李锦辉
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学矿业工程更多>>
- 脐尿管囊肿3D腹腔镜治疗的诊疗体会
- 戚德峰张朝枫李锦辉钟东亮刘冠炤
- 建立CRISPR/Cas9慢病毒系统高效敲除人源AIP1基因被引量：4
- 2015年
- 旨在构建AIP1基因CRISPR/Cas9敲除体系,获得高效、稳定、永久性AIP1敲除的人胚肾细胞株(293T)。针对AIP1的外显子设计3个20 bp的sg RNA(sp1、sp2和sp3)。与PX458载体连接,构建PX458-sg RNA敲除表达载体。T7E1实验评估敲除效率。将敲除效率最高的sg RNA与lenti CRISPRv2慢病毒载体连接,构建lenti CRISPRv2-sg RNA敲除表达载体,将阳性重组质粒导入病毒包装细胞293T中,收集病毒上清液转染293T细胞。对敲除成功的293T细胞通过有限稀释法构建敲除AIP1基因的稳定细胞株。Western blot测定转染后293T细胞中AIP1蛋白的表达量。结果显示,测序证实AIP1的3个靶序列分别正确插入PX458表达载体中,T7E1实验证实AIP1sg RNAsp2靶向敲除效率最高;成功构建lenti CRISPRv2-sg RNAsp2 AIP1敲除表达载体,并包装病毒,感染293T细胞;Western blot证实获得稳定的AIP1基因表达缺失的293T细胞株。建立了能稳定敲除AIP1基因的CRISPR/Cas9慢病毒系统,成功获得AIP1敲除的293T稳定细胞株。
- 苏甲林阙彪张继勤李锦辉王敏纪卫东
- 关键词：慢病毒
- “石癌”的PCN诊疗策略
- 戚德峰张朝枫李锦辉钟东亮刘冠炤单炽昌
- LncRNA DBCCR1-003介导DNMT1影响膀胱移行细胞癌发生与进展的分子机制
- 长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200nt的转录产物，其在癌症的发生、发展中发挥重要作用。我们前期研究发现在膀胱癌中来源于甲基化调控抑癌基因DBCCR1的lncRNA DBCCR1-003表达低下且与DNA...
- 戚德峰李锦辉胡渊苏甲林曾国华
- 关键词：膀胱移行细胞癌
- 长链非编码RNA DBCCR1-003在膀胱癌中介导DNMT1调控DBCCR1的表达
- 近些年来，一类长度超过200个核苷酸的长链非编码RNA（lncRNA）开始受到人们的关注。DBCCR1-003作为一个来源于抑癌基因DBCCR1(膀胱癌染色体缺失候选区域1)的lncRNA，其功能尚不明确。 目的： ...
- 李锦辉
- 关键词：膀胱癌基因调控长链非编码RNA
