詹茜 作品数:11 被引量:25 H指数:4 供职机构: 重庆医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市教育委员会科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
多参数流式细胞术检测移植前微小残留病灶在急性白血病患者异体造血干细胞移植治疗中的意义 被引量:7 2020年 目的:探讨异基因造血干细胞移植前多参数流式细胞术(multi-parameter flow cytometry,MFC)检测微小残留病(minimal residual disease,MRD)对于急性白血病患者预后的临床意义。方法:选取并回顾性分析2015年7月至2018年7月在重庆医科大学附一院血液内科首次进行异体造血干细胞移植(allo-HSCT)的急性白血病患者81例,其中移植前达形态学完全缓解的急性白血病患者79例,未达形态学完全缓解2例,分析完全缓解组(CR)与未完全缓解组(NCR)患者移植预后的差异,根据移植前的MRD情况分为阳性组(MRD^+)30例和阴性组(MRD^-)49例,分析MRD是否转阴与异基因造血干细胞移植术患者预后的相关性。结果:81例急性白血病患者中,CR与NCR患者3年总生存期(OS)(CR 82.2%:NCR 0%)、累计复发率(RI)(CR 17.7%:NCR 100%)、无白血病生存期(LFS)(CR 42.3%:NCR 0%),差异具有统计学意义(P<0.05)。79例患者移植前MRD^+30例(38.0%),MRD^-49例(62.0%),2组的2年OS差异有统计学差异。根据单因素分析,与MRD^-相比,MRD^+组的LFS率更低(P<0.001,95%CI 10.5%vs 36.2%)。结论:利用流式细胞术检测骨髓MRD对预测急性白血病预后具有重要的意义。与MRD^-组相比,MRD^+率无白血病生存期更短。 刘岑鸟 刘林 陈建斌 唐晓琼 肖青 张红宾 王建渝 王利 詹茜 王欣关键词:急性白血病 异基因造血干细胞移植 微小残留病 流式细胞术 红细胞裂解液对CD34^+细胞相对计数的影响及其原因初步探讨 被引量:1 2019年 目的:研究红细胞(red blood cell,RBC)裂解液对CD34^+细胞相对计数的影响。方法:收集101份外周血干细胞采集物,CD34-PE及CD45-FITC双色免疫荧光染色后,分别用FACS裂解液(FACSTM lysing solution,FACS)、Optilyse C裂解液(optilyse C lysing solution,Optilyse C)及自配裂解液溶解红细胞,采用洗涤程序和运用ISHAGE设门策略,检测CD34^+细胞、淋巴、粒、单核细胞相对数,CD45^+细胞占全部收集信号百分比及各类细胞前向散射光(forward scatter,FSC)及侧向散射光(side scatter,SSC)信号。结果:比较3种裂解液处理后样本的CD34^+细胞百分比,FACS裂解液处理的样本CD34^+细胞百分比最低,自配裂解液最高(FACS vs. Optilyse C vs.自配=0.49±0.43 vs. 0.67±0.50 vs. 0.73±0.66,P=0.000)。FACS裂解后样本CD45+细胞百分比远高于Optilyse C及自配裂解液(t=142.500,P=0.000)。3种裂解液对淋巴细胞百分比结果(F=35.340,P=0.000)具有统计学差异;而粒细胞百分比(F=0.610,P=0.540)、单核细胞百分比(F=1.590,P=0.210)差异无统计学意义。FACS裂解液处理后,CD34^+细胞、淋巴细胞的FSC和SSC信号强度均弱于Optilyse C裂解液及自配的裂解液;而粒、单核细胞的SSC信号,FACS裂解液处理后最强,Optilyse C裂解液处理后最弱。另外,动员后的白细胞数多少与CD34^+细胞百分比不存在相关性(r=0.108,P=0.312)。结论:红细胞裂解液导致CD34^+细胞相对计数差异的原因可能与CD45^+细胞比例有关,即获取的有效细胞数;裂解液对细胞形态的影响与造成淋巴细胞比例有显著性差异有关。鉴于不同红细胞裂解液对CD34等抗原阳性细胞的相对计数确实有不良影响,因此在应用流式细胞术检测或计数时应慎重选择。 詹茜 万雪颖 程伟 崔瑾 张阳丽 秦璐 戴玉莲 张玉洪基于高通量测序技术的105例AML和MDS患者驱动基因突变谱差异性分析 2023年 目的获得西南地区急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者的基因突变谱特征,分析其差异性,探讨AML和MDS的差异性指标。方法回顾性分析2019年9月至2022年12月该院收治的71例AML患者和34例MDS患者的临床资料,将AML和MDS患者分别按年龄进行分组,年龄≥60岁纳入老年组,年龄<60岁纳入中青年组。患者住院期间均采用高通量测序技术进行基因突变谱检测,采用流式细胞术检测分化抗原。通过分析比较基因突变谱的特征,并结合细胞表面分化抗原,获得西南地区AML和MDS患者基因突变谱的差异性。结果AML和MDS患者老年组与中青年组的中位年龄比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AML患者老年组男性比例较高,为76.2%,明显高于中青年组(P<0.05)。AML患者中DNMT3A的突变频率与年龄有关(P<0.05)。CEBPA、FLT3、RUNX1基因突变频率在AML中分别为23.9%、32.4%、9.9%,在MDS中分别2.9%、11.8%、26.5%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论髓系白血病患者的基因突变频率与患者的年龄和性别有一定的关系;AML和MDS有特定突变位点和突变基因,可以将以上基因突变作为临床辅助鉴别诊断的有效指标。 王晓凤 沈依帆 詹茜 廖鑫 吴江 赵洁 杨梓涵 江珊 程伟 张玉洪 陈雪萍关键词:急性髓系白血病 骨髓增生异常综合征 高通量测序技术 基因突变谱 流式细胞术检测孕妇外周血中胎儿红细胞的应用价值 被引量:1 2022年 目的探讨流式细胞术和血红蛋白电泳联合检测诊断胎母输血综合征的价值。方法采用抗胎儿血红蛋白(HbF)单克隆荧光抗体滴度试验找出流式细胞术检测时抗HbF单克隆荧光抗体与胎儿红细胞数量的最佳反应比,再对该方法的准确度、灵敏度、特异度及重复性进行评价,最后对临床疑似发生胎母输血综合征的孕妇外周血分别采用流式细胞术和血红蛋白电泳进行胎儿红细胞和HbF检测。结果胎儿红细胞数量与抗HbF单克隆荧光抗体的最佳反应比为5×10^(4)个∶6μL;流式细胞术检测结果与血红蛋白电泳及K-B法结果均具有一致性,该方法的灵敏度随流式细胞仪收集红细胞总量的增加而增加,抗HbF单克隆荧光抗体对除HbF外的血红蛋白变异体无染色,并且对固定及渗透处理后的红细胞悬液在90 d内的检测结果重复性好;90例孕妇外周血标本中成功检出2例胎母输血综合征。结论该研究建立了流式细胞术检测胎母输血综合征的非创伤性产前确诊方法。 崔瑾 詹茜 罗琴 李俊男 张玉洪关键词:胎母输血综合征 流式细胞术 血红蛋白电泳 胎儿红细胞 荧光原位杂交技术对无创DNA产前检测阳性病例的诊断价值 被引量:1 2016年 目的:探讨荧光原位杂交检测技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)对无创DNA产前检测(noninvasive prenatal testing,NIPT)阳性病例的诊断价值。方法:对22例NIPT阳性病例的未培养羊水利用FISH技术进行胎儿13、18、21、X和Y染色体数目的检测,同时将所有病例的羊水或脐血细胞培养行常规染色体G显带染色体核型分析。应用Kappa检验比较FISH和染色体核型分析检测结果的一致性并进行分析。结果:22例样本FISH检测结果中,18例检测出胎儿染色体非整倍体异常,包括13-三体2例、21-三体11例、18-三体1例、XXY/XY嵌合型1例、XXY型1例、XXXXY型1例、XYY型1例,余下4例未发现染色体数目异常。FISH检测结果与染色体核型分析结果一致性极强(κ=1)。结论:NIPT存在假阳性结果,阳性病例必须进行进一步产前诊断,FISH技术具有快速,简便,准确的技术特点,是快速确诊的有效手段。 张阳丽 李荣 赵纯全 崔瑾 詹茜 白慧丽 程伟 张玉洪关键词:荧光原位杂交 染色体非整倍体 外周血干细胞采集物来源的巨细胞病毒特异性T细胞的体外培养和扩增 被引量:2 2019年 目的建立巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CMV CTL)体外扩增的方法。方法用1μg/mL全长巨细胞病毒pp65(CMV pp65)多肽体外多轮刺激由粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血干细胞采集物中分离的单个核细胞(PBMC),同时加入白细胞介素2(IL-2)、 IL-15、 IL-21扩增20 d。在培养第7天,加入丝裂霉素处理的负载CMV pp65抗原肽的自体PBMC,第10天补充经γ射线辐照处理并负载CMV pp65抗原肽的PBMC和CD3(OKT3);对照组为未加入抗原肽进行扩增的PBMC组。采用多色流式细胞术分别对扩增前、扩增后的T淋巴细胞表型及细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平进行分析, ELISA检测供者血清中CMV IgM/IgG抗体滴度水平。结果培养后可以收集得到(165.26±6.14)×10~6个细胞,其中CD3^+ T细胞占89.21%, CD8^+ T细胞占CD3^+ T细胞的(43.54±28.03)%, CD4^+ T细胞占CD3^+ T细胞(34.23±26.18)%。获得的CD3^+ T细胞以效应记忆性T细胞(T_(EM))为主,且扩增培养后的CD8^+和CD4^+ T_(EM)比例较培养前显著增高。另外,培养后干细胞样记忆性T细胞(T_(SCM))和组织原位记忆T细胞(T_(RM))的比例均较培养前显著增加。在功能实验中,培养后得到的IFN-γ^+的分泌型CMV特异性CD8^+ T细胞群比例较扩增前明显增加, TNF-α^+ CMV特异性CD8^+ T细胞比例呈增长趋势;能够分别分泌IFN-γ和TNF-α的CMV特异性CD4^+ T细胞群比例与培养前无明显变化。此外,供者体内CMV IgG水平与供者年龄呈现正相关,且在该培养体系下, IFN-γ^+和TNF-α^+ CMV特异性T细胞扩增比例与供者年龄呈负相关。结论本研究成功建立了在体外有效的培养和扩增CMV CTL的方法。 夏瑜 张在利 李莎 詹茜 肖青 王利 刘林 罗小华关键词:细胞因子 体外扩增 CD4-/CD8-/CD56+/TCRγδ+ T-大颗粒淋巴细胞白血病伴再生障碍性贫血表现一例报告并文献复习 被引量:4 2019年 T-大颗粒淋巴细胞白血病(T-cell large granular lymphocyte leukemia,T-LGLL)占成熟淋巴细胞白血病的2%~3%,好发于老年人,仅10%的患者在40岁前发病[1]。绝大多数患者淋巴细胞免疫表型为CD3+/CD4-/CD8+/CD16+/CD57+/TCRαβ+,称为经典型,其他亚型相对少见[1]。我们报道我科近期收治1例CD4-/CD8-/CD56+/TCRγδ+ T-LGLL伴再生障碍性贫血(AA)表现的病例,并结合文献进行复习,以期提高对这类疾病的认识。 王兰 周燕 唐静 詹茜 廖毅关键词:大颗粒淋巴细胞白血病 再生障碍性贫血 文献复习 TCRΓ 淋巴细胞免疫表型 T-CELL BCR/ABL伴JAK2突变阳性骨髓增殖性肿瘤1例并文献复习 被引量:4 2020年 目的探讨BCR/ABL伴JAK2突变阳性骨髓增殖性肿瘤(MPN)的诊疗方法并文献复习,以提高该疾病的诊疗水平。方法报告1例BCR/ABL伴JAK2突变阳性的MPN病例,结合文献报道的类似病例46例,总结该类疾病的临床特点。结果报告病例诊断为慢性髓系白血病合并原发性骨髓纤维化,采用伊马替尼和卢可替尼联合治疗有效。国内外有详细报道的类似病例共46例,按发现基因阳性的时间顺序分为BCR/ABL重排阳性组、JAK2阳性组、JAK2及BCR/ABL双阳性组,三组血常规指标差异无统计学意义(白细胞P=0.349,血红蛋白P=0.247,血小板P=0.944)。结论BCR/ABL和JAK2突变双阳性MPN较少见,其发病机制尚未明确,但突变发生的先后顺序对血常规指标无明显影响。两种基因相应的靶向药物联合应用可在一定程度上提高疗效。 李俊南 朱艳 詹茜 王利 刘林 罗小华关键词:骨髓增殖性肿瘤 慢性髓系白血病 MCMV早期感染对小鼠CD8^+ T、γδT和NK细胞功能的影响 被引量:1 2018年 目的通过体内和体外实验观察小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)早期感染对小鼠脾脏CD8^+ T、γδT和NK细胞亚群和功能变化的影响,以将感染增强免疫细胞功能的方法作为提高机体抗肿瘤免疫效应途径的理论基础。方法分别用5×10~4PFU(A组)、5×10~5PFU(B组)MCMV和无菌PBS(C组)腹腔注射小鼠,体内感染9 d;用1×10~4PFU(D组)、1×10~5PFU(E组)和1×10~6PFU(F组)MCMV感染离体小鼠脾脏淋巴细胞24 h和48 h,同时设置空白对照组(G组)。多色流式细胞术检测脾脏淋巴细胞表型和功能,ELISA检测体内感染组IFN-γ、IL-2和颗粒酶B的水平。结果与C组比较,MCMV体内感染小鼠后,MCMV特异性CTL,B组CD8^+ T细胞分泌的IFN-γ、IL-2和表达的颗粒酶B,A、B组γδT细胞表达的颗粒酶B、CD107a,B组NK细胞表达的CD107a水平均增加;A、B组未成熟NK细胞数减少,但成熟1阶段NK细胞明显增加;以上指标在A、B组间均无差异。ELISA结果提示A、B组IFN-γ、IL-2和颗粒酶B水平均较C组升高,且随病毒滴度增加而升高。与G组相比,体外感染24 h和48 h后D、E、F组CD8^+ T细胞表达的CD69,24 h后CD4^+ T细胞表达的CD69,24 h后F组CD8^+ T细胞分泌的IFN-γ,24 h和48 h后各感染组CD8^+ T细胞分泌的TNF-α以及24 h后D、E组CD4^+ T细胞分泌的TNF-α均增加,CD8^+ T细胞和CD4^+ T细胞各组间IL-2分泌和颗粒酶表达未见明显差异;与G相比,体外感染24 h和48 h后各感染组均可见NK细胞IL-2和颗粒酶B水平升高;以上表面分子、细胞因子和颗粒酶B的表达水平普遍随着病毒滴度的增加而升高。结论MCMV早期感染后CD8^+ T、γδT和NK细胞功能可能较前增强,这将为抗肿瘤免疫治疗提供理论基础。 李莎 朱艳 张在利 詹茜 夏瑜 杜鹃 张玉琳 王利 刘林 罗小华关键词:鼠巨细胞病毒 ΓΔT细胞 NK细胞 34例成人系别模糊的急性白血病病例分析 2023年 系别模糊急性白血病(Acute leukemia of ambiguous lineage,ALAL)是由免疫分型定义的高危急性白血病,其中急性混合细胞白血病(MPAL)患儿和成人的存活率分别为47%~75%和20%~40%,关于最佳治疗方案尚无共识^([1,2])。1995年Catovsky建立了混合白血病诊断标准,4年后由欧洲白血病免疫表型小组(EGIL)提出成为白血病免疫分型诊断基础。诊断MPAL时,每个系别得分至少2.5分,根据EGIL评分系统可分为T/髓(T/M)、B/髓(B/M)或T/B/髓(T/B/M)^([3])。 裴彩霞 詹茜 刘岑鸟 彭文 王利 刘林 李渊杰 廖毅 罗小华关键词:最佳治疗方案 白血病诊断 急性白血病 急性混合细胞白血病 免疫分型 病例分析