余春波
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：贵州省社会发展科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 齐墩果酸诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用机制研究被引量：6
- 2018年
- 齐墩果酸（oleanolic acid,OA）是一种广泛存在于自然界中的五环三萜类天然化合物,已有研究表明OA具有抗肺癌活性,但是具体机制尚未完全阐释清楚。本研究旨在证实OA是否能够诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡,并探索该效应是否与线粒体凋亡通路相关。我们将不同浓度的OA作用于细胞后,使用MTT法检测A549细胞的生长情况。采用AV/PI法进行染色后,经流式细胞仪检测其凋亡率,同时使用Hoechst 33342染色并使用荧光显微镜观察并拍照;Westen-blotting检测OA对A549细胞的线粒体凋亡通路相关蛋白相对表达水平的影响。MTT结果显示OA能够抑制A549细胞的生长,并呈时间剂量依赖性。AV/PI法染色结果显示OA能够诱导A549细胞凋亡,亦呈时间剂量依赖性。Hoechst 33342法染色结果相似。Westen-blotting结果表明OA能够上调A549细胞线粒体凋亡通路相关蛋白Bax,t Bid,Cleaved caspase 3的相对表达水平,同时下调该通路Bcl-xl,Bcl-2的相对表达水平。以上所有的结果表明OA能够显著抑制肺癌A549细胞的生长并通过调节线粒体凋亡通路相关蛋白的表达水平而诱导其凋亡。
- 夏荣木生欣徐先林余春波陆红玲
- 关键词：齐墩果酸A549细胞凋亡线粒体通路
- 沉默DNA-PKcs对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu凋亡的影响被引量：2
- 2018年
- 目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、脂质体对照组、NC对照组、siDNA-PKcs实验组。采用噻唑蓝(MTT)法检测耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;Real-time PCR和Western blot分别检测细胞DNA-PKcs mRNA及蛋白的表达情况;倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化(Hoechst33342染色法);流式细胞术检测细胞凋亡情况(AnnexinV/PI双染法);Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-xl)蛋白的表达情况。结果 MTT检测Bel7402/5-Fu细胞的半抑制浓度(IC50)明显增高,耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药指数为13.13;DNA-PKcs的mRNA与蛋白表达水平明显减少,设计的siDNA-PKcs特异序列能有效沉默细胞DNA-PKcs的表达;Hoechst-33342染色检测结果显示siDNA-PKcs实验组细胞体积缩小、细胞核边集、呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,siDNA-PKcs实验组细胞凋亡率比其余组增加(P<0.01);Western blot检测结果显示siDNA-PKcs实验组Bax蛋白表达水平比其余组高,Bcl-xl蛋白表达水平比其余组低(P<0.01)。结论siDNA-PKcs能诱导肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡,并能上调促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平,抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的蛋白表达水平。
- 李大玉余春波朱欣婷刘喜平范芳李长福
- 关键词：药物耐受性
- 浅析医学院校实验技术人员综合素质培养与提高被引量：6
- 2017年
- 医学院校实验室队伍的建设、改革与发展,面临着诸多问题,而实验技术队伍的综合素质培养与提高是亟需解决的问题之一。由于历史原因,高校实验室队人员年龄偏高,学历偏低,创新能力不足,接受新知识新技术能力偏低等,造成实验室队伍建设的落后现状制约高校教学,科研和服务社会水平的发展。针对上述问题,对实验技术人员现状及实验技术人员综合素质的培养进行探讨。
- 余春波范芳李长福陆红玲
- 关键词：医学院校
- Artemis影响人肝癌细胞BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的研究（英文）被引量：1
- 2018年
- 目的探讨Artemis对人肝癌耐药细胞株BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法将p SGU6/GFP/Neo/sh Artemis干扰质粒转染人肝癌耐药细胞BEL-7402/5-FU(sh Artemis组),通过Real-time PCR法检测P-gp基因表达水平变化;MTT法检测sh Artemis组细胞对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素及索拉菲尼的IC50值和RI值;利用Western-blot法检测p-Artemis和ATM蛋白水平表达变化;使用ATM抑制剂KU55933联合丝裂霉素作用细胞48 h,Westernblot法观察ATM、γ-H2AX和Artemis蛋白水平表达变化。结果与对照组比较,sh Artemis组的P-gp mRNA表达水平下降(P<0.05),且对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和索拉菲尼的敏感性增加,IC50值和RI值均降低(P<0.05)。sh Artemis组的pArtemis与ATM蛋白表达水平降低(P<0.05);KU55933联合丝裂霉素作用细胞后,有效减少ATM蛋白的表达(P<0.05),同时γ-H2AX蛋白表达量增加(P<0.05),但Artemis蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论靶向干扰Artemis的表达能够增强细胞BEL-7402/5-FU对化疗药物的敏感性。此效应可能与Artemis作为BEL-7402/5-FU DNA损伤修复的分子开关,进而通过影响ATM参与DNA损伤修复有关。
- 李宇婷张雪范芳李大玉余春波陈佳瑜刘云李长福
- 关键词：ARTEMIS化疗敏感性肝癌
- 沉默DNA-PKcs增强肝癌耐药细胞化疗敏感性的机制研究
- 目的：观察DNA–PKcs表达沉默对肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu化疗敏感性的影响，研究线粒体凋亡途径在肝癌耐药中的作用，探讨靶向抑制DNA-PKcs增强肝癌耐药细胞化疗敏感性的可能机制。 方法：1.siRNA-...
- 余春波
- 关键词：肝癌DNA-PKCS耐药细胞化疗敏感性靶向抑制
- DNA-PKcs影响肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu增殖及机制的研究被引量：1
- 2016年
- 目的检测DNA-PKcs对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu增殖的影响及其相关机制,探讨DNA-PKcs在肝癌多药耐药的发生发展中的作用。方法采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs转染Bel-7402/5-Fu细胞,cck-8法检测细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期;Western blot检测DNA-PKcs、TS蛋白的表达情况。结果实验组与对照组比较,细胞增殖减少(P<0.05);实验组S期细胞与对照组比较,细胞数减少(P<0.05);DNA-PKcs、TS蛋白表达结果显示,实验组相比对照组蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DNA-PKcs的表达沉默能抑制肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的细胞增殖;其机制可能与沉默DNA-PKcs蛋白表达后,TS蛋白表达下调有关。
- 李大玉余春波束波生欣李长福范芳
- 关键词：细胞增殖
- 敲低DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)抑制Bel7402/5-Fu耐药肝癌细胞的细胞周期及机制被引量：2
- 2017年
- 目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对Bel7402/5-氟尿嘧啶(5-Fu)肝癌耐药细胞的细胞周期及机制的影响,探讨DNA-PKcs影响化疗敏感性的相关机制。方法采用MTT法检测Bel7402/5-Fu细胞转染siDNA-PKcs后,对5-Fu、阿霉素(ADM)的敏感性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;流式细胞术检测细胞周期;Western blot法检测细胞P21、细胞周期蛋白B1(cyclin B1)、细胞分裂周期蛋白2(CDC2)的蛋白表达情况;实时定量PCR检测细胞毛细血管扩张共济失调突变基因(ATM)、p53的mRNA水平,Western blot法检测细胞ATM、P53蛋白水平。结果敲低细胞DNA-PKcs水平后,siDNA-PKcs组5-Fu、ADM的半数抑制浓度(IC50)明显降低,S期细胞减少、G2/M期细胞增多,细胞周期抑制因子P21蛋白水平增加,cyclin B1、CDC2蛋白水平降低,ATM、p53的mRNA及蛋白水平增加。结论敲低DNA-PKcs水平,增加P21蛋白水平,同时抑制cyclin B1、CDC2蛋白水平,诱导Bel7402/5-Fu细胞G2/M期阻滞,其机制可能与ATM-p53信号途径有关。
- 李大玉刘云余春波刘喜平范芳
- 关键词：细胞周期
- 卓越医生班人体结构学之生物化学实验教学改革初探被引量：1
- 2015年
- 卓越医生培养计划的实施,体现在教学内容的更新,教学方法的改革上,其中包括实验改革,通过对生物化学实验由验证性的小实验改为综合性或设计性的大实验,提高了学生的实践动手能力、良好的团结协作精神。科学合理地进行实验设计和操作,启蒙和引导学生进入科学的大门,为他们今后的学习和科学研究打下良好的基础。
- 涂应琴陆红玲生欣谢夏丹余春波欧刚卫
- 关键词：生物化学实验实验教学改革
- 一种通过抑制肉碱脂酰转移酶1B即CPT1B的抗肝癌药物
- 本发明公开了一种通过抑制肉碱脂酰转移酶1B(CPT1B)抗肝癌的药物。该药物能抑制肝癌细胞生长和侵袭转移，其作用机制为：通过抑制JAK/STAT3信号通路抑制CPT1B的表达，减弱肝癌细胞的脂肪酸β‑氧化，降低ATP的产...
- 刘云喻昌燕王梅肖毅孔庆宏孟令杰刘春娇余春波
- 文献传递
- 沉默DNA依赖蛋白激酶亚基对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu DNA损伤修复功能的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨DNA依赖蛋白激酶亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu DNA损伤修复功能的影响。方法采用阳离子脂质体法将sh DNA-PKcs干扰质粒转染Bel-7402/5-Fu细胞,根据荧光细胞数计算转染率,实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)及Western blot检测DNA-PKcs的沉默效率;Western blot检测TopoⅡ、γ-H2AX蛋白表达;5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷法检测细胞DNA合成。结果质粒的转染效率为67%;q RT-PCR及Western blot检测结果显示,DNA-PKcs m RNA及蛋白水平的沉默效率分别为82.6%和71.8%;Western blot结果显示,实验组TopoⅡ蛋白表达水平比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达水平比对照组高,差异有统计学意义(P<0.01)。5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷法结果显示,实验组DNA合成率比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 sh DNA-PKcs干扰质粒能下调Bel-7402/5-Fu细胞中DNA-PKcs、TopoⅡ蛋白的表达,抑制Bel-7402/5-Fu细胞DNA合成。
- 李大玉梁大敏束波杨加伟生欣李长福余春波范芳
- 关键词：DNA损伤修复
