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全人源化抗中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体: 本发明公开了全人源化抗中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体。本发明公开的中和抗体，由重链和轻链组成，轻链由VL和CL组成，重链由VH和CH组成，VH和VL均由决定簇互补区和框架区组成，决定簇互补区由CDR1、CDR2和CDR3...; 谭文杰周剑芳邓瑶秦堃卢帅余双庆刘雪王文玲舒跃龙; 文献传递

中东呼吸综合征冠状病毒的实验室检测以及疫苗和治疗研究进展被引量：5: 2016年; 中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是2012年首次发现的具有高病死率、可感染人的一种新型冠状病毒,给全球公共健康带来严重威胁.目前,针对MERS-CoV的病毒分离、免疫学及核酸检测方法已经建立,特异性的疫苗和治疗药物也正在研发之中,成为控制MERS-CoV感染蔓延的有力武器.本研究就MERS-CoV的实验室检测及疫苗和治疗研究进展作一综述,以期为MERS-CoV的防控提供参考.; 卢帅秦堃谭文杰; 关键词：疫苗

宠物犬冠状病毒的筛查检测、基因特点及抗原性初步分析: 背景：　　冠状病毒(Coronavirus，CoV)是冠状病毒科、冠状病毒属的有包膜的单股正链RNA病毒。冠状病毒的感染宿主范围广泛，在多种动物和人类都有流行。目前已知能感染人的冠状病毒有6种，人冠状病毒HCoV-229...; 卢帅; 关键词：宠物犬冠状病毒基因多样性抗原性血清学诊断; 文献传递

中东呼吸综合征冠状病毒刺突蛋白受体结合区蛋白的原核表达纯化及鉴定: 2016年; 目的对中东呼吸综合征冠状病毒（MERS—CoV）刺突蛋白受体结合区（RBD）蛋白进行原核表达、纯化与鉴定及抗原性初步研究。方法人工合成密码子优化的MERS—CoVRBD编码基因，克隆至pET30a（＋）载体，构建重组表达质粒，转化至BL21（DE3）。利用IPTG诱导，探索优化表达条件，并用镍离子亲和层析纯化，SDS—PAGE和Westernblot进行鉴定，并采用间接ELISA对原核表达的RBD进行抗原活性和特异性初步分析。结果重组RBD蛋白主要以包涵体形式表达，以37℃0．5mmol／LIFFG诱导4h表达量最高；变性复性后纯化获得了较纯的重组RBD蛋白，相对分子质量大小约为29×10^3，与预期一致；Westernblot表明其能与感染MERS—CoV的小鼠血清发生特异性反应；间接ELISA显示原核表达RBD蛋白在检测正常和MERS—CoV感染患者血清方面表现出较好的抗原活性和特异性。结论本研究首次利用原核表达系统成功表达并纯化获得重组MERS—CoVRBD蛋白，为MERS—CoV的免疫学检测及疫苗学研究提供了基础。; 卢帅蓝佳明陈迎珠周剑芳秦堃楼永良谭文杰; 关键词：冠状病毒原核表达纯化

嵌合流感病毒血凝素抗原(cH7/3)在昆虫杆状病毒系统中的表达及生物活性鉴定: 2015年; 血凝素(Hemagglutinin,HA)是流感病毒表面的主要抗原,由高度变异的头部和相对保守的茎部组成。为明确不同亚型来源的HA头部和茎部构成的嵌合HA的生物活性及应用可能,本研究利用昆虫杆状病毒系统表达了含有H7亚型流感HA头部和H3亚型茎部的嵌合HA(cH7/3)蛋白,纯化后对该嵌合HA蛋白生物学特性进行鉴定。结果显示,重组蛋白cH7/3可在昆虫细胞中分泌表达,表达量为1.4mg/mL,cH7/3蛋白大小约为70kD,纯化的cH7/3蛋白以三聚体形式存在并具血凝活性及抗原反应性。此研究为进一步筛选流感病毒HA茎部抗体和疫苗的研发奠定基础。; 王东红秦堃郭金磊赵晓鹏卢帅舒跃龙周剑芳; 关键词：流感病毒

全人源化抗中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体: 本发明公开了全人源化抗中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体。本发明公开的中和抗体，由重链和轻链组成，轻链由VL和CL组成，重链由VH和CH组成，VH和VL均由决定簇互补区和框架区组成，决定簇互补区由CDR1、CDR2和CDR3...; 谭文杰周剑芳邓瑶秦堃卢帅余双庆刘雪王文玲舒跃龙

MERS-CoV棘突蛋白表位多肽疫苗设计及在小鼠体内免疫效果分析被引量：2: 2016年; 筛选有效的免疫原,研制安全有效的疫苗,是预防中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)感染的有利武器。本研究应用生物信息学方法,预测了MERS-CoV棘突蛋白(Spike,S)上的多肽抗原表位。基于生物信息学分析结果人工合成9条多肽并偶联钥孔戚血蓝素后,分别免疫BALB/C小鼠,检测了多肽诱导的体液免疫和细胞免疫应答。结果表明,YVDVGPDSVKSACIEVDIQQTFFDKTWPRPIDVSKADGI的多肽,三次免疫小鼠后,可在小鼠体内诱导较强的IgG抗体(滴度达1∶10 000)和较高水平的抗原特异性细胞免疫应答。本研究结果为基于生物信息学预测的多肽疫苗的设计及MERS-CoV疫苗的研制提供了科学参考。; 蓝佳明卢帅邓瑶文波陈红王文谭文杰; 关键词：表位疫苗

不同剂量DPP4转导后MERS-CoV感染小鼠模型的临床及生物学特征比较被引量：5: 2015年; 本研究探讨不同剂量DPP4转导小鼠后对中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)感染建模及其生物特性的影响。首先将表达MERS-CoV受体DPP4的重组腺病毒以高剂量(2.5×108 PFU/只)、低剂量(0.5×108 PFU/只)分别转导转导BALB/c小鼠,继而滴鼻接种MERS-CoV,建立MERS-CoV感染小鼠模型。对成功构建的小鼠感染模型分别进行体征、病毒复制、免疫病理及抗体应答的比较分析。结果表明:两种剂量DPP4转导后MERS-CoV感染小鼠,均可引起典型肺炎表征,在小鼠肺部能检测到病毒复制及免疫病理,但高剂量DPP4转导组小鼠肺炎体征与肺病理损伤更明显,病毒复制水平亦高于低剂量DPP4转导组。小鼠感染建模后2w后可检测到结构蛋白特异抗体与中和抗体,高剂量DPP4转导组抗体应答亦明显高于低剂量转导组。本研究以两种剂量DPP4转导小鼠,均成功建立了MERS-CoV感染的小鼠模型,受体DPP4转导水平可影响MERS-CoV感染小鼠体征、病毒复制及抗体应答。; 姚艳丰蓝佳明李枫棣牛培华于品卢帅鲍琳琳谭文杰秦川; 关键词：小鼠抗体应答

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卢帅