汪建华
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：北京生物工程研究所更多>>
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- 山梨糖脱氢酶的表达纯化及酶学性质研究
- 山梨糖脱氢酶是存在于普通生酮基古龙酸菌中负责维生素C两步发酵中山梨糖生物氧化的一种醌酶.本文采用pQE60在大肠杆菌对该酶进行了高效表达,通过离子交换和亲和层析的方法从工程菌细胞裂解物中纯化得到了山梨糖脱氢酶,并对该酶的...
- 张惟材汪建华王虹
- 关键词：山梨糖脱氢酶表达纯化酶学性质
- 文献传递
- 甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶的表达、纯化及酶活性质被引量：1
- 2017年
- 目的克隆甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase)基因adhA,在大肠杆菌中表达、纯化,并研究其酶学性质。方法 PCR扩增甲醛脱氢酶基因adhA,构建表达载体p TIG-AdhA,在BL21(DE3)中诱导表达,经Ni+亲和层析纯化,利用AHMT法进行体外酶学性质分析。结果成功构建甲醛脱氢酶表达载体,在大肠杆菌中AdhA表达量达总蛋白的50%以上,其中大部分表达产物可溶,纯化得到纯度为95%的甲醛脱氢酶。甲醛脱氢酶能以甲醛为底物,最适pH为7.0,最适反应温度为30℃,室温保存6 d后酶活约保留60%。结论在大肠杆菌中实现了甲基营养菌甲醛脱氢酶的可溶表达,在所考察的底物中,甲醛为该酶的最适底物。
- 景爱霞毕波李彤熊向华汪建华张惟材
- 关键词：醛脱氢酶克隆纯化酶学性质
