王少华
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：山西省高等学校优秀青年学术带头人支持计划项目山西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 抗栓小肽RWR的毒理学试验研究
- 2015年
- 目的对具有自主知识产权的抗栓小肽RWR进行毒理学研究和安全性评价。方法分别对RWR进行小鼠急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核形成试验、小鼠精子畸形试验和大鼠30d喂养试验。结果急性毒性试验动物经腹腔注射MTD大于120mg/kg;骨髓细胞微核试验、精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验对大鼠体质量、食物利用率、脏器系数、血生化等各项指标均未见不良影响。病理组织学观察肺、肝、脾、肾、心脏均未见明显与注射样品有关的组织学病理改变。结论在本试验条件下,RWR对动物的生长发育、造血功能、肝肾功能、器官组织均无明显毒性作用。
- 郑海锋赵海霞王少华杨涛杨利军
- 关键词：毒理学安全性
- 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在E.coil中的表达、纯化及其生物学活性
- 2015年
- 目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P>0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P<0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。
- 王少华郑海锋王宇涛杨利军杨涛
- 关键词：可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体大肠埃希菌基因表达纯化生物学活性
