赵文浩
- 作品数：13 被引量：85H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 江苏菜豆上分离的番茄黄化曲叶病毒基因组序列分析被引量：1
- 2016年
- 2012年,江苏南京菜豆上出现了一种新的病毒病害,病株表现明显的叶片皱缩、植株矮化等症状。根据其症状及介体发生状况,对其伴随的病毒种类进行了研究,结果从中检测到一种粉虱传双生病毒,对其基因组DNA-A组分克隆测序后发现其全长2 781 bp,编码6个ORF,BLAST及聚类分析结果显示该病毒与番茄黄化曲叶病毒同源性最高(99%),是番茄黄化曲叶病毒的一个分离物。这是江苏省番茄黄化曲叶病毒侵染菜豆的首次报道,暗示番茄黄化曲叶病毒可能是我国菜豆种植的重要潜在威胁。
- 季英华张晖赵文浩吴淑华胡婕程兆榜赵统敏余文贵朱叶芹周益军
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒菜豆
- 侵染朱槿的木尔坦棉花曲叶病毒V2蛋白的亚细胞定位特征分析被引量：2
- 2018年
- 木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl Multan virus,CLCuMuV)2006年在中国首次报道,并呈逐年扩散蔓延,给园艺和经济作物造成了严重损失。选择2012年采自江苏南京的CLCuMuV朱槿(Hibiscus rosa-sinensis)分离物作为研究对象,对其V2蛋白基因进行了扩增及克隆,并构建了V2-YFP融合表达载体,利用农杆菌浸润法接种本氏烟(Nicotiana benthamiana)。激光共聚焦显微镜观察结果显示浸润处理后本氏烟叶片细胞的细胞质和细胞核周都有较强的绿色荧光信号,同时细胞质中还分布有点状的荧光信号。反转录PCR(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹(Westernblot)结果显示带荧光标签的V2在本氏烟叶片中转录和表达正常。这些结果说明CLCuMuV编码的V2蛋白主要分布在细胞质和细胞核周,同时在细胞质中还会形成小聚合体。
- 陈思敏季英华吴根土赵文浩吴淑华肖留斌孙现超周益军青玲
- 关键词：亚细胞定位
- 番茄黄化曲叶病毒编码的V2蛋白与番茄体内互作因子筛选
- 番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是一种植物单链DNA病毒(ssDNA),隶属双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus),...
- 赵文浩季英华张晖吴淑华李廷芳程兆榜周益军
- 文献传递
- 一种利用RT-LAMP快速检测烟草轻型绿花叶病毒的方法
- 本发明提供了一种快速检测烟草轻型绿花叶病毒的方法，属植物保护领域。根据烟草轻型绿花叶病毒核苷酸序列设计RT-LAMP引物(TMG2-F3，TMG2-B3，TMG2-FIP，TMG2-BIP)。样品提取总RNA后，进行RT...
- 季英华赵文浩吴淑华李廷芳杜琳琳周彤程兆邦周益军
- 文献传递
- 江苏省蚕豆上菜豆黄花叶病毒的分子鉴定被引量：6
- 2019年
- 为掌握江苏省豆类作物上的病毒病种类,本研究于2018年对江苏省蚕豆作物病毒进行了调查,累计采集田间疑似病样55份,为明确其中伴随的病毒种类,我们对田间采集的疑似病样提取总RNA后进行了分子检测,结果发现,在用菜豆黄花叶病毒(Bean yellow mosaic virus,BYMV)检测引物进行RT?PCR扩增时有16份样品扩增到1条525 bp左右的条带,与目的片段大小一致,说明其中可能伴随有菜豆黄花叶病毒的感染。为进一步确定这一结果,我们针对BYMV CP基因设计了引物,以阳性样品RNA为模板进行RT?PCR,结果发现均扩增到预期大小的目的条带,对该片段回收、克隆并测定碱基序列,结果发现其CP基因碱基序列全长819 bp,编码1个由273个氨基酸组成大小约20 800的蛋白质。BLAST分析结果显示其与BYMV同源性最高(AB439731,99%),表明其属于BYMV的一个分离物。利用MEGA软件对其进行系统进化分析,结果发现这些分离物与日本的蚕豆分离物(AB439731)同源性最高,其次是澳大利亚的蚕豆分离物(HG970867)和中国青海的菜豆分离物(9?16)。这些结果表明江苏蚕豆上检测到的病毒是菜豆黄花叶病毒的一个分离物,这是该病毒在江苏侵染蚕豆的首次分子鉴定报道。
- 涂丽琴吴淑华干射香崔晓艳赵文浩程兆榜陈新周益军季英华朱月林
- 关键词：菜豆黄花叶病毒蚕豆分子鉴定
- 江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒基因组结构特征分析被引量：10
- 2015年
- 2012年5月,江苏南京朱槿上出现一种新的病毒病害,病株表现明显的叶片上卷、叶脉肿大、叶背伴有耳突、植株矮缩等症状。根据其症状及介体发生状况,对其伴随的病毒种类进行研究,结果发现采集的46份典型症状样品体内均可以检测到粉虱传双生病毒,对其基因组DNA-A组分克隆测序后发现其全长2 736 bp,编码6个ORF,BLAST分析显示该病毒与木尔坦棉花曲叶病毒同源性最高(99.9%),是木尔坦棉花曲叶病毒的一个分离物。病样中同时还检测到伴随DNAβ卫星分子,测序结果显示该卫星全长1 346 bp,编码1个ORF,BLAST及聚类分析结果显示该β卫星与木尔坦棉花曲叶病毒β卫星同源性最高(99.7%),为木尔坦棉花曲叶病毒β卫星的一个分离物。这是木尔坦棉花曲叶病毒首次在长江流域的报道。
- 张晖季英华吴淑华赵文浩周彤周益军
- 江苏省番茄黄化曲叶病毒和褪绿病毒复合侵染的分子检测被引量：32
- 2016年
- 2014年对江苏地区的番茄黄化曲叶病进行调查时发现,采自南京温室大棚的17份表现矮化,上部叶片上卷、变小、叶缘黄化,下部叶片脉间褪绿、上卷、变厚症状的番茄病株样本中除了感染烟粉虱传双生病毒外,还有一种长线形病毒,序列分析结果显示烟粉虱传双生病毒为番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),长线形病毒为番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)。同时还对发病棚室中采集的烟粉虱进行了两种病毒的检测,结果两种病毒在烟粉虱体内都有检测到。
- 吴淑华李廷芳赵文浩程兆榜郭青云赵统敏余文贵朱叶芹季英华
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒复合侵染分子检测
- 山东寿光黄瓜上瓜类褪绿黄化病毒的分子鉴定被引量：4
- 2019年
- 2016年,本研究在对山东黄瓜病毒病调查时发现当地黄瓜上出现一种叶片表现黄化植株伴有轻微矮缩的病害,为明确其中伴随的病毒种类,我们对田间病样进行了采集,提取总RNA后利用瓜类病毒引物进行RT-PCR检测,结果发现在利用瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)引物检测样品时,田间采集的25份疑似病样中13份能扩增到400 bp左右的目的条带。为进一步确认,我们又针对CCYV的外壳蛋白基因(CP)设计了特异性引物,对13份阳性样品进行检测,结果均能扩增到目的片段,对获得的CP基因片段进行克隆并测定序列,序列分析结果显示其CP基因序列全长753bp,编码1个由250个氨基酸组成的分子量28700的蛋白质。进一步序列分析结果显示其与CCYV已报道分离物有很高的同源性,并聚类到同一个大的分支,其中与日本分离物、希腊分离物及中国其他地区分离物相对近缘,聚类到一支,而与伊朗分离物近缘关系相对较远。这些结果说明山东黄瓜黄化病样上检测到的病毒为瓜类褪绿黄化病毒,这也是该病毒在山东侵染黄瓜的首次报道。
- 干射香涂丽琴吴淑华范小燕吴瑞雪赵文浩程兆榜周益军竺晓平季英华章松柏
- 关键词：黄瓜分子鉴定
- 蚕豆中三叶草黄脉病毒编码的NIa-Pro蛋白亚细胞定位特征初步研究被引量：1
- 2020年
- 三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,ClYVV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的重要成员。核内涵体a蛋白酶(NuclearInclusionaProtease,NIa-Pro)是一种由Potyvirus病毒编码的具有蛋白水解酶活性的蛋白,在病毒与寄主互作过程中参与多聚蛋白切割等多种功能的行使。选择2018年在江苏发现的ClYVV蚕豆分离物作为研究对象,对其NIa-Pro蛋白基因进行了克隆和序列测定,结果显示其全长729bp,编码1个24.3kD的蛋白。为进一步研究其亚细胞定位特征,构建了融合YFP荧光标签的重组表达载体YFP-NIa-Pro,利用农杆菌浸润法接种本氏烟(Nicotiana benthamiana)。激光共聚焦显微镜观察结果显示,浸润处理后本氏烟叶片表皮细胞的细胞质及细胞核都有较强的荧光信号。取浸润区样品通过Western-blot检测,结果显示YFP-NIa-Pro在本氏烟叶片中正常表达。这些结果初步表明ClYVV编码的NIa-Pro在细胞质和细胞核均有分布。
- 涂丽琴吴淑华赵文浩范小燕干射香崔晓艳程兆榜陈新朱月林周益军季英华
- 关键词：蚕豆亚细胞定位
- 江苏省及周边地区番茄黄化曲叶病毒寄主范围调查被引量：4
- 2017年
- 近年来由番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)导致的番茄黄化曲叶病给江苏省及周边地区番茄生产造成了惨重的损失,除番茄外,TYLCV还可以侵染多种作物及杂草,这些非番茄寄主在番茄黄化曲叶病的周年发生中起着重要的作用。为明确TYLCV的寄主范围,2012—2014年对TYLCV在江苏省及周边地区的寄主范围进行了调查。结果显示,除番茄外TYLCV还可以侵染菜豆,并导致严重的矮化及皱缩症状,暗示TYLCV的发生可能成为菜豆种植的新威胁。杂草寄主的调查结果显示,TYLCV可以侵染铁苋菜、皱果苋,暗示这2种杂草是TYLCV的中间寄主,可能在TYLCV的周年循环中起作用。
- 季英华朱叶芹李贵张晖赵文浩吴淑华程兆榜赵统敏余文贵周益军
- 关键词：寄主范围
