- TGF-β1/Smad与PIKKs/Akt信号通路在紫外线致日光性角化病向鳞癌转化机制研究
- 第一部分紫外线照射SKH-1无毛鼠构建日光性角化病和鳞癌模型目的:紫外线照射可诱导日光性角化病(AK)发生及向鳞状细胞癌(SCC)进展,PIKKs/Akt信号通路参与多种肿瘤发生,可能在紫外线诱导SCC形成中亦发挥重要作...
- 张娟
- 关键词：鳞状细胞癌日光性角化病紫外线TGF-Β1/SMAD
- 文献传递
- 外泌体在Ⅲ型登革病毒感染THP-1细胞中的作用研究
- [目的]外泌体是多囊体（MVBS）与细胞质膜融合后释放的胞外小泡,它们起源于MVB形成过程中的腔内囊泡（ILVS）。外泌体被证明含有功能蛋白、脂质和RNA,介导细胞与细胞之间的通讯,从而在健康和疾病的有机体的生理学中发挥...
- 张娟
- 关键词：外泌体登革病毒THP-1细胞病毒传播MIRNA
- 文献传递
- LEEP术与CKC术治疗宫颈上皮内瘤变临床分析
- 目的：比较宫颈环形电切术(loop electrosurgical excision procedure,LEEP)与冷刀锥切术(cold knife conization,CKC)治疗宫颈上皮内瘤变效果,以期探讨两种治...
- 张娟
- 关键词：宫颈上皮内瘤变宫颈环形电切术冷刀锥切术
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白标记的BHK-21细胞源性外泌体的构建及鉴定
- 2022年
- 目的构建稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和外泌体标志蛋白CD63的BHK-21细胞,获得GFP标记的BHK-21源性的外泌体。方法将慢病毒表达质粒pCT-CD63-GFP与辅助质粒pVS-VG(Env)和pSPAX(structure)共转染293T细胞,包装重组慢病毒,测定病毒滴度后感染BHK-21细胞,72 h后用嘌呤霉素筛选稳定表达GFP的细胞。Western blot检测BHK-21细胞中CD63的表达量。取其无外泌体血清培养36 h的稳定转染株细胞上清,获得提取物,经Western blot、透射电镜及粒径分析进行鉴定。将提纯的外泌体与受体细胞BHK-21共培养6 h后,观察外泌体在细胞中的摄取情况。通过Transwell试验检测登革病毒(Dengue virus,DENV)感染后细胞外泌体分泌量的变化。结果筛选出可稳定表达GFP的BHK-21细胞株,并从细胞上清中提取了外泌体。外泌体存在特异性标志蛋白CD63和CD81;透射电镜下,外泌体呈椭圆形,具有双凹圆盘状膜结构,直径在30~200 nm之间;纳米颗粒示踪分析显示,外泌体在110.2 nm处有峰值;荧光显微镜下可见提纯的外泌体发出强烈的绿色荧光信号。提纯的外泌体与受体细胞BHK-21共培养6 h后,可在BHK-21细胞质内见到大量绿色荧光颗粒。Transwell试验发现,DENV感染后,可促进细胞释放外泌体。结论成功构建了携带GFP标记的BHK-21源性外泌体,为研究外泌体在病毒感染细胞中的信号传递提供了工具。
- 张娟鲁明朱海莲何丽存顾冉李代英陈俊英陈俊英孙强明
- 关键词：外泌体绿色荧光蛋白登革病毒
- 背阔肌肌皮瓣和股前外侧皮瓣游离移植修复头皮鳞状细胞癌术后创面的效果观察被引量：9
- 2021年
- 目的观察背阔肌肌皮瓣和股前外侧皮瓣游离移植修复头皮鳞状细胞癌(鳞癌)切除后创面的效果,探讨两种皮瓣的适应证。方法回顾性分析2013年6月至2019年5月昆明医科大学第二附属医院整形外科收治的头皮鳞癌患者的临床资料,所有患者经CT检查,未见癌转移,未合并高血压、糖尿病等全身性疾病,无血管疾病,实施肿瘤扩大切除后创面采用背阔肌肌皮瓣或股前外侧皮瓣游离移植修复。对2种皮瓣的术中血管变异情况,吻合血管直径,血管蒂的长度,皮瓣切取面积、切取时间,吻合血管时间,手术时间,供区和受区并发症发生情况进行测量或记录。结果共纳入21例病例,男14例,女7例,年龄12~61岁。其中11例采用背阔肌肌皮瓣游离移植修复,10例用股前外侧皮瓣游离移植修复。随访1~2年,21例皮瓣全部成活。背阔肌肌皮瓣组无血管变异病例,而股前外侧皮瓣组有2例血管变异。背阔肌肌皮瓣组吻合动脉血管直径为(2.14±0.09)mm,静脉为(2.49±0.10)mm;血管蒂的长度为(6.14±0.28)cm;皮瓣切取面积(135.0±20.8)cm^(2)、切取时间(114.8±3.0)min;吻合血管时间(20.8±0.8)min;手术时间(6.5±0.2)h。股前外侧皮瓣组吻合动脉血管直径为(2.15±0.14)mm,静脉为(2.45±0.15)mm;血管蒂的长度(6.80±0.31)cm;皮瓣切取面积(159.9±16.4)cm^(2)、切取时间(119.8±3.6)min;吻合血管时间(21.5±0.9)min;手术时间(6.9±0.2)h。2种皮瓣手术中各项指标无明显差别。背阔肌肌皮瓣组供区总体并发症发生(7例)较股前外侧皮瓣组(4例)多;受区总体并发症发生(1例)较股前外侧皮瓣组(2例)少。结论背阔肌肌皮瓣和股前外侧皮瓣修复头皮鳞癌切除后创面均能取得良好效果。背阔肌肌皮瓣血管恒定,手术相对简单、风险低,更适合初学者;股前外侧皮瓣较薄,供区并发症发生少,患者易接受,并可在仰卧位下完成手术操作,更适合老年患者。
- 杨晓敏何永静何永静张娟吕乐春朱礼昆张威樊荣王鹏
- 关键词：游离组织瓣股前外侧皮瓣
- 宫颈管搔刮术在宫颈癌筛查中的价值被引量：7
- 2021年
- 目的探讨阴道镜下宫颈管搔刮术(ECC)在检出宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及以上病变的价值。方法对2018年6月至2020年6月在昆明医科大学第一附属医院妇科门诊筛查的1104例妇女行宫颈薄层液基细胞学检查(TCT)、人乳头瘤病毒检测(HPV)、阴道镜检查、宫颈活检及ECC的临床资料进行统计学分析。结果(1)ECC对于宫颈LSIL及以上病变的检出率为18.75%(207/1104),额外检出率为8.82%(60/680);(2)单因素分析发现:妇女的年龄(P<0.001)、细胞学异常情况(P<0.001)、HPV16/18型感染情况(P<0.001)、阴道镜满意率(P<0.001)、宫颈活检病理情况(P<0.001)与ECC对于宫颈LSIL及以上病变的检出率比较,差异有统计学意义(P<0.001);(3)多因素回归分析发现,ECC对于宫颈LSIL及以上病变的检出率与年龄(P=0.017)、细胞学异常情况(P<0.001)、HPV16/18型感染情况(P<0.001)、阴道镜满意否(P<0.001)以及宫颈活检病理情况(P<0.001)相关。结论在充分阴道镜检查下宫颈多点活检及ECC可提高宫颈LSIL及以上病变的检出率,起到宫颈上皮内病变及宫颈癌早诊断早治疗的作用,但ECC作用有限,建议对细胞学异常尤其高级别异常者、HPV16/18型感染者、阴道镜不满意者、宫颈高级别病变者及年龄较大者行ECC,可以额外增加宫颈病变检出。
- 张娟张红芸
- 关键词：宫颈管搔刮术宫颈癌宫颈上皮内病变
- 抗-EMMPRIN单克隆抗体在抑制人舌鳞癌侵袭作用中的实验研究
- 目的：本研究通过抗-EMMPRIN单克隆抗体、基质金属蛋白酶抑制剂多西环素及抗-EMMPRIN单克隆抗体与多西环素联合应用分别观察对人舌鳞癌Tca8113细胞及裸鼠移植瘤的抑制作用,从而探索阻断肿瘤侵袭的机制,为治疗口腔...
- 张娟
- 关键词：EMMPRINMMPS舌鳞癌
- 文献传递
- 紫外线诱导SKH-1无毛小鼠皮肤鳞癌模型的构建及DNA-PKcs在小鼠及成人皮肤组织的表达被引量：4
- 2019年
- 目的紫外线照射SKH-1小鼠构建皮肤鳞状细胞癌动物模型,探讨紫外线诱发皮肤SCC发生及AK向SCC转化过程中DNA-PKcs-m TORC2/Akt信号转导通路的DNA-PKcs活化水平。方法将43只SKH-l无毛小鼠随机分成实验组(33只)和对照组(10只)。实验组采用SUV-1000日光模拟器模拟日光照射SKH-1无毛鼠,对照组不做任何处理。在第12、18、24、28周分别处死小鼠行皮肤组织病理检查。28周取同一只小鼠背部不同皮损行组织病理检查和免疫组化检测。收集成人日光性角化病(AK)、皮肤鳞状细胞癌(SCC)、正常避光部位(NNS)、正常曝光部位(NES)皮肤组织各5例,进行后续Western Blot验证。结果 12周后实验组部分小鼠背部皮肤增厚,皮棘隆起;17周开始实验组小鼠背部皮肤陆续出现直径≥l mm的丘疹;照射28周后成瘤率达100%;对照组未见肿瘤形成。DNA-PKcs和p-DNA-PKcs (T2609)均细胞定位于细胞质和细胞核,小鼠表皮组织中DNA-PKcs表达含量增加,统计学分析有差异(P<0.05),而p-DNA-PKcs(T2609)无差异(P>0.05)。人表皮组织中DNA-PKcs和p-DNA-PKcs(T2609)表达含量均增加且有统计学分析差异(P<0.05)。结论成功制备小鼠AK模型和SCC模型;明确了紫外线诱导皮肤鳞状细胞癌的过程中,可诱发DNA损伤及修复等过程。
- 姜慧张娟徐丹何黎
- 关键词：紫外线皮肤鳞状细胞癌日光性角化病疾病模型DNA-PKCS
- 小檗碱对皮肤鳞状细胞癌裸鼠模型的抑制作用及其机制研究被引量：2
- 2020年
- 目的研究小檗碱对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)-A431裸鼠移植瘤的体积、重量、细胞增殖及凋亡的影响,探索小檗碱抑制cSCC的可能机制。方法培养A431细胞,于20只裸鼠背部皮下注射A431细胞悬液建立cSCC移植瘤裸鼠模型。接种第15天,将荷瘤裸鼠随机平均分为4组:低、中、高剂量组裸鼠腹腔分别注射10、20、25 mg/kg小檗碱溶液,对照组腹腔注射生理氯化钠溶液,每日1次,连续给药35 d。分别于给药前、给药第7、14、21、28、35天检测移植瘤体积。实验结束后,处死裸鼠并随即剥离瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率。移植瘤行组织病理检查,免疫组化检测Ki67表达水平,TUNNEL染色检测移植瘤组织中凋亡细胞数,荧光定量PCR和Western印迹法分别检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和Ezrin mRNA和蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析,各组与对照组比较采用Dunnett-t检验。结果随小檗碱剂量升高和作用时间延长,肿瘤生长曲线逐渐变平缓,各小檗碱组肿瘤生长受到不同程度的抑制,其中高剂量组肿瘤生长抑制作用最明显。小檗碱低、中、高剂量组肿瘤生长抑制率分别为31.05%、66.68%、76.49%,瘤重均显著低于对照组(t=4.07、6.33、7.26,均P<0.01)。移植瘤组织病理检查显示,随小檗碱剂量的增加,肿瘤细胞坏死程度和范围增加。免疫组化显示,随小檗碱剂量的增加,Ki67阳性细胞逐渐减少。此外,低、中、高剂量组Ki67阳性细胞数均显著低于对照组(均P<0.01),而凋亡细胞数均显著高于对照组(P<0.05或<0.01)。4组Bax、Bcl-2、caspase-3、Ezrin mRNA及蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.01)。其中,小檗碱低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA的表达均显著低于对照组(均P<0.01),中、高剂量组Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(均P<0.01);高剂量组Bax mRNA及中、高剂量组caspase-3 mRNA的表达均显著高于对照组(P<0.05或<0.01),而低、中、高剂量组Bax、c
- 邢天娇李东霞张娟贾敏鑫
- 关键词：鳞状细胞小檗碱疾病模型A431细胞
- 盆腔器官脱垂患者焦虑、抑郁及生活质量测定量表最小临床重要性差值计算的临床意义被引量：3
- 2022年
- 目的探讨手术治疗前后中重度盆腔器官脱垂(POP)患者的汉密顿焦虑量表(HAMA)、汉密顿抑郁量表(HAMD)和盆底功能障碍问卷简表-20(PFDI-20)及其分量表的最小临床重要性差值(MCID)。方法对113例中重度POP患者手术治疗前后HAMA、HAMD及PFDI-20量表进行评估,采用分布法计算HAMA、HAMD、PFDI-20及其分量表的MCID,并根据SPSS模拟结果选择量表的MCID并进行分析。结果中重度POP患者手术治疗前后焦虑测定量表HAMA的MCID为3.91,抑郁测定量表HAMD的MCID为2.25,生活质量测定量表PFDI-20及分量表POPDI-6、CRADI-8、UDI-6的MCID分别为81.70、24.79、8.69和34.50。结论POP患者手术治疗前后的HAMA、HAMD、PFDI-20及分量表评分变化值超过其MCID,差异具有临床意义。
- 熊正花胡勇张娟李晨李志红卢绍波龙熙翠韩雪松
- 关键词：盆腔器官脱垂汉密顿焦虑量表汉密顿抑郁量表
