郭博
- 作品数：10 被引量：15H指数：3
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划长江学者和创新团队发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一例猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及综合防治措施被引量：1
- 2015年
- 无菌采集疑似猪伪狂犬病病猪脑组织,进行病毒的分离鉴定。经PCR检测为阳性的病料接种PK-15细胞进行病毒分离,将所分病毒暂命名为SC株。蚀斑实验测定病毒滴度,并采用PCR和琼扩实验对其进行进一步鉴定。结果:PRV阳性病料接种PK-15细胞,传至第5代后产生稳定细胞病变,主要表现为细胞变圆、变亮、聚堆且可见典型的空斑,而对照组细胞贴壁生长良好;基于PRV gE基因的PCR检测,扩增产物为378 bp,与预期目的条带一致;用病毒蚀斑技术测定该分离株的滴度为2.65×104 PFU/mL;琼扩实验显示病毒原液至32倍稀释后均能与PRV阳性血清形成可见沉淀线。以上结果均表明所送检病猪为PRV阳性,据此为猪场提出综合防治措施。
- 杨凡徐志文李萍方和俊郭博周远成
- 关键词：猪伪狂犬病病毒
- 一起引起仔猪死亡的病毒、细菌交叉感染实验室诊断
- 2015年
- 2015年6月,四川眉山某猪场发生仔猪大面积死亡,主要临床症状为精神沉郁、呼吸困难、呕吐、四肢站立不稳,发病率达75%,死亡率达70%以上,给该猪场带来了巨大的经济损失。剖检活仔猪可见肺部病变萎缩,肾脏有明显出血,肝脏表面有明显出血点以及肝脏边缘呈锯齿状,其他组织器官无明显病变。该场发病后使用抗生素治疗无效,通过流行病学调查和临床症状可初步判定为蓝耳病病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、
- 樊毅李萍毛汐语郭博许思遥李幽幽朱玲
- 关键词：蓝耳病病毒仔猪死亡细菌流行病学调查临床症状
- PEDV、TGEV、RV和PToV多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用
- 引言自2011年以来猪腹泻病广泛流行于我国各地,患病仔猪发病率、死亡率均可高达80%以上,给养猪业造成了严重经济损失。猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis,TGE),猪流行性腹泻(P...
- 刘小琬周远成杨凡方和俊郭博蔡雨函徐志文
- 文献传递
- 猪萨佩罗病毒real-time RT-PCR检测方法的建立
- 猪萨佩罗病毒感染(porcine sapelovirus infection)是由猪萨佩罗病毒所引起的，临床表现为猪脑脊髓灰质炎、肺炎、繁殖障碍、腹泻等多系统综合征及无明显症状的一种危害养猪业的重要传染病。本研究建立了一...
- 郭博
- 关键词：基因检测聚合酶链式反应
- 文献传递
- 一例猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及综合防治措施被引量：2
- 2016年
- 无菌采集疑似猪伪狂犬病病猪脑组织，进行病毒的分离鉴定。经PCR检测为阳性的病料接种PK-15细胞进行病毒分离，将所分病毒暂命名为SC株。蚀斑实验测定病毒滴度，并采用PCR和琼扩实验对其进行进一步鉴定。结果：PRV阳性病料接种PK-15细胞，传至第5代后产生稳定细胞病变，主要表现为细胞变圆、变亮、聚堆且可见典型的空斑，而对照组细胞贴壁生长良好；基于PRVgE基因的PCR检测，扩增产物为378bp，与预期目的条带一致；用病毒蚀斑技术测定该分离株的滴度为2.65×104PFU／mL；琼扩实验显示病毒原液至32倍稀释后均能与PRV阳性血清形成可见沉淀线。以上结果均表明所送检病猪为PRV阳性，据此为猪场提出综合防治措施。
- 杨凡徐志文李萍方和俊郭博周远成
- 关键词：猪伪狂犬病病毒
- 猪萨佩罗病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：7
- 2015年
- 为建立猪萨佩罗病毒（PSV）的检测方法,根据GenBank中PSV的5′端非编码区基因的保守序列设计并合成1对针对PSV的特异性引物,建立了基于SYBR GreenⅡ检测PSV的实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能很好地将PSV与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪嵴病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒区分开,特异性强。检测下限为6.37×10^2 copies/μL,比普通PCR敏感100倍,敏感性高。扩增产物的熔解曲线分析只有1个单特异峰。所建立的实时荧光定量RTPCR的批内变异系数为0.44%～1.14%,批间变异系数为0.70%～1.32%,重复性较好。应用该方法对采集自四川省部分地区的58份有腹泻症状的猪粪便进行检测,实时荧光定量RT-PCR检测阳性率为56.9%,与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%。结果表明,本研究建立的实时荧光定量RT-PCR特异性较强、灵敏度高,可用于该病毒的临床检测、定量分析及流行病学调查。
- 郭博方和俊刘小琬杨凡刘鹏娟黄剑波李萍徐志文朱玲
- 关键词：SYBR实时荧光定量RT-PCR
- 猪腺病毒3型SYBR GreenⅡ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：1
- 2015年
- 为建立一种针对猪腺病毒3型（PADV3）的检测方法,根据PADV3E1B基因保守序列设计1对引物,建立了检测PADV3的SYBR GreenⅡ实时荧光定量PCR。结果显示,该方法不能对猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、大肠杆菌、猪链球菌2型检测到荧光信号,特异性好;检测PADV3时在3.7×10^2-3.7×10^9 copies/μL范围内具有良好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增产物的熔解曲线仅出现单一特异峰,无引物二聚体,熔解温度为90.5℃;该方法组内变异系数为0.17%-1.23%,组间变异系数为0.73%-2.23%,重复性较好。应用该方法对临床56份腹泻粪便检测,检出11份阳性,且与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%。上述结果表明,建立的实时荧光定量PCR为PADV3感染的早期诊断、流行病学调查奠定了技术基础。
- 方和俊郭博黄剑波刘小琬刘鹏娟李萍杨凡朱玲徐志文
- 关键词：SYBR实时荧光定量PCR
- 猪腺病毒血清3型PCR检测方法的建立及其初步流行病学调查被引量：3
- 2015年
- 为建立一种猪腺病毒3型（PADV-3）的检测方法，本研究根据PADV-3E1B基因保守序列设计一对引物，建立了PcR检测方法。特异性试验结果显示，该方法仅对PADV．3扩增出247bp的目的片段。而对猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、大肠杆菌、猪链球菌均无特异性扩增；敏感性试验结果显示，该方法对PADV-3最低检测量为3．7×10-5拷贝／μL。应用该方法对我国四川省23个规模化猪场进行流行病学调查，结果显示PADV．3阳性率达到14．72％，在腹泻猪群中阳性率为17．34％，并且显著高于非腹泻猪群（6．41％），PADV．3在保育猪群中感染率最高（26．32％），表明PADV．3在我国四川省猪群中广泛流行。本研究建立的PCR检测方法特异性强、灵敏度高，可以应用于猪群中PADV．3的流行性调查。
- 方和俊刘鹏娟郭博刘小琬李萍杨凡黄建波朱玲徐志文
- 关键词：PCR检测流行病学调查
- 四川省腹泻病猪的猪萨佩罗病毒检测及1B基因序列比较分析被引量：3
- 2016年
- 为了解猪萨佩罗病毒（porcine sapelovirus,PSV）的流行及变异情况,采集2015-2016年四川地区12个县市34个猪场共计428份腹泻病料,采用QRT-PCR方法对PSV进行检测。结果显示：在428份病料中,共有114份为PSV阳性,阳性率为26.6%;所检测的34个猪场中,共有20个猪场显示PSV阳性,猪场阳性率为58.8%,表明PSV在四川地区普遍存在。此外,对来自不同县市共14份PSV阳性病料1B全基因进行PCR扩增,通过分子克隆,测序,再利用序列分析软件对四川部分地区猪萨佩罗病毒1B基因进行序列分析。结果表明,14条猪萨佩罗病毒1B基因核苷酸序列及推导出的氨基酸序列相似性分别为90.6%~100%和97.1%~100%。遗传进化分析显示,该研究获得的四川株与已知中国株分属于一个大的分支,说明我国猪萨佩罗病毒1B基因序列较为保守,没有发生大的基因变异。所有中国分离株与韩国株、德国株、英国株处在不同分支,又说明我国PSV的流行毒株可能存在独立进化。
- 李雨濛郭博徐逸飞陈瑛琪蔡瑶李小璟龚双燕徐志文朱玲
- 关键词：流行病学调查遗传进化分析
- 基于猪传染性胃肠炎病毒S基因纳米粒子PCR方法的建立
- 引言猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种以感染猪只出现呕吐、重度腹泻以及2周龄以内仔猪高死亡率等主要临床特征的急性传染病,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。因此,建立快速、准确的病原诊断方法刻不容缓...
- 杨凡刘小琬李萍方和俊郭博刘鹏娟卓秀萍徐志文朱玲
- 文献传递
