郝秀萍
- 作品数：13 被引量：36H指数：4
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- 两个γTrp208Leu杂合突变导致的遗传性低纤维蛋白原血症家系表型和基因型分析被引量：5
- 2015年
- 目的:对由同一突变位点导致的两个遗传性低纤维蛋白原血症家系进行临床表型和基因型分析,探讨其分子发病机制。方法:检测两个家系所有成员的血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤溶酶原活性(PLG:C)和纤维蛋白(原)降解产物(FDPs),分别采用Clauss法与免疫比浊法测定血浆纤维蛋白原活性(Fg:C)和抗原(Fg:Ag)水平。提取DNA,PCR扩增Fg的FGA、FGB和FGG基因所有外显子和侧翼序列,PCR产物纯化后测序进行基因分析。采用Swiss-Model和PIC软件对突变位点进行蛋白模型和氨基酸相互作用的分析。结果:两家系先证者PT、APTT以及纤溶指标(PLG:C和FDPs)均在正常范围内,TT轻度延长;Fg:C明显降低,分别为0.49 g/L和0.63 g/L;Fg:Ag同步下降,分别为0.64 g/L和0.77g/L。先证者A的奶奶和父亲,先证者B的母亲、阿姨和表弟,Fg:C和Fg:Ag均有不同程度降低。基因分析发现2例先证者FGG基因第7号外显子5792位发生G>T杂合错义突变,导致FgγD结构域的208位色氨酸突变为亮氨酸(γTrp208Leu)。模型分析显示γTrp208Leu突变破坏了Trp208与Thr314间的天然氢键连接,并使该位点氨基酸侧链变短,空间构型改变,使突变蛋白稳定性下降。结论:纤维蛋白原FGG基因γTrp208Leu杂合错义突变是导致该两个遗传性低纤维蛋白原血症的原因。
- 杨丽红郝秀萍丁红香金艳慧江明华王明山
- 关键词：纤维蛋白原突变杂合子
- 两例遗传性抗凝血酶缺陷症家系表型与基因分析
- 目的:对两个遗传性抗凝血酶(antithrombin,AT)缺陷症家系进行表型诊断和基因分析,探讨其分子发病机制。方法:检测凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、抗凝血酶活性(antithrombi...
- 郝秀萍金艳慧程晓丽杨丽红朱丽青王明山
- 关键词：基因突变血栓形成
- 文献传递
- 两个遗传性抗凝血酶缺陷症家系的表型与基因突变分析被引量：4
- 2016年
- 目的对两个遗传性抗凝血酶（antithrombin，AT）缺陷症家系进行表型诊断和基因分析，探讨其分子发病机制。方法检测2例先证者及其家系成员凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、抗凝血酶活性（antithrombinactivity，AT：A）、抗凝血酶抗原（antithrombinantigen，AT：Ag）、蛋白C活性及蛋白S活性等指标以明确诊断。提取外周血基因组DNA，PCR扩增AT基因全部外显子、侧翼及5′、3′非编码区，PCR产物经纯化后直接测序，寻找基因异常位点，并通过反向测序及银染色进行验证。借助生物信息学软件辅助分析突变对蛋白的影响。结果先证者1的AT：Ag正常但AT：A降低至30％，其大儿子、小儿子、小女儿AT：A在正常值的50％左右;AT基因第2外显子和第5外显子分别存在杂合错义突变c．235C〉T（P．Arg47Cys）和两个多态性位点（c．981G〉A、c．1011G〉A），同样突变也见于其大儿子、小儿子和小女儿。先证者2的AT：A、AT：Ag分别为39％和103mg／L，其父亲为57％和114mg／L，均明显低于正常对照；AT基因第3外显子发生杂合缺失突变g．5890—5892delctt，导致P．Phe121丢失，其父亲亦携带该突变位点。SIFT和PolyPhen-2程序对C．235C〉T分析表明，错义突变Arg47Cys会对AT蛋白功能产生影响；spdbv软件和PIC程序对g．5890—5892delCTT分析显示，缺失突变导致Phe121与Ala124、Lys125的氢键连接以及与Lys125、Arg47的阳离子-π作用力消失，从而影响蛋白稳定性。结论先证者1表现为Ⅱ型AT缺陷，先证者2表现为Ⅰ型AT缺陷；两例先证者抗凝血酶水平可能与错义突变P．Arg47Cys及缺失突变g．5890-5892delCTT有关。
- 郝秀萍金艳慧程晓丽杨丽红朱丽青王明山
- 关键词：基因突变血栓形成
- 一种新的FⅫ基因杂合突变导致的遗传性F Ⅻ缺陷症家系分析
- 目的对一个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factorⅫ,FⅫ)缺陷症家系进行基因突变检测,探讨其参与的分子发病机制。方法检测先证者及其家系共3代6名成员的活化部分凝血活酶时间(activated partia...
- 杨丽红郝秀萍王莹宇谢海啸金艳慧王明山
- 关键词：家系
- 文献传递
- 一种新的导致遗传性低纤维蛋白原血症FGG基因突变分析
- 目的对一例遗传性低纤维蛋白原血症患者及其家系进行基因分析,探讨其分子发病机制。方法用STA-R全自动血凝分析仪检测先证者及其家系成员(共3代8人)的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶...
- 王莹宇郝秀萍朱丽青杨丽红金艳慧王明山
- 关键词：聚合酶链反应基因突变模型分析
- 文献传递
- 一例遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症患者表型诊断及基因分析被引量：12
- 2017年
- 目的:对1例遗传性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺陷症患者及其家系成员进行表型诊断和基因分析,探讨其发病的分子机制。方法:检测先证者及其家系成员(共3代8人)的血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、凝血因子Ⅺ促凝活性(FⅪ:C)及凝血因子Ⅺ抗原含量(FⅪ:Ag)等指标以明确诊断;聚合酶链式反应(PCR)扩增FⅪ基因的所有外显子和侧翼序列,扩增产物纯化后直接测序,发现突变位点则反向测序予以证实;用Py MOL Viewer1.5.x软件构建野生型和突变型FⅪ蛋白模型,比对分析寻找突变前后空间构象及分子间作用力的变化。结果:先证者和其弟弟APTT、FⅪ:C、FⅪ:Ag均明显异常,分别为78.4 s、2.0%、6.8%和62.1 s、4.5%、10.0%;其家系成员的FⅪ:C和FⅪ:Ag均发现有不同程度下降。基因分析发现先证者和其弟弟FⅪ基因第6号外显子的g.15410G>A杂合无义突变导致Trp228stop及第12号外显子的g.25471C>G杂合错义突变导致Cys482Trp;其父亲、姐姐、女儿、外甥女均为Trp228stop的杂合子,而母亲、侄子则为Cys482Trp的杂合子。模型分析显示Cys482Trp突变并未破坏氨基酸间的天然氢键联系,但使该位点氨基酸与267位氨基酸的空间位阻变大,从而使蛋白的结构发生变化。结论:该遗传性FⅪ缺陷症患者FⅪ基因的Trp228stop无义突变和Cys482Trp错义突变与血浆FⅪ:C及抗原水平降低有关。
- 叶佳佳杨丽红郝秀萍陈必成
- 关键词：聚合酶链式反应基因突变模型分析
- 一个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系的F7基因突变分析被引量：5
- 2015年
- 目的对1个遗传性凝血因子Ⅶ（coagulation factorⅦ，FⅦ）缺陷症家系进行基因突变检测，并探讨F7基因突变与疾病发生的关系。方法检测先证者及其家系共16名成员的凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）、血浆FⅦ活性（FⅦ activity，FⅦ：C）等指标以明确诊断；用DNA测序法分析先证者F7基因的全部外显子及侧翼序列、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域。结果先证者及其弟的PT、FⅦ：C明显异常，分别为39．0s、2％和30．1 s、3％；先证者祖母、外祖母、二姑、父亲、母亲、舅舅和二姨的FⅦ：C分别为68％、54％、71％、73％、62％、72％和59％，均稍低于正常对照水平（80％～108%）；先证者及家系成员的其他凝血表型指标均在正常范围。测序结果显示先证者及其弟的F7基因第8外显子发生了g．11349G＞A和g．11482T〉G复合杂合突变，分别导致p．Arg304Gln和p．His348Gln错义突变;先证者外祖母、母亲、舅和二姨4名母系成员均存在F7基因第8外显子g．11349G＞A杂合突变，先证者祖母、父亲和二姑3名父系成员均存在F7基因第8外显子g．11482T〉G杂合突变，家系其他成员F7基因均为正常野生型。结论该遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系先证者的F7基因存在g．11349G＞A（p．Arg304Gln）和g．11482T＞G（p．His348Gln）复合杂合突变，且分别遗传自其母系家族和父系家族。F7基因g．11349G＞A（p．Arg304Gln）和g．11482T＞G（p．His348Gln）杂合错义突变与该家系的FⅦ活性水平降低有关。
- 金艳慧王莹宇郝秀萍杨丽红谢海啸朱丽青余方友杨小丽王明山
- 关键词：突变家系
- 一个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系的临床特征和基因分析被引量：2
- 2015年
- 遗传性凝血因子Ⅶ（FⅦ）缺陷症是由位于人类染色体13q34的F7基因突变所致的罕见常染色体隐性遗传性疾病,临床表现为不同程度的出血倾向.遗传性FⅦ缺陷症患者的临床表现与FⅦ活性（FⅦ：C）并不相关,其出血严重程度主要取决于基因突变的数量、突变位点对FⅦ功能的影响程度和基因多态性.
- 金艳慧郝秀萍程晓丽杨丽红刘欢乐王明山
- 关键词：基因分析常染色体隐性遗传性疾病家系基因突变
- FIO基因Va1298Met纯合突变导致的重型遗传性凝血因子X缺陷症家系分析被引量：1
- 2016年
- 目的对1个姑表近亲婚配的遗传性凝血因子X（coagulation factor X，FX）缺陷症家系进行基因突变检测，探讨F10基因突变与表型的关系。方法应用ELISA法检测先证者及家系成员的FX抗原（FX antigen，FX：Ag），一期凝固法检测其凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）、血浆FX活性（FX activity，FX：C）等指标以明确诊断；用DNA测序法分析先证者F10基因的全部外显子及侧翼序列、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域；用CLC Genomics Workbench 7．5软件分析基因突变位点的物种保守性和蛋白质二级结构改变。结果先证者PT、APTT、FX：C和FX：Ag均明显异常，分别为67．2s、102．9s、1％、8％；先证者父亲、母亲和弟弟PT稍延长，分别为14．5s、14．4s和14．4s，其FX：C（54％、48％和56％）和FX：Ag（52％、54％和54％）均较正常对照水平降低；其他家系成员的凝血表型指标均在正常范围。先证者F／0基因第8外显子的g．27881G〉A纯合突变导致p．Va1298Met，其父亲、母亲和弟弟均为g．27881G〉A杂合子，先证者的g．27881G〉A纯合突变分别遗传自近亲婚配的父母，先证者妹妹F10基因为正常野生型。蛋白质生物学特性分析发现，p．Va1298Met导致FX蛋白二级结构发生改变。结论该遗传性FX缺陷症家系先证者的F10基因存在g．27881G〉A（p．Va1298Met）纯合错义突变，且与该家系FX水平降低有关。
- 金艳慧郝秀萍程晓丽杨丽红陈怡谢海啸王莹宇王明山
- 关键词：近亲结婚基因突变
- 两例遗传性抗凝血酶缺陷症家系表型诊断与基因分析
- 凝血系统与抗凝系统在维持机体凝血与出血平衡中发挥重要作用，当凝血因子或抗凝因子发生质或量的缺陷时，则会扰乱这种平衡，从而诱发出血或血栓性疾病。抗凝血酶(antithrombin，AT)作为机体重要的抗凝蛋白，一旦出现缺陷...
- 郝秀萍
- 关键词：基因分析家系调查生物信息学
- 文献传递
