康跻耀
- 作品数：28 被引量：52H指数：4
- 供职机构：中国科学院过程工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 胶原覆层型动物细胞培养微载体制备方法研究
- 目的:以魔芋葡甘聚糖(KGM)微球为基质,用1,4-丁二醇二缩水甘油醚将KGM微球活化,将胶原蛋白覆层到微球上并对胶原层进行交联,制备覆层均匀、稳定的微载体.考察偶联条件对胶原层的影响以及微载体细胞培养效果的影响.
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- 康跻耀张宁周炜清孙李靖张贵锋马光辉苏志国
- 关键词：胶原蛋白偶联微载体
- 基于生物质谱的胶原蛋白定量检测方法被引量：6
- 2015年
- 本研究旨在建立一种基于特征多肽的胶原定量检测方法,通过序列比对的方法筛选胶原蛋白特征多肽,利用胰蛋白酶将牛Ⅰ型胶原蛋白标准品进行酶解,采用液质联用技术(HPLC-MS)对特征多肽进行检测,建立特征多肽丰度与胶原蛋白浓度对应关系并用于实际样品分析。结果表明,牛Ⅰ型胶原蛋白中检测出6种特征多肽,其中多肽GEAGPSGPAGPTGAR由于其丰度高且二级质谱稳定适合作为定量检测的特征多肽,多肽信号强度与蛋白浓度(0.1-3.0 mg/m L)呈良好线性关系。将所建方法用于实际样品分析,牛跟腱胶原蛋白含量为90.2%,胶原海绵中胶原蛋白含量为93.4%,检测结果与基于氨基酸组成分析的结果一致。该研究表明基于HPLC-MS的特征多肽分析方法进行胶原蛋白定量检测具有可行性,该方法在含胶原蛋白医疗器械等生物制品质量控制方面具有应用前景。
- 孙坤杨帆孔英俊康跻耀曹玮杨小雁查圣华张贵锋王明林
- 关键词：胶原蛋白
- 胶原涂层对3D打印种植体表面生物相容性的影响被引量：5
- 2017年
- 背景:金属等惰性生物材料存在生物相容性差、组织结合力弱等问题,从而导致种植牙或骨植入物的使用效果较差。因此,如何增强惰性生物材料的生物相容性成为了近几年的研究热点。目的:对钛合金材料进行胶原覆层并评价其生物相容性。方法:以钛合金片(Ti6Al4V)为基质,Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原为覆层材料,3-氨基丙基三乙氧基硅烷(KH550)为偶联剂,对基于3D打印的钛合金片进行胶原覆层。将覆层材料用于小鼠前成骨细胞(MC-3T3-E1)培养,通过细胞培养效果评价其生物相容性,并通过细胞蛋白差异性识别比较不同类型胶原对细胞分化的影响。结果与结论:(1)当钛合金片(Φ10 cm)表面含氮量为8.41%时,Ⅰ型胶原覆层量为0.81 mg,Ⅱ型胶原覆层量为0.77 mg;(2)与空白钛合金片相比,经胶原覆层后的钛合金片细胞贴附状态更好,铺展面积更大,且细胞增殖速率更快,活性更强;(3)Ⅰ型胶原覆层材料培养的细胞多表达与基质合成有关的蛋白,而Ⅱ型胶原覆层材料培养的细胞多表达与矿化及钙盐沉积有关的蛋白;(4)结果表明,胶原覆层可提高钛合金材料的生物相容性,且不同胶原类型可影响细胞表达不同功能性蛋白。
- 李赛娜康跻耀高建萍高毅罗元明张贵锋王明林
- 关键词：种植体生物相容性细胞蛋白液质联用
- 分子量对胶原蛋白肽吸收速率的影响研究
- 本文采用三种不同平均分子量胶原蛋白多肽、人工合成多肽和脯氨酸(Pro)对分别大鼠进行灌胃实验，分时取样并分析了大鼠血液和尿液中经脯氨酸(Hyp)的含量和多肽GPP的动态变化，探讨了分子量范围对多肽吸收速率的影响和脯氨酸羟...
- 张宁康跻耀高建萍孔英俊张贵锋苏志国
- 关键词：吸收速率分子量动物实验
- 文献传递
- 基于超高压技术的牛骨蛋白绿色提取工艺初探被引量：1
- 2023年
- 为研究绿色牛骨蛋白提取工艺,利用超高压技术在温和环境中破坏骨结构,加速牛骨蛋白释放。以脱钙牛骨粉为实验对象,通过单因素和响应面优化实验,研究保压时间、作用压力和环境pH在牛骨蛋白超高压提取工艺中对蛋白提取率的影响,得出超高压提取牛骨蛋白的最佳条件。响应面实验回归模型显著,误差较小,模型适用于本实验理论解释。结果表明,在保压时间54 min、作用压力189 MPa和环境pH 6.7时蛋白提取率最高,可达35.62%,与理论模型预测值吻合度达98.8%。将提取次数增加到3次,提取率可达54.2%,结合酶提取率可达59.3%。建立超高压提取牛骨蛋白工艺,实现牛骨蛋白的绿色提取。
- 杨浩张扬高建萍康跻耀孔英俊张贵锋张万忠
- 关键词：牛骨蛋白超高压提取响应面优化
- 一种动物细胞培养用胶原蛋白覆层微载体及其制备方法
- 本发明公开了一种动物细胞培养用胶原蛋白覆层微载体及其制备方法。本发明的微载体以魔芋葡甘聚糖微球为基质，用胶原蛋白覆层微球。本发明的微载体的制备方法如下：将基质微球中加入活化试剂与催化剂，在碱性环境下进行活化反应；将上步制...
- 马光辉周炜清康跻耀张贵峰苏志国孙李靖李娟
- 文献传递
- 羟基化修饰对大鼠胶原热稳定性的影响研究被引量：1
- 2015年
- 采用差示扫描量热仪(DSC)研究羟脯氨酸(Hyp)含量对胶原热稳定性的影响。以不同周龄BN大鼠皮肤为原料制备了胶原,分析制备胶原中Hyp的含量;采用DSC测定不同Hyp含量胶原的临界变性温度及焓变;采用圆二色光谱(CD)检测提取胶原的二级结构。结果表明,提取胶原在41.3℃发生三螺旋解聚,CD光谱分析结果表明,当样品经临界变性温度处理后,部分三螺旋结构转化为无规则线圈结构。胶原变性过程中所需热量与羟脯氨酸含量呈正相关,实验建立了胶原热变性过程中焓变与Hyp含量的关系。该研究表明胶原中脯氨酸羟基化修饰是影响胶原热稳定性的关键因素。
- 焦昀孔英俊高建萍康跻耀孙坤査圣华张贵锋张贵锋
- 关键词：胶原热稳定性差示扫描量热仪圆二色光谱
- 褐铁矿型和蛇纹石型红土镍矿氯化浸出-选择性水解耦合提镍钴工艺研究
- 2023年
- 针对褐铁矿型和蛇纹石型红土镍矿开展了以盐酸为初始浸出介质的褐铁矿型红土镍矿氯化浸出-蛇纹石型红土镍矿选择性水解耦合提取镍钴工艺研究。结果表明,酸矿质量比5∶4、液固质量比4∶1、反应温度100℃、反应时间30 min条件下,氯化浸出褐铁矿型红土镍矿时Ni、Co、Fe浸出率分别为99.6%、100%、96.9%;采用褐铁矿型红土镍矿浸出液与浓盐酸按体积比1∶4调配,在液固比1∶1、温度150℃、浸出时间90 min条件下浸出,蛇纹石型红土镍矿中Ni和Co浸出率分别达到84.9%和100%。
- 王洋洋王硕崔伟勇李永利郭强郭强
- 关键词：红土镍矿氯化浸出钴
- 强烈炽热球菌几丁质酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组成与结构分析被引量：4
- 2018年
- 利用全基因合成方法合成了强烈炽热球菌(Pyrococcus furiosus)的几丁质酶编码基因并在大肠杆菌(Escherichia coli)中实现了可溶表达。利用该酶对低脱乙酰度壳聚糖进行水解并对获得的壳寡糖产物进行组成及结构分析。分子排阻高效液相色谱结果显示,水解产物相对分子质量分布范围为1 000~5 000。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析结果显示,酶解产物中包含聚合度2~9、不同脱乙酰度的壳寡糖。核磁共振对酶解产物壳寡糖的结构鉴定结果显示,所有寡糖组分的还原端均主要由两个连续的N-乙酰氨基葡萄糖组成。综上,本研究利用来源于强烈炽热球菌的几丁质酶制备了还原末端结构确定的低脱乙酰度壳寡糖,为复杂结构壳寡糖结构与功能关系研究提供了理论支持。
- 程功焦思明任立世冯翠康跻耀杜昱光
- 关键词：几丁质酶壳寡糖基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 用于MALDI-TOF MS分析的毛细管层析柱制备方法研究
- 2014年
- 研究了一种用于MALDI-TOF MS分析中样品预处理毛细管亲和层析柱的制备方法。首先采用硫酸和双氧水氧化法将羟基引入到石英毛细管内表面,进一步使用氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)对毛细管进行修饰以将氨基偶联到毛细管内表面;采用1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)将魔芋葡甘聚糖(KGM)进行活化,将活化后的KGM与毛细管上的氨基进行了偶联,在此基础上将模型蛋白(胰蛋白酶)偶联到毛细管内KGM,成功制备出毛细管亲和层析柱,考察了KGM和环氧基含量对模型蛋白偶联量及其样品预处理效果的影响。结果表明,KGM分子量是影响毛细管层析柱上蛋白偶联量的关键因素,以胰蛋白酶抑制剂为目标物结合MALDI-TOF MS对亲和层析柱的分离效果进行了评价,证明了偶联胰蛋白酶的毛细管层析柱可有效实现胰蛋白酶抑制剂的分离和浓缩。基于表面处理和KGM衍生的毛细管亲和层析柱制备技术具有可行性,并可用于MALDI-TOF MS分析的样品预处理。
- 赵媛媛杨帆杨小雁孔英俊康跻耀王明林张贵锋苏志国
- 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱毛细管魔芋葡甘聚糖氨基硅烷
