土拨鼠肝脏和丁型肝炎病人血清，提取纯化丁型肝炎病毒抗原和抗体，制备了检测ＨＤＡｇ、抗－ＨＤ、ＩｇＭ抗－ＨＤ的系列酶免诊断试剂。该试剂与进口同类试剂相比较，符合率达１００％。其特异性好，灵敏度较高。对不同类型乙型肝炎病人血清检测，ＨＤＡｇ、抗－ＨＤ及ＩｇＭ抗－ＨＤ阳性率和总阳性率分别为２．９９％、３．３６％、３．７３％和７．２８％。该试剂的研制为丁型肝炎病毒感染的临床诊断及流行病学研究提供了可靠的实验手段。
- 杨小昂金志宏张亚冰方华高峰金静秦定一
- 关键词：丁型肝炎HDV
- 丁型肝炎抗原诊断试剂的制备研究
- 1996年
- 采用从丁型肝炎患者血清中提取高效价的丁型肝炎抗体（抗－ＨＤ）及辣根过氧化物酶标法，制备丁型肝炎抗原（ＨＤＡｇ）诊断试剂，并对２２２例慢性乙型肝炎患者血清进行了检测。结果：本试剂与爱尔兰抗原试剂特异性比较无显著差异；抗体中和抑制率抗－ＨＤ为６９％～８５％，抗－ＨＢｃ为２４％～３３％，重复１０次检测其ＯＤ值的变异无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；患者血清检测２２２例中，ＨＤＡｇ６例，阳性率为２．７％。提示：使用试剂操作简便，诊断快速，重复性好；其特异、敏感性与进口爱尔兰同类试剂比较结果基本一致。
- 方华杨小昂金静秦定一路浩高峰金志宏
- 关键词：抗原丁型肝炎诊断试剂
- HDV重组抗原的测定及与其它抗原的比较
- 2002年
- [目的]为了研究重组HDV抗原的性质及与其它HDV抗原的差别。[方法]本文用ELISA方法对重组HDAg进行了测定,并与肝脏提取的HDAg及美国HDAg进行了比较实验。[结果]重组HDAg能与抗-HD特异性结合,中和抑制试验平均抑制率为86％,该抗原在37℃放置1～7d稳定性良好。[结论]三种抗原对抗-HD阳性血清和HBsAg阳性血清的检测结果一致,表明基因重组 HDAg可以替代诊断试剂中的其他HDV抗原。
- 杨小昂高峰方华职慧军金志宏
- 关键词：丁型肝炎病毒重组抗原
- 丁型肝炎IgM抗体检测方法的建立和应用
- 1996年
- 本文根据ＥＬＩＳＡ抗体捕获法的原理，采用抗人ＩｇＭ单克隆抗体和丁型肝炎抗原等，建立了特异性强、灵敏度高的ＩｇＭ抗－ＨＤ检测方法。对１４２例病人血清检测，ＩｇＭ抗－ＨＤ阳性率为４．９％。为丁型肝炎的早期诊断和流行病学研究提供了实验手段。
- 杨小昂金志宏方华张亚冰金静
- 关键词：丁型肝炎免疫球蛋白M抗体
- 急性散发性戊型肝炎患者血清抗体的检测及其动态变化被引量：5
- 1999年
- 本文对31例急性散发性成型肝炎患者血清IgM型和IgG型抗体进行检测并对部分患者进行动态观察显示：发病后10天IgM抗-HEV阳性率为51．6％，3个月时为0；IgG抗-HEV1月时阳性率为100％，6个月时仍有47．1％的患者阳性。其中2例患者发病后5年IgG抗-HEV仍1：20阳性，但较发病初期下降了160倍。结果提示：诊断HEV感染IgM抗-HEV是特异性指标，IgG抗-HEV则具有高度灵敏性；同时，IgG抗HEV可在少数患者血清中低效价长期存在。
- 高峰杨小昂方华金志宏
- 关键词：戊型肝炎血清抗体
