马红梅
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金广东省自然科学基金广东省中医药局建设中医药强省科研课题更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立被引量:1
- 2010年
- 目的建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1(MTH1)基因表达的半定量RT-PCR体系。方法细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量。条带经ScionImmage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达。结果扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50ng总RNA中检出目的基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为(2.02±0.09,n=10),CV值为4.31%。结论本方法的准确性、重复性和灵敏度均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内MTH1 mRNA表达量。
- 马红梅谢显功刘海燕刘彦明肖洪广李宁范婷婷郑君德
- 关键词:RT-PCRMDCK
- 甲型H1N1流感病毒致宿主细胞氧化损伤机制的研究
- 流感病毒感染是严重威胁人类健康的最常见的原因之一。1930年R.E.Shope成功的用病猪呼吸道过滤液感染雪貂,分离出了猪流感病毒[1]。1933年Smith等人将首次从人体中分离到的病毒称甲型流感病毒[2]。历史上第一...
- 马红梅
- 关键词:甲型H1N1流感病毒RT-PCR基因表达
- 文献传递
- 流感病毒H1N1感染后宿主细胞MTH1基因表达的研究被引量:1
- 2011年
- 目的观察H1N1型流感病毒诱导的MDCK细胞抗氧化相关修复基因MTH1表达量的变化。方法 MDCK细胞培养后,H1N1型流感病毒感染0、1、3、6、12、24、48h,在各时间点经RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的相对表达量。结果甲型H1N1流感病毒感染后0、6、12h,MTH1基因的表达量与正常对照组差异无统计学意义;感染后1、3hMTH1基因的表达量显著高于正常对照组;感染后24、48h表达量显著低于正常对照组。结论 H1N1流感病毒感染细胞的MTH1基因表达的增加,可能增加细胞对DNA氧化损伤的修复能力,在流感发生和防御机制中起到作用。
- 马红梅郑君德肖洪广刘彦明蒋月婷李伟强罗嘉莉曹顺旺
- 关键词:甲型H1N1流感病毒RT-PCR基因表达
- OGG1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立被引量:1
- 2013年
- 目的培养的犬肾细胞(MDCK)内8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)基因表达的半定量RT-PCR检测体系的建立。方法培养MDCK细胞后提取总RNA,经优化进行RT-PCR反应,检测细胞内OGG1基因的表达。扩增产物经测序同GenBank中OGG1基因序列比对验证产物的准确性,条带经Image J软件分析并与内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)相比,对体系的重复性进行分析。结果扩增产物证实与GenBank中该细胞的OGG1基因序列一致;重复性测定发现,MDCK细胞OGG1与GAPDH灰度值比值的均值为(0.84±0.025),CV值为2.99%。结论本方法的准确性、重复性均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内OGG1 mRNA的表达量。
- 马红梅肖洪广李伟强
- 关键词:RT-PCR基因表达