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梁宇杰: 作品数：21 被引量：10H指数：2; 供职机构：深圳市第二人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>

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组蛋白去乙酰化调控软骨细胞Ⅱ型胶原表达的机理研究: 2015年; 目的：探讨通过TSA抑制组蛋白去乙酰化水平，研究组蛋白去乙酰化对软骨细胞表型相关基因的影响及其机制，从表观遗传学角度为维持软骨细胞表型提供新的思路。方法体外培养人关节软骨细胞，建立软骨细胞去分化模型，采用不同浓度TSA刺激，在不同时间点收集细胞，提取总RNA，利用qRT-PCR检测Wnt-5a、SOX-9、COL-Ⅱ、COL-Ⅰ的mRNA表达情况。利用免疫荧光及Westerblot进行COL-Ⅱ蛋白表达水平的检测。结果与对照组比较，TSA（0.25~1.0μmol/L）显著降低COL-ⅡmRNA表达水平及蛋白表达水平，升高Wnt-5a和SOX-9 mRNA表达水平；抑制Wnt-5a信号通路减弱TSA对COL-Ⅱ的抑制效应。结论 TSA通过激活Wnt-5a和SOX-9从而抑制COL-Ⅱ的表达，导致软骨细胞表型丧失。因此，组蛋白去乙酰化通过降低Wnt-5a和SOX-9，升高COL-Ⅱ的表达水平，发挥维持软骨细胞表型的作用。; 王光辉段莉梁宇杰费志强王大平; 关键词：组蛋白去乙酰化 TSA 软骨细胞

基于外泌体平台的新冠病毒疫苗制备方法: 本发明涉及基因工程和生物医学领域，具体为基于外泌体平台的新冠病毒疫苗制备方法，包括以下步骤：步骤一：构建Spike‑lamp2b重组质粒；步骤二：提取细胞上清中的分泌的外泌体；与现有技术相比，本发明的有益效果是：实现了外...; 段莉梁宇杰徐晓夏江王大平

体外诱导脐带血间充质干细胞向软骨细胞分化研究进展被引量：3: 2016年; 种子细胞是软骨组织工程三大要素之一。脐带血间充质干细胞(UCB-MSC)可被诱导转化为软骨细胞,具有构建组织工程化软骨的潜能,是目前软骨组织工程领域研究的新热点。UCB-MSC作为一种新型干细胞可用于临床治疗关节软骨缺损。该文就体外诱导UCB-MSC向软骨细胞分化研究进展作一综述。; 李兴福段莉梁宇杰熊建义吴汉伟王大平; 关键词：软骨组织工程软骨细胞脐带血间充质干细胞

靶向软骨细胞药物递送系统的制备方法及其应用: 本发明涉及基因工程和生物医学领域，公开了靶向软骨细胞药物递送系统的制备方法及其应用，该方法包括以下步骤：S1：构建质粒；S2：筛选稳定细胞株；S3：提取软骨亲和靶向外泌体；S4：负载外源性miRNA‑140；S5：miR...; 梁宇杰徐丽梅段莉徐晓; 文献传递

一种透明软骨细胞及制备方法: 本发明公开了一种透明软骨细胞的制备方法，相对于现有的采用药物诱导的方法，该制备方法以含有TGF－β1的软骨细胞上清诱导间充质干细胞分化成为透明软骨细胞，有效地克服了间充质干细胞向纤维软骨细胞分化的现象，制得的透明软骨细胞...; 段莉王大平李兴福梁宇杰刘启颂陈洁琳王大明刘威熊建义朱伟民; 文献传递

检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针、检测方法、DNA和表达载体: 本发明提供了一种检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，包括通过MMP-13特异性识别降解多肽底物连接的FRET荧光供体蛋白和FRET荧光受体蛋白。本发明的探针，其利用FRET荧光供体蛋白、FRET荧光受体蛋白分别作...; 王大平梁宇杰段莉; 文献传递

检测细胞外基质MMP13的BRET探针、基因、表达载体和构建方法: 本发明提供了一种检测细胞外基质MMP13的BRET探针，包括BRET生物发光供体和BRET受体荧光蛋白，以及连接BRET生物发光供体和BRET受体荧光蛋白的MMP13特异性识别降解的多肽底物；BRET生物发光供体为具有序...; 王大平梁宇杰段莉李子刚; 文献传递

大规模生产符合GMP规范的临床级外泌体: 本发明属于生物技术领域，公开了大规模生产符合GMP规范的临床级外泌体，该方法包括以下步骤：S1：获取细胞沉淀，首先抽取病人膝关节积液，离心获得细胞沉淀，留取备用；S2：培养间充质干细胞，在符合GMP的要求下利用无血清培养...; 段莉王大平梁宇杰徐晓李兴福欧阳侃; 文献传递

一种可注射型软骨修复超分子水凝胶及其制备方法: 本发明适用于水凝胶技术领域，提供了一种可注射型软骨修复超分子水凝胶及其制备方法。所述超分子水凝胶，包括丙烯酰化β-环糊精、明胶和硫酸软骨素，其中，所述明胶和所述硫酸软骨素以酰胺键相连；所述丙烯酰化β-环糊精与所述明胶中的...; 王大明王大平冯茜刘威朱伟民段莉边黎明黄江鸿梁宇杰刘启颂熊建义; 文献传递

抑制miR-140腺相关病毒载体的构建及鉴定被引量：1: 2016年; 目的构建一种抑制microRNA-140(miR-140)表达的腺相关病毒(AAV)载体系统,从而实现对细胞内miR-140表达水平的高效抑制。方法应用分子生物学方法将腺相关病毒载体与miRNA诱饵microRNA tough decoy RNAs(Tu D)相结合,构建p AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP表达质粒;用脂质体转染法将p AAVU6-miR-140-Tu D-EGFP表达质粒和p AAV-RC、p AAV-Helper质粒共转染至AAV-293细胞中,包装生成携带miR-140-Tu D的重组腺相关病毒r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP。进一步将病毒感染骨肉瘤细胞U2OS,定量RT-PCR检测miR-140-Tu D对细胞内miR-140基因的沉默效果,并测定病毒的感染滴度。结果DNA测序证明miR-140-Tu D已成功构建到表达质粒p AAV-U6-MCS-EGFP中;AAV-293细胞表达绿色荧光蛋白提示共转染成功;r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP感染滴度约为4.1×1010·m L-1;包装的重组腺相关病毒r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP感染U2OS细胞后,能显著下调U2OS细胞miR-140基因的表达水平。结论携带miR-140-Tu D重组腺相关病毒的包装成功,该病毒具有稳定沉默miR-140基因从而降低其表达水平的功能。; 贺鹏段莉梁宇杰; 关键词：腺相关病毒 TOUGH DECOY 骨肉瘤细胞