- 扩张型心肌病患者中miR-155表达下调
- 背景与目的:大量研究提示扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy, DCM）与细胞和体液自身免疫反应密切相关，已发现在DCM患者中CD4+CD25+FOXP3+辅助性调节性T（Regulatory T,...
- 黄粮
- 关键词：扩张型心肌病MIR-155自身免疫TH17细胞
- 文献传递
- miR-153通过靶向SORBS2促进LPS诱导的心肌H9C2细胞损伤被引量：1
- 2020年
- 目的:研究微小RNA-153(miR-153)对脂多糖(LPS)诱导的胚胎大鼠心肌H9C2细胞的炎症因子、细胞活力及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:运用LPS建立H9C2细胞损伤模型;将细胞分为anti-miR-Con组(转染anti-miR-Con)、anti-miR-153组(转染anti-miR-153)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-SORBS2组(转染pcDNA-SORBS2)、anti-miR-153+si-Con组(共转染anti-miR-153和si-Con)和anti-miR-153+si-SORBS2组(共转染anti-miR-153和si-SORBS2),转染后用LPS处理。RT-qPCR法检测细胞中miR-153和SORBS2 mRNA的表达;MTT法检测细胞活力;Western blot检测细胞中SORBS2的蛋白表达;ELISA实验检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双萤光素酶报告基因实验验证miR-153与SORBS2的靶向关系。结果:成功构建LPS诱导的H9C2细胞损伤模型;与对照的PBS组相比,LPS处理后H9C2细胞中miR-153的表达明显升高,SORBS2的表达明显降低;敲减miR-153表达或过表达SORBS2均可减少LPS诱导的TNF-α和IL-6释放及细胞凋亡,提高细胞活力;miR-153可抑制含野生型SORBS2的H9C2细胞的萤光素酶活性;敲减SORBS2的表达可逆转抑制miR-153对LPS诱导H9C2细胞的抗炎、抗凋亡及提高细胞活力的作用。结论:miR-153可促进LPS诱导的H9C2细胞炎症因子分泌和凋亡,抑制细胞的活力,发挥促进损伤的作用,其作用机制与靶向SORBS2有关。SORBS2可能成为心肌损伤治疗的新靶点。
- 吴瑞霞黄粮白玉鹏刘晓刚胡立群
- 关键词：心肌损伤
- 苯甲酸钠预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制
- 2021年
- 目的探讨苯甲酸钠(NaB)预处理对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用及相关机制。方法SD大鼠随机分为3组:假手术(Sham)组,I/R组和I/R+NaB组,I/R+NaB组利用NaB预处理,术后24 h检测各组大鼠心肌梗死面积;心电图测定ST段波幅;自动生化分析仪检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTn)I及cTnT水平;流式细胞仪、DAPI、Tunel染色检测心肌细胞凋亡水平;Western印迹检测凋亡蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、胞质核因子(NF)-E_(2)相关因子(Nrf)2、胞核Nrf2、血红素氧合酶(HO)-1蛋白表达;免疫组织化学染色观察p-Akt、HO-1蛋白表达。结果I/R组梗死面积显著高于Sham组,I/R+NaB组梗死面积显著低于I/R组(P<0.05);I/R组ST段波幅显著高于Sham组,I/R+NaB组ST段波幅显著低于I/R组(P<0.05)。I/R组大鼠血清LDH、CK-MB、cTnI及cTnT水平显著高于Sham组(P<0.05),I/R+NaB组大鼠血清LDH、CK-MB、cTnI及cTnT水平显著低于I/R组(P<0.05)。I/R组心肌细胞凋亡率显著高于Sham组(P<0.05),I/R+NaB组心肌细胞凋亡率显著低于I/R组(P<0.05)。I/R组阳性细胞率显著高于Sham组和I/R+NaB组(均P<0.05)。I/R组caspase-3和Bax蛋白显著高于Sham组,Bcl-2蛋白显著低于I/R组(均P<0.05),I/R+NaB组caspase-3和Bax蛋白显著低于I/R组,Bcl-2蛋白显著高于I/R组(均P<0.05)。p-Akt、胞核Nrf2及HO-1蛋白表达I/R+NaB组>I/Rxeg>Sham组(均P<0.05)。结论NaB预处理能有效抑制I/R损伤后心肌细胞凋亡,可能是通过促进Akt/Nrf2通路发挥作用。
- 黄粮吴瑞霞吴刚成忠
- 关键词：苯甲酸钠缺血再灌注心肌
- 经皮耳缘迷走神经刺激对大鼠射血分数保留性心力衰竭模型心肌结构重塑和电重塑及凋亡的干预作用
- 2023年
- 目的 观察经皮耳缘迷走神经刺激对大鼠射血分数保留性心力衰竭模型心肌结构重塑、电重塑及凋亡的干预作用,并探讨这种作用与氧化应激反应的关系。方法 通过对SD大鼠建立动静脉瘘后2周使用结扎的方法封闭动静脉瘘,在短期内增加心脏容量负荷从而构建大鼠射血分数保留性心力衰竭模型。40只大鼠随机分为4组,每组各10只:假手术组、腹主动脉-下腔静脉瘘+封闭组(AVF+L)、腹主动脉-下腔静脉瘘+封闭+经皮耳缘迷走神经刺激组(AVF+L+tVNS)及腹主动脉-下腔静脉瘘+封闭+经皮耳缘迷走神经刺激+乙酰胆碱M_(2)受体拮抗剂使用组(AVF+L+tVNS+M-)。AVF+L+tVNs组在AVF+L基础上进行经皮耳缘迷走神经刺激。AVF+L+tVNS+M-组在AVF+L+tVNs组基础上每天尾静脉注射乙酰胆碱M_(2)受体拮抗剂美索曲明(0.5 mg/kg)。通过心脏超声仪和心脏电生理刺激仪获得各组大鼠心脏结构重塑及电重塑的相关参数。酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠B型尿钠肽前体(NT-proBNP)及氧化应激相关指标的值。苏木素伊红(HE)染色观察心肌结构破坏、细胞排列紊乱及炎性细胞浸润情况。缺口末端标记法(TUNL)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blotting)法检测心肌B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(BCL-2)、BCL-2基因家族中细胞凋亡促进基因(BAX)mRNA及蛋白的表达。结果 AVF+L组大鼠出现以心室壁肥厚及舒张功能不全为特征性的心力衰竭,且左心室射血分数(LVEF)均>50%,考虑大鼠射血分数保留性心力衰竭模型构建成功。HE染色提示AVF+L组大鼠心肌组织结构破坏、细胞排列紊乱及炎性细胞浸润明显,而AVF+L+tVNs组大鼠较AVF+L组心肌组织病理改变均明显缓解。与AVF+L组比较,AVF+L+tVNs组大鼠NT-proBNP值降低[(301.25±16.07)ng/L比(79.33±5.63)ng/L,P<0.05]、E/A值升高(1.28±0.06比1.66±0.05,P<0.05)、BCL-2 mRNA的表达升高[0.08(0.07,0.08)比0.70(0.64,0.76),P<0.05]及BCL-
- 彭明李玉凯王岚黄粮成忠肖杰
- 关键词：迷走神经每搏输出量心力衰竭氧化性应激
- 扩张型心肌病患者外周血单个核细胞miR-155表达及意义
- 2015年
- 目的探讨微小RNA-155(miR-155)在扩张型心肌病(DCM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达变化及其与心功能的关系。方法选择DCM患者(观察组)及同期健康志愿者(对照组)各30例,观察组NYHA心功能Ⅱ级10例、Ⅲ级11例、Ⅳ级9例。采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离两组空腹静脉血中的PBMC,实时荧光定量PCR法检测PBMC中miR-155的相对表达量。比较观察组不同NYHA心功能分级者PBMC中miR-155的相对表达量,并分析其相关性。观察组同时行彩色多普勒检查,记录其左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDd),分析两者与miR-155表达的相关性。结果观察组miR-155相对表达量为0.50±0.24,对照组为1.00±0.23;两组比较,P<0.01。观察组NYHA心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级者miR-155相对表达量分别为0.77±0.10、0.47±0.10、0.23±0.08,多组间及组内两两比较,P均<0.01。观察组LVEF为28%±10%,LVEDd为(70±7)mm。观察组miR-155相对表达量与NYHA心功能分级、LVEF、LVEDd均呈负相关(r分别为-0.94、-0.67、-0.53,P<0.05或<0.01)。结论 DCM患者PBMC中miR-155表达降低,与患者心功能受损的严重程度有关。
- 颜小飞黄粮严莲花胡芬王亚马闻晗卢帅汪朝晖
- 关键词：扩张型心肌病外周血单个核细胞心功能
- 基于钙超载探讨自主神经调控对HFpEF大鼠心肌结构重塑、电重塑及纤维化的影响被引量：2
- 2023年
- 目的 探究自主神经调控对大鼠射血分数保留心力衰竭(HFpEF)模型结构重塑、电重塑及纤维化的影响。方法 SPF级12周龄SD大鼠44只,抽取10只作为对照组,余34只用于建立HFpEF模型。通过腹主动脉-下腔静脉瘘结扎的方式构建HFpEF模型。其中30只建模成功,4只死亡。建模成功的大鼠分为模型组、自主神经调控组(调控组)及自主神经调控+乙酰胆碱M2受体拮抗剂组(调控+拮抗组),每组10只。调控组在模型组基础上经皮耳缘迷走神经刺激。调控+拮抗组在调控组基础上每天经尾静脉注射美索曲明(0.5 mg/kg)。通过心脏超声仪测量心脏舒张末期左心室后壁厚度(LVPWD-D)、舒张末期室间隔厚度(IVS-D)及二尖瓣舒张早期/舒张晚期血流速度最大峰值(E/A)。心脏电生理刺激仪获取心脏的有效不应期(ERP)、单向动作电位时程(MAPD)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测B型尿钠肽前体(NT-proBNP)水平。HE染色观察心肌细胞排列及炎性细胞浸润情况。Masson染色观察心肌纤维化程度。RT-PCR和Western blot检测心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)及其调节蛋白受磷蛋白(PLB)mRNA及蛋白的表达。结果 HE染色可见模型组心肌细胞排列紊乱,细胞间隙不够明显,伴有炎性细胞浸润。Masson染色可见模型组心肌纤维排列紊乱,大量胶原纤维生成。调控组上述病理改变与模型组比较均明显减轻,而调控+拮抗组与模型组相比无明显改善。与对照组比较,模型组NT-proBNP、LVPWD-D、IVS-D、ERP、MAPD、MMP-9 mRNA及蛋白、PLB mRNA及蛋白表达均升高,E/A、TIMP-1 mRNA及蛋白、SERCA2a mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05)。与模型组比较,调控组NT-proBNP、LVPWD-D、IVS-D、ERP、MAPD、MMP-9 mRNA及蛋白、PLB mRNA及蛋白表达均降低,E/A、TIMP-1 mRNA及蛋白、SERCA2a mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。而调控+拮抗剂组上述指标与�
- 彭明李玉凯王岚黄粮成忠肖杰
- 关键词：纤维化迷走神经刺激术结构重塑钙超载
