王敏
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 建立CRISPR/Cas9慢病毒系统高效敲除人源AIP1基因被引量：4
- 2015年
- 旨在构建AIP1基因CRISPR/Cas9敲除体系,获得高效、稳定、永久性AIP1敲除的人胚肾细胞株(293T)。针对AIP1的外显子设计3个20 bp的sg RNA(sp1、sp2和sp3)。与PX458载体连接,构建PX458-sg RNA敲除表达载体。T7E1实验评估敲除效率。将敲除效率最高的sg RNA与lenti CRISPRv2慢病毒载体连接,构建lenti CRISPRv2-sg RNA敲除表达载体,将阳性重组质粒导入病毒包装细胞293T中,收集病毒上清液转染293T细胞。对敲除成功的293T细胞通过有限稀释法构建敲除AIP1基因的稳定细胞株。Western blot测定转染后293T细胞中AIP1蛋白的表达量。结果显示,测序证实AIP1的3个靶序列分别正确插入PX458表达载体中,T7E1实验证实AIP1sg RNAsp2靶向敲除效率最高;成功构建lenti CRISPRv2-sg RNAsp2 AIP1敲除表达载体,并包装病毒,感染293T细胞;Western blot证实获得稳定的AIP1基因表达缺失的293T细胞株。建立了能稳定敲除AIP1基因的CRISPR/Cas9慢病毒系统,成功获得AIP1敲除的293T稳定细胞株。
- 苏甲林阙彪张继勤李锦辉王敏纪卫东
- 关键词：慢病毒
- AIP1与心血管系统炎性反应被引量：1
- 2014年
- AIP1(apoptosis signal-regulating kinase1-interacting protein-1)是Ras-鸟苷三磷酸酶激活蛋白(Ras-GAP)家族的新成员。近年来研究表明,AIP1不仅能作为肿瘤抑制基因抑制肿瘤发生发展,还能通过多种信号通路参与调控心血管系统的炎性反应。本文重点回顾AIP1在血管内皮细胞炎性反应中介导的多种信号通路,分析AIP1在炎性诱导的新生血管及动脉粥样硬化中的调节作用及机制,为进一步全面研究AIP1在心血管系统中的调节功能提供参考。
- 张继勤周焕娇纪卫东王敏
- 关键词：血管炎性反应信号通路
