陶攀
- 作品数：8 被引量：6H指数：1
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 山羊NLRP3基因的克隆及其在DF-1细胞中的表达被引量：1
- 2015年
- 为了解山羊NLRP3基因及其编码蛋白的生物学信息,采用RT-PCR扩增了海南黑山羊NLRP3基因并进行了序列及其编码蛋白的结构分析,构建了pIRES2-EGFP-NLRP3真核表达载体,并将其转染至DF-1细胞中进行了表达。结果表明,NLRP3基因在物种内的同源性高,种间同源性低,编码的蛋白由1 031个氨基酸组成,存在3个潜在跨膜区,分别为第401~419、435~453和884~904位氨基酸,不含信号肽;辣根过氧化物酶单层细胞免疫化学检测证实,构建的真核表达载体pIRES2-EGFP-NLRP3在DF-1细胞中成功表达。本研究结果为建立NLRP3专性表达细胞系及深入研究NLRP3在山羊抗感染免疫的机制奠定了基础。
- 张凯照叶锦辉于梦王晴楠刘健新陶攀亓文宝宁章勇
- 关键词：海南黑山羊真核表达
- 猪NLRP3基因克隆及其在DF-1细胞的表达被引量：1
- 2017年
- NLRP3蛋白作为NLRP3炎性小体的主要组成蛋白之一,在机体对抗病原微生物和炎症反应中起着重要作用。为了深入研究猪的NLRP3蛋白在炎性疾病发生过程中的作用机制,采用PCR的方法扩增了长白猪NLRP3基因,并对其序列和编码蛋白的结构进行了分析。构建了pIRES2-EGFP-NLRP3真核表达载体,并转染至DF-1细胞中进行表达。结果显示,该基因表现出种属内保守性和种属间差异性,编码蛋白由1 036个氨基酸构成,存在4个潜在跨膜区,分别是第401~419,第721~739,第775~795和第889~910位氨基酸,不含信号肽。单层细胞免疫化学检测结果显示,重组质粒pIRES2-EGFP-NLRP3成功转染并在细胞中表达。本研究为深入探讨炎症小体在猪炎症性疾病的作用机制提供了基础数据。
- 陶攀张凯照刘健新王晴楠于梦宁章勇
- 关键词：真核表达
- 山羊NLRP3、ASC和caspase-1组织特异性表达和分布的研究
- <正>研究目的阐明NLRP3炎症小体主要组成蛋白在山羊各组织内分布和表达的情况。材料方法对海南黑山羊NLRP3、ASC和caspase-1基因进行了克隆和序列分析,利用原核表达纯化蛋白,免疫新西兰大白兔制备了相应的多克隆...
- 陶攀张凯照王衡宁章勇
- 文献传递
- 波尔山羊线粒体融合蛋白2基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2015年
- 线粒体融合蛋白2(mitofusin-2,MFN2)是位于线粒体外膜上的跨膜蛋白,也是外膜的信号分子和药物作用靶蛋白,它在细胞增殖、分化、凋亡和多种疾病中起着重要作用。为深入研究山羊MFN2基因在炎症疾病过程中的分子作用机制,本试验采用RT-PCR的方法克隆了波尔山羊MFN2基因,并对其进行了序列测定及其编码蛋白的结构分析。结果显示,克隆得到的波尔山羊MFN2基因大小为2 441bp,其编码的蛋白由705个氨基酸组成。波尔山羊MFN2基因种间同源性低,存在Fzo-mitofusin结构域、DLP-2结构域,是结构保守蛋白;存在1个潜在跨膜区,位于576—595位氨基酸(loop1);不存在信号肽。试验首次克隆了波尔山羊MFN2基因,为探索山羊MFN2基因与炎症发生之间关系的分子机制提供了基础数据。
- 叶锦辉张凯照于梦王晴楠刘健新陶攀宁章勇
- 关键词：波尔山羊克隆
- 羊口疮病毒GDZC株锚蛋白基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2016年
- 为研究羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)编码的锚蛋白(ankyrin,ANK)基因在感染宿主中的免疫调节作用,本试验从ORFV GDZC株感染的细胞病毒液中提取基因组DNA,用特异性引物进行PCR扩增、克隆出5个ANKs基因,并进行了基因序列及其编码蛋白的生物信息学分析。结果显示,获得的GDZC株ORFV008、ORFV123、ORFV126、ORFV128、ORFV129基因分别编码516、525、497、501和516个氨基酸,与OV-SA00毒株的核苷酸同源性最高,分别为98.3%、98.7%、97.9%、97.3%、98.0%。ORFV编码的5个ANKs都含有ANK结构域和F-box结构域,是结构保守蛋白。蛋白跨膜分析表明,ORFV123和ORFV128不含潜在跨膜区,ORFV129、ORFV008和ORFV126蛋白分别存在1、2和3个潜在跨膜区,且均不含信号肽。本研究结果为深入研究ANK在ORFV致病过程中作用和免疫逃逸机制提供了基础数据。
- 葛士坤张凯照刘健新王晴楠于梦陶攀宁章勇
- 关键词：羊口疮病毒锚蛋白克隆
- 山羊NLRP3、ASC和caspase-1组织特异性表达和分布的研究
- 陶攀张凯照王衡宁章勇
- 猪链球菌9型菌株的分离鉴定
- 2023年
- 为了确诊四川省某猪场1头25日龄左右的后腿跛行并急性死亡仔猪的病因,并制定对猪群其他猪只的预防和治疗方案。本试验剖检死亡仔猪,取脾脏、肝脏、肺脏组织和血液进行细菌分离培养,革兰染色镜检,PCR分型鉴定和药敏试验。结果显示,分离培养的细菌革兰染色为阳性;分离菌株经PCR检测为猪链球菌9型;药敏试验确定该分离菌株对氨苄西林、环丙沙星、氟苯尼考、青霉素、多西环素、头孢氨苄、氧氟沙星、头孢拉定、头孢呋辛和氯霉素敏感。结果表明,该猪场仔猪为感染猪链球菌9型引起的急性死亡,通过头孢类等药物可以有效的治疗发病仔猪。
- 陶攀陶攀张桂红张桂红
- 关键词：猪链球菌9型耐药性PCR分型
- 犬流感病毒诱导的Beagle犬NLRP3炎性小体相关基因表达谱
- 2022年
- 炎症反应是机体对抗异物的一种先天性免疫反应,NLRP3(nod-like receptor family,pyrin domain-containing 3)炎症小体途径是炎症反应的主要途径之一,在机体对抗病原微生物反应中起着重要的作用。为了深入研究犬的NLRP3炎症小体在犬感染H3N2犬流感病毒(CIV)后的变化,对未感染以及感染H3N2 CIV早期(3 d)和后期(7 d)的比格犬心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、气管和淋巴结组织进行病理学检测。结果发现,感染H3N2 CIV的比格犬,在早期没有明显的病理变化,炎症反应不明显,但后期炎症反应明显增强。通过荧光定量PCR检测比格犬感染H3N2 CIV后NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-α等炎症相关基因的转录水平,发现宿主在感染CIV早期炎症相关基因转录水平显著降低,而在感染H3N2 CIV后期的炎症相关基因转录水平比早期显著升高。进一步克隆犬NLRP3、ASC和Caspase-1基因并进行原核表达,制备多克隆抗体,通过免疫组织化学方法对未感染以及感染H3N2 CIV早期和后期的比格犬组织中的NLRP3、ASC(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD)和Caspase-1蛋白的表达水平进行检测。结果发现在感染H3N2 CIV早期的犬组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白的阳性反应与对照组相比总体上没有明显的变化,而在感染后期犬组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白阳性反应明显增强。本研究为进一步研究流感病毒与宿主炎症反应的关系提供了思路,为后期更好地预防和治疗犬流感提供了理论依据。
- 陶攀宁章勇宁章勇贾爱卿周沛周沛李守军
- 关键词：NS1蛋白
