邓瑞坡
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒对海兰白鸡感染和传播特性的研究
- 2015年
- 为研究H9N2亚型禽流感病毒（AIV）对海兰白鸡的感染和传播特性,将80只4周龄海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只,采用100～107EID50/0.4 mLH9N2 AIV以滴鼻和点眼方式攻毒,24 h后放入同居组。感染14 d内每天进行临床观察,采集咽拭子和泄殖腔拭子用于病毒分离,感染后7、10、14 d测定HI抗体滴度。结果表明：4周龄海兰白鸡感染H9N2 AIV后未出现明显的临床症状;感染剂量为10^0～10^1 EID50/0.4 mL的感染组和同居组均未分离到病毒;感染剂量为10^2～10^3 EID50/0.4 mL的感染组排毒期为2～6 d,同居组排毒期为4～6 d;感染剂量为10^4～10^7 EID50/0.4 mL感染组排毒期为1～6 d,同居组排毒期为2～8 d;感染剂量为10^2～10^7 EID50/0.4 mL感染组和同居组鸡分别于感染后7和10 d开始产生抗体,第14天感染组和同居组鸡的平均抗体滴度分别为（7.8±1.4）log2和（6.7±1.1）log2。结果显示该毒株使4周龄海兰白鸡全部感染的最低感染剂量为103EID50/0.4 mL,以106EID50/0.4 mL感染鸡,能刺激感染组与同居组产生较高的HI抗体,表明106EID50/0.4 mL H9N2亚型AIV能在海兰白鸡体内建立有效感染和传播。
- 周长良邓瑞坡王伟臧凤霞冉多良陈洪岩孟庆文
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒
- H9N2亚型AIV对海兰白鸡感染和传播特性的研究
- 目的建立H9N2亚型禽流感病毒感染海兰白鸡的感染模型,了解其对海兰白鸡的致病性,为评价抗流感转基因鸡研究奠定基础。方法将80只4周龄的海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只;攻毒剂量为100107 ...
- 孟庆文周长良王伟邓瑞坡臧凤霞陈洪岩
- 关键词：H9N2禽流感病毒
- 鸭RIG-1基因的组织表达及体外抗禽流感病毒活性研究被引量：5
- 2013年
- 视黄酸诱导基因蛋白1(RIG-1)是一类模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。为检测金定鸭RIG-1基因的组织特异性表达水平和体外抗禽流感病毒(AIV)活性,本研究采用RT-PCR方法扩增鸭RIG-1基因并克隆于pcDNA3.1(+)中构建重组真核表达质粒pcDNA-RIG-1,应用荧光定量PCR方法检测该基因在鸭不同组织中的特异性表达水平;并将pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞,通过病毒TCID50测定、间接免疫荧光、荧光定量PCR的方法检测RIG-1的抗AIV活性。结果显示,从金定鸭脾脏中扩增的RIG-1基因的CDS序列大小为2 802 bp,编码934个氨基酸;RIG-1基因在不同组织中的表达各不相同,在鸭的脾脏和肾脏中表达量较高,肝脏中度表达,心脏、肺脏和肌肉低度表达;pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞组与pcDNA3.1(+)转染组相比,病毒TCID50及相对表达量显著降低,IFN-β及Mx的相对表达量显著升高,表明RIG-1产生了显著的抗AIV作用。本研究为禽类RIG-1蛋白功能和家禽的天然免疫研究奠定了基础。
- 张雅春胡卫杰王建超王伟邓瑞坡李越赵颖慧孟庆文
- 关键词：抗病毒
- H9N2亚型AIV对海兰白鸡感染和传播特性的研究
- 目的 建立H9N2亚型禽流感病毒感染海兰白鸡的感染模型,了解其对海兰白鸡的致病性,为评价抗流感转基因鸡研究奠定基础.方法 将80只4周龄的海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只;攻毒剂量为100 ～...
- 孟庆文周长良王伟邓瑞坡臧凤霞陈洪岩
- 关键词：H9N2禽流感病毒
- 郑州部分市售酸奶中乳酸菌的分离鉴定与益生特性的研究被引量：2
- 2011年
- 目的调查郑州部分市售的酸奶中嗜热乳酸链球菌与保加利亚乳酸杆菌存在情况与益生特性。方法无菌采取样品进行乳酸菌分离,并对分离菌进行形态学、生化特性、产酸性、耐酸性、耐胆汁性、高温耐受性和抑菌性等生物学特性研究。结果从8种品牌中分离到4株保加利亚乳酸杆菌、7株嗜热链球菌,且分离菌株均能产酸、对高温具有一定的耐受性,在pH 3.0以上均能生长良好,而且分离菌的抑菌物质具有一定的热稳定性,保加利亚乳酸杆菌经70、100℃热处理抑菌活性基本不变。嗜热链球菌经70℃热处理后保留90%以上的抑菌活性,但经100℃高温处理后抑菌活性有所降低。分离菌产生的抑菌物质对胰蛋白酶敏感,保加利亚乳酸杆菌在偏中性条件下抑菌活性较高,而嗜热链球菌在偏中性条件下丧失抑菌活性。结论本研究为河南市售酸奶质量以及为消费者提供有利信息奠定基础。
- 杨霞陈陆杜魏红邓瑞坡刘红英姚惠霞王川庆
- 关键词：酸奶嗜热链球菌保加利亚乳酸杆菌生物学特性
- 鸡Mx蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2013年
- Mx蛋白为GTP酶动态蛋白家族成员,已被证明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用。为制备鸡Mx蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸡Mx蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得4株稳定分泌抗鸡Mx蛋白抗体的杂交瘤细胞株。间接ELISA测定4株MAb纯化后腹水的效价介于1∶3.2×104～1∶2.5×105之间。Western blot结果证实4株MAb均具有良好的反应性;间接免疫荧光试验表明其中一株MAb与真核表达的鸡Mx蛋白发生反应。本研究为鸡Mx蛋白功能及表达鸡Mx蛋白的转基因动物等研究奠定了基础。
- 胡卫杰王伟孙建华邓瑞坡张雅春尹海畅孟庆文
- 关键词：MX蛋白单克隆抗体
- 表达抗流感Mx-RNAis基因转基因鸡研究
- 本研究采用赤道开窗法将同时表达Mx、RNAis双基因重组慢病毒注射入新生种蛋胚盘下腔，制备转基因(TG)鸡，通过PCR,RT-PCR,Southern blot,Western blot及Tail-PCR方法等方法检测F...
- 孟庆文王伟田进王建超邓瑞坡陈洪岩
- 关键词：转基因鸡
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒感染海兰白鸡模型的建立
- 2015年
- 为建立H5N1亚型禽流感病毒感染海兰白鸡模型,本研究选取1株鹅源H5N1高致病性禽流感病毒A/goose/guangdong/1/96(H5N1)(简称GD1/96),测定其对4周龄海兰白鸡的半数致死量。感染模型试验中,将30只4周龄海兰白鸡随机分成3组,每组10只,5只直接感染,5只同居,试验组设置一个重复,将病毒液稀释至104.5EID50,滴鼻、点眼各0.1mL,对照组接种PBS,感染后24h放入同居鸡;感染后连续观察14d,记录死亡时间,每天采集咽喉拭子和泄殖腔拭子;感染组和同居组第3、5天各剖解3只鸡,采集气管、肺脏、脑、脾脏、肾脏和十二指肠,进行病毒分离;qRT-PCR法分析感染组和同居组第3、5天鸡肺组织中IFN-α和TNF-α的相对表达量。结果显示,GD1/96株的鸡胚半数感染量(EID50)为10-8.167/0.1mL,对4周龄海兰白鸡的半数致死量为104.5 EID50。感染模型试验结果显示,以104.5 EID50的攻毒剂量感染海兰白鸡,感染组鸡在感染后8d全部死亡;在感染和同居3d后,各组鸡的咽喉拭子和泄殖腔拭子均可检测到病毒;感染和同居后第3、5天,各组鸡的6种组织中均可分离到高滴度的病毒;IFN-α和TNF-α在感染组和同居组的鸡肺脏组织中的表达量均显著增加(P<0.05)。本试验建立了海兰白鸡的H5N1亚型禽流感病毒感染模型,为H5N1亚型禽流感病毒的致病机理及表达抗流感基因转基因鸡的研究奠定了基础。
- 王伟张雅春邓瑞坡李越赵颖慧陈洪岩孟庆文
- 关键词：禽流感H5N1
