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LncRNA DBCCR1-003介导DNMT1影响膀胱移行细胞癌发生与进展的分子机制: 长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200nt的转录产物，其在癌症的发生、发展中发挥重要作用。我们前期研究发现在膀胱癌中来源于甲基化调控抑癌基因DBCCR1的lncRNA DBCCR1-003表达低下且与DNA...; 戚德峰李锦辉胡渊苏甲林曾国华; 关键词：膀胱移行细胞癌

热疗通过抑制Ku80的表达诱导肾癌786-O细胞凋亡: 近年来，热疗作为一种抗癌方法已经越来越受到关注。一些研究已经证实热疗能够杀死肿瘤细胞通过诱导其凋亡。然而，热疗诱导凋亡潜在的分子机制目前仍然不是很清楚。　　目的：研究热疗对肾癌786-O细胞凋亡的影响及其分子机制。　　方...; 胡渊; 关键词：肾癌细胞周期发热疗法; 文献传递

分泌包载ANXA2-MS2 RNA外泌体的稳转细胞株的构建: 2023年; 目的:基于MCP-MS2示踪系统构建能稳定分泌含有标签的膜联蛋白A2(ANXA2)RNA的外泌体的供体细胞株。方法:利用慢病毒载体构建稳定表达MCP-EGFP的HEK293细胞株,采用流式细胞技术筛选具有较好荧光特性的单克隆细胞株。然后再次通过慢病毒稳定表达系统构建出能分泌结合有MCP-EGFP标记的ANXA2 RNA外泌体的供体细胞株。通过透射电镜、NTA、NanoFCM、共聚焦显微镜等仪器对供体细胞所产生的外泌体进行表征。结果:通过慢病毒载体成功构建了MCP-EGFP稳定表达细胞株,然后利用该细胞株通过慢病毒载体成功导入含有MS2标签的ANXA2基因。实验结果表明,构建的供体细胞与正常细胞所分泌的外泌体形态相似,实实施时荧光定量PCR的结果显示分泌的外泌体中含有MS2特殊序列,而同时Western blot的结果显示分泌的外泌体中含有EGFP蛋白。结论:通过慢病毒法成功建立了能分泌含有MS2标记的ANXA2 RNA的外泌体供体细胞株,为高效、稳定的装载特定RNA外泌体的供体细胞株的构建提供了新的方法和理论基础。; 胡萌胡渊廖柳房岳旖旎肖霞刘特思朱光; 关键词：外泌体慢病毒载体

Ku80基因RNAi逆转录病毒载体的构建及稳定转染人肾癌786-O细胞株的建立: 2013年; 目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株。方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定。筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆。用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Western blot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株。结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低。结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础。; 戚德峰胡渊曾国华纪卫东; 关键词：KU80 逆转录病毒载体肾肿瘤

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胡渊